Varian 400MHz核磁共振谱仪使用 7

华中师范大学Varian Plus-400MHz核磁共振谱仪操作规程化学学院编定2014年 3月Varian Mercury plus 400M 核磁共振谱仪 简易 操作规程1. 打开空压系统,观察压力表示数是否正常。2. 登录,输入用户名和密码,进入 VNMR 操作界面。3. 在采集状态窗口中检查谱仪与计算机的联机状态,键入 su ,建立谱仪与计算机 的联系。4. 键入命令pwd查看当前目录，将当前目录更改为在/export/home/用户名 /vnmrsys/data 下, 也可在 data 目录下建立以自己姓名全拼命名的文件夹。5. 进样:键入命令 e ，打开进样通道，小心放入样品;键入命令 i ，关闭进样通道。6. 选择实验区，键入命令jexpn，建议测量氢谱在expl，测量碳谱在exp2。7. 锁场:点击 acqi ， lock off ， spin off ，将 lockpower 和 lockgain 置于最大值，调节 Z0 使 曲线呈向上台阶状， lock on 。通过调节 lockpower 、 lockgain 和 lockphase ，使 locklevel 在 40-80 左右。8. 自动匀场:键入命令gmapsys，点击autoshim on z。如果自动匀场不成功，或者 自动匀 场后掉锁，重做锁场和匀场。9. 旋转样品:点击 acqi ， 选择 spin on， 转速设为 20， 等待至旋转稳定。 建议测碳 谱不旋转。 l0. 选择实验参数:点击 setup ，选择测试核和溶剂种类，调出标准实验。 更改实验参数。11.采样:键入命令ga。采样结束后,spin off, lock off。12. 保存数据:键入命令 svf ,输入文件名。13. 数据处理:aph相位校正,dscale显示刻度，积分等等14. 打印谱图。键入打印命令，例如:pliv pscale ppf ppa page; pl pscale vp=vp+70 ppf(top vp=vp-70 piv page 等。15. 换样品:键入命令e ,取出样品，放入下一个样品，键入i。回到第6步。16. 实验结束，取出样品，键入exit，退出VNMR操作界面，点击 0K 确认退出。17. 每天最后一位实验者，关闭空压系统，放去冷凝水。18. 填写实验记录，离开实验室。核磁谱仪的初级使用程序入门华中师范大学400M核磁仪是美国Varian公司 (瓦里安公司已经被安捷伦公司收购的产品型号:Mercury Plus 400。400M核磁软件 有自动程序，但允 许手动操作仪器，且实验效果较好。1、仪器外观:核磁共振仪主体 主机柜 打印机 转子和量规 量规的标尺主计算机（sun数据上传计算机空气压力表空气压缩机干燥机和压力计1.1开空气压缩机,红灯亮起,观察空气压力表,数值约在 38psi 处。1.2确认谱仪内是否有核磁管?仪器室内只有两个核磁转子,如果发现只有一 个, 一般是仪器正在进行采样,说明仪器内已有核磁管。杜绝发生放两个样品 管在谱仪 内的情况发生。仔细检查自带的样品管是否有严重的破损现象,使用干净无破损的好管。 2. 放 样品管2.1处理样品管2.1.1 将样品管外表擦干净2.1.2将样品管插入转子2.1.3用量规测量样品管的长度如下图2.2登陆计算机（由于本实验室仪器常年运行,故此步骤可以省略2.2.1 输入用户名:usersname2.2.2 输入密码:password密码不会显示出来如果无法登陆，在密码正确的情况下请选择“ Opt ion ” ” Session ”如果出DE ” 现密码错误的提示,有两种可能:(1输入密码错误，大小写，数字键没按下等。(2被停机，此时数据也无法下载。2.2.3进入操作系统:如下图3 认识核磁软件窗口 :2.3.1核磁操作界面主要由以下几部分组成:(1 Input windows，用于输入命令(2 Graphic windows,用于显示谱图(3 Menu buttons，用于一些菜单控制(4 Text windows，用于显示实验参数，设置实验等(5 Acquisition status windows 主要用于显示谱仪工作状态，包括样品管转 数、是否锁场、是否正在采样、实验总的时间、剩余时间等 .2.4进样品管、锁场:2.4.1 单击“ acqi ”按钮(或在命令输入窗口中输入命令 acqi ，弹出一个对话 框如 下图:进入氢谱实验中2.4.2样品管在量规中测量好高度后，在对话框中，首先LOCK按钮，查看SPIN按钮是否存在,如存在请点击off按钮将spin关闭。