杂环类药物的分析ppt课件

杂环类药物的分析杂环类药物的分析The Analysis of Hetero drugsThe Analysis of Hetero drugs (1)(1)杂环类药物是合成药物中所占比例最杂环类药物是合成药物中所占比例最多的多的 一大类药物。一大类药物。(2)(2)多为五元环或六元环多为五元环或六元环,单环或并合环单环或并合环.(3)(3)杂环结构较稳定杂环结构较稳定,不易开环不易开环,其性质受其性质受杂原子种类、数目、位置影响杂原子种类、数目、位置影响.(4)(4)杂环上取代基性质较活泼杂环上取代基性质较活泼,常用于分析常用于分析.(5)(5)含氮杂环含氮杂环,其碱性的强弱往往用于分析其碱性的强弱往往用于分析.杂环类药物的特点杂环类药物的特点:第一节第一节 吡啶类药物分析吡啶类药物分析一、结构分析一、结构分析1.1.结构：本类药物均有吡啶环结构：本类药物均有吡啶环Na aa ab bb bg gNCONHNH2NCONC2H5C2H5吡啶吡啶 异烟肼异烟肼 尼可刹米尼可刹米（1 1）母核能与金属盐反应生成有色沉淀；）母核能与金属盐反应生成有色沉淀；（2 2）碱性）碱性:吡啶环上氮原子具有叔胺性吡啶环上氮原子具有叔胺性质，质，pKpKb b=8.8=8.8（水中）；水中）；（3 3）异烟肼）异烟肼:酰肼基有强还原性酰肼基有强还原性,且能与且能与 羰基缩合羰基缩合,氧化还原滴定或比色测定；氧化还原滴定或比色测定；（4 4）尼可刹米）尼可刹米:酰胺基碱性下可水解酰胺基碱性下可水解,放放 出出NH(CNH(C2 2H H5 5)2 2,可用于鉴别。可用于鉴别。（5 5）URUR2 2、性质：、性质：1.1.母核反应：母核反应：（1 1）与金属离子反应生成有色沉淀）与金属离子反应生成有色沉淀 a.a.异烟肼异烟肼,尼可刹米尼可刹米+HgClHgCl2 2 白色沉淀白色沉淀 b.b.异烟肼异烟肼+CuSOCuSO4 4 红棕色红棕色（CuCu2 2OO）尼可刹米尼可刹米+CuSOCuSO4 4+硫氰酸钾硫氰酸钾 草绿色絮草绿色絮 状沉淀状沉淀二、鉴别：二、鉴别：（2 2）开环反应：适用于开环反应：适用于a a，aa未取代，未取代，b b，为烷基或羧基的衍生物。为烷基或羧基的衍生物。CONHNH2NKMnO4或Br2COONaNCNBr溴化氰CNBrCOOHNCHOHCHOCOOHArArNNHCHCHCOOH2Ar-NH2a.a.戊烯二醛反应（戊烯二醛反应（knigknig反应）反应）b.2b.2，4-4-二硝基氯苯反应二硝基氯苯反应（VongerichtenVongerichten反应）反应）CONHNH2NNaOHCOONaNNO2NO2ClNO2NO2COONaNCHOHNO2NO2COONaN醇制醇制KOH加热至熔融加热至熔融2.2.酰肼基团的反应酰肼基团的反应 CONHNHCONHNH2 2NNCOOHCOOHNN4 4e e+NN2 2（1 1）还原反应：）还原反应：与芳醛缩合形成腙，如香草醛、水杨醛、与芳醛缩合形成腙，如香草醛、水杨醛、二甲氨基苯甲醛二甲氨基苯甲醛CONHNH2N+OHOCH3CHONCONHNOHOCH3CH（2 2）缩合反应：）缩合反应：香草醛香草醛异烟腙异烟腙3.3.