核酸实验室失控纠正和预防措施

核酸实验室失控纠正和预防措施划分操作区目前，普通PCR尚不能做到单人单管，实现完全闭管操作，但无 论是否能够达到单人单管，均要求实验操作在三个不同的区域内进行 PCR 的前处理和后处理要在不同的隔离区内进行：1、试剂准备区。2、标本制备区。3、PCR 扩增区及分析区。各工作区要有一定的隔离，操作器材专用，要有一定的方向性。如：试剂准备标准制备PCR扩增区及分析区。切记：任何一间的产物及器材不要拿到其他两个工作区。分装试剂PCR 扩增所需要的试剂均应在生物安全柜、装有紫外灯的超净工 作台或负压工作台配制和分装。所有的加样器和吸头需固定放于其中 不能用来吸取扩增后的DNA和其他来源的DNA：1、PCR 用水应为高压的双蒸水；2、引物和dNTP用高压的双蒸水在无PCR扩增产物区配制；3、引物和dNTP应分装储存，分装时应标明时间，以备发生污染 时查找原因。实验室的严格分区及工作程序的严格遵守试剂准备区、样本准备区、扩增区、检测区等必须备有其各自必 需的仪器设备、工作服、手套、加样器和通风系统。在每个区使用的 试剂和废物,必须直接在其各自的区域内分装或包装。操作人员必须 注意防止通过他们的头发、眼镜、首饰和衣服将扩增产物从污染区携 带至清洁区的可能性。化学方法实验台面可使用 10%的次氯酸钠（漂白剂）清洗,然后再用 70%乙 醇或清水洗去次氯酸钠。次氯酸钠具有氧化损伤核酸的作用,从而使 可能的留在实验台面的扩增产物被破坏掉。要注意的是,次氯酸钠不 能区分提取的目的 DNA 和 PCR 扩增产物,用次氯酸钠处理的样本不能 用于核酸扩增检测。在实际工作中,有些物品比如放置扩增反应管的 盘必须从污染区转回到清洁区时,在转回之前,应将其置于 2%10%的 次氯酸钠溶液中过夜,并充分冲洗。扩增产物的修饰如对以前扩增产物进行适当修饰,应可以消除其污染后面新的扩 增检测,但为保证不影响靶核酸的扩增检测,扩增产物修饰方法必须 遵循两个基本原则:扩增产物被修饰后,应可以与随后打增的靶序列区分修饰不能干扰正常的扩增检测。