而且等到采样窗口的旋转值为零。 才能开始放样品。2.4.3单击eject按钮,听到较大的气流声后，观察核磁共振仪器顶部有无原有样品管升起,请检查梯子的位置,将其扶正,缓慢登上梯子,垂直缓慢取出原有的样品 管。将新 样品管和转子放入核磁进样,新样品管和转子在气流的作用下悬停在 出气口, 正压 好盖压板。2.4.4 放样之后,单击 insert 按钮。等待样品管下降。 听见响了两声后 （第一 声 样品开始进入腔体,第二声表示样品到位 ,方可开始实验。对话框中的字体 颜色变深, 这时鼠标可以点击。样品管缓缓进入磁体腔中2. 4. 5查看 SPIN 按钮颜色是否变深,如存在请点击 on 按钮将 spin 打开。观 察采样窗口的旋转值在10左右。（测定H谱需要，测定C-13谱可以省略。2.4.6点击 Lock 按键,结束放样,并同时锁场 。3. 锁场和匀场:3.1 锁场:3.1.1锁场前,可能会出现下图中的图形:3.1.2 接近锁场点:锁场时，应调节zO,使锁信号升高。调整时，使用鼠标左键单击按钮，减少数值、鼠标右键增加数值。波形图中波的数目在减少,位 置在升高。3.1.3 锁信号过强:Lockpower 和 lockgain 的数值一般不超过 30。3. 1. 4 锁场成功:通过仔细的调整，波形图的下面的红色字体LOCK OFF会变成绿色字体LOCKED, 这一般表明锁场成功。3.2 匀场321反复调整zlc和z2c，先粗调Z1C和Z2C,再细调Z1C和Z2C直到信号最强, 然后，反复调整zl和z2,使信号最强。3.2.2如果锁场困难,可先适当匀场,然后锁场。3.2.3 亦可调入标准场,使磁场处于较好状态,然后在进行锁场、匀场。方法:在命 令输入窗口输入命令 rts(start su 回车324匀场成功，鼠标点击“close”按键。4.设置实验参数:在命令行输入 jexp1“j1 su 回车”进入氢谱,或者输入 jexp2 进入碳谱。本机 jexp3 是 19F 谱 ,jexp4 是 31P 谱。未讲过的参数不允许随意修改和设置,否则有可能造成仪器损坏。一般自能调 整菜单选者窗口的 Acq&0bs 栏目和 Flags&Cond 栏目。4.1在文本显示窗口和菜单显示窗口进行有关设置。在菜单选择窗口可以改动的子菜单。在Acq&Obs栏目下，可以改动“solvent”的溶液种类，在“Transients”改变采样累加 次数。在Flags&Cond栏目下，一般可以改动“Rcvr Gain”的数值。4.1.1设置溶液中溶剂种类:椭圆线框中标明是氢原子，矩形线框溶剂类型是氘代氯仿。在栏目 solvenet 中输入所用溶液，溶液名称如下:重水:d2o氘代甲醇:cd3od二甲基砜DMSO:cd3socd3氘代氯仿:cdcl3氘代二氯甲烷:cd2cl2氘代丙酮:cd3cocd3氘代乙醇:cd3cd2od氘代苯:c6d6氘代乙 酸:cd3cood。4.1.2设置采样累加次数:在栏目 nt 中输入:对于氢谱nt值一般设置为1,对于碳谱nt值一般设置为10,000,但是测量时间就会骤然增加。数值一般是 4或 8的倍数。4.1.3 Rcvr gain 增益调节:计算机上这个值一般设置为30,如果在运行命令ga后出现adc overflow提示，会 有一声响声。应使Rcvr gain=10,或者Rcvr gain=0。如果Rcvr gain=0时任然出现 adc overflow 提示,可能需要将样品的浓度降低。4.1.4 设置谱宽:在 SW( 谱宽 , 单位为 Hz, 乘以 400 为 ppm 。处输入适当的数值。氢谱和碳谱不 同。4.2 在命令行改变参数4.2.1在命令输入窗口中,输入“命令=数值”后回车即可。如: nt=64 回车重新设 置实验后,需重新设置各个参数。