与酸碱共热，以降解产物鉴别与酸碱共热，以降解产物鉴别吡啶臭味异烟肼、尼可刹米加热或氢氧化钙无水/32CONa二乙胺尼可刹米氢氧化钠试液加热BPBP（19931993）鉴别鉴别尼可刹米尼可刹米：取尼可刹米制成取尼可刹米制成0.0015%0.0015%（W/VW/V）的盐的盐酸溶液（酸溶液（0.0.），），在在230-350230-350nmnm的波长处有的波长处有最大吸收，其百分吸收系数约为最大吸收，其百分吸收系数约为285285。4 4、URUR三、有关物质检查三、有关物质检查（一）异烟肼中游离肼的检查（一）异烟肼中游离肼的检查NCH3NCOOHNCONHNH2V2O5,H2O,O2270,300-400mmHgH2NNH2H2O120-130异烟肼的合成：异烟肼的合成：4-4-甲基吡啶甲基吡啶异烟酸异烟酸氧化氧化缩合缩合异烟肼异烟肼杂质来源：原料引入和降解产生杂质来源：原料引入和降解产生致癌物质致癌物质1 1、TLCTLC法（法（Ch.PCh.P）杂质对照品法杂质对照品法（1 1）样品溶液）样品溶液 异烟肼的水溶液（异烟肼的水溶液（5050mg/mlmg/ml）（2 2）对照溶液）对照溶液 硫酸肼加水制成每硫酸肼加水制成每mlml 0.20 mg0.20 mg （相当于游离肼相当于游离肼5050ugug）溶液溶液（3 3）分离系统）分离系统 异丙醇异丙醇-丙酮（丙酮（3232）（4 4）点样量）点样量 样品液：样品液：1010 l l 对照液：对照液：2 2 l l（5 5）结果判断）结果判断 在供试品主斑点前方与硫酸肼斑点在供试品主斑点前方与硫酸肼斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。相应的位置上，不得显黄色斑点。（6 6）限量计算）限量计算2 25050101050 50 10103 3=0.02%=0.02%TLCTLC法（法（BPBP）杂质对照品法杂质对照品法+自身对照法自身对照法（1 1）样品溶液）样品溶液异烟肼的丙酮异烟肼的丙酮-水（水（1 1 1 1）溶液（）溶液（100100mg/mlmg/ml）（2 2）对照溶液）对照溶液硫酸肼的丙酮硫酸肼的丙酮-水（水（1 1 1 1）溶液）溶液（0.05 0.05 mg/mlmg/ml ）异烟肼的丙酮异烟肼的丙酮-水（水（1 1 1 1）溶液）溶液（0.20.2mg/mlmg/ml）（3 3）分离系统）分离系统乙酸乙酯乙酸乙酯-丙酮丙酮-甲醇甲醇-水水（5020 20 105020 20 10）（4 4）点样量）点样量 样品液：样品液：5 5 l l 对照液：对照液：5 5 l l（5 5）结果判断）结果判断 供试品色谱中出现的杂质斑点强度不大供试品色谱中出现的杂质斑点强度不大于对照溶液色谱斑点（异烟肼）；显色后于对照溶液色谱斑点（异烟肼）；显色后对照溶液色谱中硫酸肼斑点强度大于供试对照溶液色谱中硫酸肼斑点强度大于供试品溶液色谱中的杂质斑点。品溶液色谱中的杂质斑点。（6 6）限量计算）限量计算5 50.050.055 5100100=0.05%=0.05%2 2、比浊法（、比浊法（JPJP）游离肼游离肼+水杨醛水杨醛 水杨醛腙水杨醛腙+水杨醛连氮水杨醛连氮不溶于水（浑浊）不溶于水（浑浊）3 3、差示分光光度法、差示分光光度法游离肼游离肼对二甲氨基苯甲醛对二甲氨基苯甲醛异烟肼异烟肼+对二甲氨基苄叉对二甲氨基苄叉对二甲氨基苯甲醛连氮对二甲氨基苯甲醛连氮456456A AmaxmaxA A4564560 0游离肼游离肼+3%3%丙酮丙酮二甲基甲酮连氮二甲基甲酮连氮A A4564560 0根据：根据：A A对对456456A A供供456456C C对对C C供供=即可计算供试品中游离肼的含量即可计算供试品中游离肼的含量（二）尼可杀米中有关杂质检查（二）尼可杀米中有关杂质检查TLCTLC法（高低浓度对比法）法（高低浓度对比法）（三）硝苯地平中有关物质检查（三）硝苯地平中有关物质检查HPLCHPLC法法第二节第二节 喹啉类药物喹啉类药物一、结构分析一、结构分析1.1.结构：本类药物均有喹啉环结构：本类药物均有喹啉环 N C H(O H)N C H 3 O C H C H 2 2.H 2 S O 4.2 H 2 O（喹核碱）pKb=5.07（喹啉环）pKb=9.7 硫酸奎宁硫酸奎宁硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁2 2、性质：、性质：（1 1）碱性）碱性 分子中两个分子中两个NN原子，喹啉环上的原子，喹啉环上的NN原子为原子为芳香族氮，碱性较弱；喹核碱上的芳香族氮，碱性较弱；喹核碱上的NN原子为原子为脂环氮，碱性强。脂环氮，碱性强。（2 2）旋光性）旋光性（3 3）荧光特性）荧光特性 二、鉴别试验二、鉴别试验1 1、绿奎宁反应（含氧喹啉衍生物）、绿奎宁反应（含氧喹啉衍生物）硫酸奎宁硫酸奎宁硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁溴试液溴试液氨试液氨试液翠绿色翠绿色蓝色蓝色紫红色紫红色H H+H H+2 2、光谱特征（、光谱特征（Ch.PCh.P）3 3、无机酸盐、无机酸盐盐酸环丙沙星（氯化物的鉴别）盐酸环丙沙星（氯化物的鉴别）硫酸奎宁、硫酸奎尼丁（硫酸盐的鉴别反应）硫酸奎宁、硫酸奎尼丁（硫酸盐的鉴别反应）三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查（一）硫酸奎宁中特殊杂质检查（一）硫酸奎宁中特殊杂质检查1 1、酸度、酸度（控制酸性杂质）（控制酸性杂质）2 2、氯仿、氯仿-乙醇中不溶物乙醇中不溶物（控制醇中不溶性杂质和无机盐类）（控制醇中不溶性杂质和无机盐类）3 3、其他金鸡纳碱、其他金鸡纳碱（控制其他生物碱）（控制其他生物碱）第三节第三节 托烷类药物托烷类药物硫酸阿托品硫酸阿托品一、结构分析一、结构分析1.1.结构：本类药物多为莨菪烷衍生的氨结构：本类药物多为莨菪烷衍生的氨基醇和不同有机酸缩合成酯类的生物碱。基醇和不同有机酸缩合成酯类的生物碱。OCOCHCH2OHN CH3.H2SO4.H2O2OCOCHCH2OHN CH3 O氢溴酸东莨菪碱氢溴酸东莨菪碱,HBrHBr,3H,3H2 2OO2 2、性质、性质（1 1）水解性（酯结构）水解性（酯结构）（2 2）碱性（叔胺氮）碱性（叔胺氮）（3 3）旋光性）旋光性二、鉴别试验二、鉴别试验1 1、托烷类生物碱的一般鉴别试验、托烷类生物碱的一般鉴别试验托烷类生物碱托烷类生物碱发烟硝发烟硝酸酸蒸干蒸干残渣残渣氢氧化氢氧化钾钾乙醇乙醇深紫色深紫色2 2、氧化反应、氧化反应3 3、沉淀反应、沉淀反应4 