4.3设置实验数值后,显示参数。5.采集数据(测试5.1设置实验和相关参数后,在命令输入窗口使用“ga”命令开始测试。5.1.1在命令输入窗口使用“ga”命令，并按下回车键。“go”是执行测样品，得到FID。“ga”是执行测样品，得到FID后,再进行WFT处理, 在计算机屏幕显示谱图。输入“aa”是停止测试。5.1.2在碳谱测试时，由于nt值很大，等待时间很长,可以中途看谱，输入“wft”, “ds”, 在每一个“ds”值后出现新的谱图,如果得到满意的图谱，可以输入“aa”停止测试。5 .2接收器溢出5.2.1如果出现“ ADC overfolw”提示，请在命令输入窗口中输入命令“aa”停止采 样，在命令窗口输入“gain=0”，然后重新输入“ga”命令进行采样.522输入gain=0回车后，重新采样,如果还是过载，请将样品稀释后在进行实验。5.3 在屏幕出现谱的图形后,要进行整理图谱。6. 整理图谱6.1 在命令输入窗口中输入,可以察看谱图。常见命令wft（加窗函数傅立叶变换ft （傅立叶变换f full（显示全部谱图aphx （自动调整相 位aph （调整相位vsadj（自动调整谱图大小Dscale （显示标尺nl （定标尺0点nrl （自 动定标尺0点ref（输入标尺基点的数值Dc（电平校正cdc（取消电平校正bc（基线校正 ds （显示谱图Inset（局部谱图展开Expand （展开谱图6.1.1在命令行输入“aph”或者“ aph dc”回车，出现谱图。在谱图显示窗口中可以 查看谱图的相位。如果相位不好,可以重新进行匀场和采样。也可以在命令行输入“aph x”回车，计算机自动调整相位出现谱图。6.1.2在命令行输入“wft”回车，出现谱图。在谱图显示窗口中可以查看谱图，如果不理想可重新进行匀场和采样。6.1.3输入“dscale”显示谱图的标尺。或者用鼠标点击命令栏上“dscale”按键。谱图下方出现标尺:6.2.1放大谱图,首先在要放大的峰左侧单击鼠标左键,然后在其右侧单击鼠标的 右键,出现的两个红线将峰扩起来。622放大的区域选择后，单击“expand!”按钮将谱图展开。623在命令行输入“nl”回车，在谱图中找到特征物质的特征峰。用鼠标左键点 击峰的最高处，在命令行输入“ref”回车，命令行显示“”（请输入标尺基点数值。输入合适的数值。也可以在命令行输入“ nrl”回车，让计算机自动定出标尺基点。6.3.1看完谱图局部的放大图后，再回看全图，单击“full”此按钮将全谱图显示在计算机屏幕上。再次检查谱图，到此，获得较好的样品的NMR数据。7.打印谱图:（学生跳过此步骤7.1.1在命令行输入“pl pscale”回车，7.1.2在命令行输入“pir ppf”回车，7.1.3在命令行输入“pl text page”回车，本机一般不打印谱图。数据自己用网络传输至自己的计算机中用软件分析。8 . 谱图命名和保存。8.1 实验结束后，应保存谱图，否则所做的实验数据将丢失。注意:本机数据只保留 60天。每人限存60组数据，请实验后及时传送数 据到自己的计算机中。由于本仪器每天测试的样品数据众多，所以必需给数据一个科学，易记，易找的名 字、文件保存路径和文件夹。文件名的格式为:“某年某月某日”-“某课题组某人第几个样品”-“什么谱”。例如:“20140309-wjxiaozhangli001-hl”。文件夹:一般是课题组老师的名字。例如:XiaoWJ文件保存路径:/export/home/Liu/usefidlib/XiaoWJ/文件名8.1.1在命令行输入“ cd”回车。当文件保存的路径正确时，在命令行输入“svf”回 车。按照文件名格式输入文件名,回车后,数据文件被保存在指定文件夹内。如果听 到提示音，则文件名不被接收，需要重新输入命令保存实验数据。8.2在命令行输入“ pwd”回车，检查、确认文件保存的路径是否正确。如果文件 保存路径不对，则需要更改文件储存路径。8.2.1 在命令栏用鼠标左键点击“ main menu”,“file”,“set directory”,“home”,“parent”,用鼠标右键点击进行翻页寻找正确的文件夹。找到后用 鼠标左键点击点选正确的文件夹，在命令栏用鼠标左键点击“change”。在命令行上会 显示正确的文件保存路径。8.2.2在命令行输入“svf”回车。按照文件名格式输入文件名,回车。8.3 更改谱图名称:8.3.1 在命令栏用鼠标左键点击“ program”,“file manger”,“set directory”,“home”,“parent”，用鼠标右键点击进行翻页寻找正确的文件夹，用鼠标左键双击 文件夹,显示出文件名,找到要更改的文件,用鼠标左键点击文件。8.3.2在命令栏用鼠标左键点击“rename”。在命令行输入正确的文件名，回车，计 算机保存更改。8.4 调出谱图8.4.1在命令栏用鼠标左键点击“ main menu”,“file”,“set directory”,“home”,“parent”,用鼠标右键点击进行翻页寻找正确的文件夹。找到后用 鼠标左键点击点选正确的文件夹.8.4.2在命令栏用鼠标左键点击“change”，用鼠标左键点击点选正确的文件夹，在 命令栏用鼠标左键点击“ return”,Toad ”后。8.4.3在命令行输入“ wft”，计算机屏幕显示谱图。8.5 删除谱图（一般不要进行本操作8.5.1在命令栏用鼠标左键点击“ main menu”,用鼠标左键点击“ program”,“file manger”。8.5.2用鼠标左键点击要删除的文件,“put in trash”，文件在文件夹内被删除，但是 暂时保留在右下的 trash 内。9.结束实验:9.1 取出样品管9.1.1实验结束后，或更换样品前,请单击“acqi”按钮,调出菜单栏。9.1.2先用鼠标左键点击spin的off按钮，观察右边采样状态窗口中样品管的旋 转数值变为“0”。再点击LOCK的off按钮,然后才能弹出样品管，更换样品或退出程 序。采样状态窗口中样品管的旋转数值:spinner:off Actual: OHz setting 0Hz921用鼠标左键点击“sample”按钮下的“eject”按键。样品管在气流的作用下升 起。小心登上木梯,取下盖压板,垂直缓慢取出样品管。将样品管从转子中取下。样 品管暂时放在样品管架上。样品管架9.2.2用鼠标左键点击“CLOSE”按钮，完成测量实验。在命令窗口中输入exit命令，退出核磁程序。单击操作系统上的“EXIT”按钮，退 出登陆。或者在桌面上单击鼠标右键，选择Tog out”推迟登陆。10.传输数据文件。在名称为“SUN”的CRT显示器所对应的计算机中保存的数据，请立即用网络将 数据文件传输到自己的计算机、网络邮箱、自己的网络“云端”文件夹等地方。在此计算机左边的联网电脑上通过局域网调出文件，在联网电脑上通过互联网 传输文件至自己的邮箱中。不可用任何介质的实体拷贝复制文件。主计算机（sun数据上传计算机10.1.1在数据上传计算机桌面上用鼠标双击“LeapFTP”。打开局域网传输软件。在下拉菜单的“站点”中，点击“nmr400”建立主计算机和数据上传计算机的连接。显示左右两个窗口。左窗口右窗口10.1.2右窗口显示的是主计算机“nmr400上的文件夹，请选择正确的新保存文件 所在的存储路径，例如:/export/home/老师名/usefidlib/user/xxx。在左边“本地”窗口显示的是数据上传计算机的文件夹的保存路径。请选择准备接受实验数据文件的文件夹。例如:D:nmr400-use-fidlibuser。1021在右窗口显示的是主计算机“n mr400”上的文件夹中选择要传输的新保存的实验数据文件，点击鼠标右键的下拉菜单中的“下载”按键，开始传输文件至数据上传计算机的文件夹 D：nmr400-use-fidlibuser 中。 10.3.1 在左窗口 D： nmr400-use-fidlibuser 中。 将这九个文件找到， 用 Winzip 软件（可以使其它压缩 软件）打包并压缩。 NMR 得到的数据文件夹的结构如图。例如上图所示文件，是 由下图四个文 件组成。10.3.2 打开数据上传计算机上的网络浏览器，将压缩文件传至自己的邮箱里。 10.4.1 在自己联网的计算机中从邮箱中下载文件，解压缩文件，命名编号。 10.4.2 用 MestReNova 核磁共振数据处理软件进行后期工作了。