4、硫酸盐与溴化物反应、硫酸盐与溴化物反应莨菪酸莨菪酸硫酸硫酸苦杏仁的臭味（苯甲醛）苦杏仁的臭味（苯甲醛）三、氢溴酸东莨菪碱中特殊杂质检查三、氢溴酸东莨菪碱中特殊杂质检查1 1、酸度、酸度2 2、其他生物碱、其他生物碱3 3、易氧化物、易氧化物阿扑吗啡、不饱和双键的有机物阿扑吗啡、不饱和双键的有机物第四节第四节 吩噻嗪类药物吩噻嗪类药物一、结构分析一、结构分析SNRR12345678910硫氮杂蒽母核；硫氮杂蒽母核；共同点：共同点：不同点：不同点：R R，RR取代基不同取代基不同R RRR盐类盐类药名药名-(-(CHCH2 2)3 3N(CHN(CH3 3)2 2-H HHClHCl盐酸丙嗪盐酸丙嗪-(-(CHCH2 2)3 3N(CHN(CH3 3)2 2-ClClHClHCl盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪-CH-CH2 2CH(CHCH(CH3 3)N(CH)N(CH3 3)2 2-H HHClHCl盐酸异丙嗪盐酸异丙嗪二、性质二、性质1 1、紫外吸收光谱特征、紫外吸收光谱特征 具有三个峰值具有三个峰值205205nmnm、254nm254nm和和300300nmnm附近，两个谷附近，两个谷220220nmnm和和280280nmnm附近；附近；若被氧化则有四个吸收峰，可用于判断若被氧化则有四个吸收峰，可用于判断样品中有无氧化物。样品中有无氧化物。P181P1812 2、易氧化呈色、易氧化呈色 母核中的硫遇氧化剂氧化为砜和亚砜母核中的硫遇氧化剂氧化为砜和亚砜呈现不同的颜色。呈现不同的颜色。3 3、与金属离子络合呈色、与金属离子络合呈色未被氧化的未被氧化的S +Pd S +Pd 2+2+有色配位化合物有色配位化合物砜（亚砜）砜（亚砜）+Pd+Pd 2+2+三、鉴别试验三、鉴别试验1 1、特征的紫外吸收、特征的紫外吸收2.2.显色反应：显色反应：)(红色樱红呈色母核氧化剂(1)(1)氧化剂：氧化剂：H H2 2SOSO4 4、溴水、溴水、FeClFeCl3 3、H H2 2OO2 2 (2)(2)呈色环上的或23PdClFeClS（可用于比色测定）（可用于比色测定）第五节第五节 苯骈二氮杂卓类药物的分析苯骈二氮杂卓类药物的分析 一一.结构分析结构分析CClNCNNHCH3OCH2123456789CClNCNCH2CH3O987654321 氯氮卓（氯氮卓（19551955年合成）年合成）地西泮（地西泮（19591959年合成）年合成）（1 1）二氮杂卓环为七元环，环上氮）二氮杂卓环为七元环，环上氮原子具有强碱性，苯基的取代使碱原子具有强碱性，苯基的取代使碱性降低，可进行非水滴定法测定；性降低，可进行非水滴定法测定；（2 2）UVUV吸收，用于含量测定；吸收，用于含量测定；共同点：共同点：（3 3）环比较稳定，在强酸性下水解，形）环比较稳定，在强酸性下水解，形成相应的成相应的二苯甲酮衍生物二苯甲酮衍生物，可用于鉴，可用于鉴别和比色测定。（氯氮卓水解生成芳别和比色测定。（氯氮卓水解生成芳伯胺基；地西泮水解生成芳仲胺基和伯胺基；地西泮水解生成芳仲胺基和甘氨酸）；甘氨酸）；（4 4）本品多为游离碱，不溶于水，而溶）本品多为游离碱，不溶于水，而溶于甲醇、乙醇和氯仿中。于甲醇、乙醇和氯仿中。1 1、芳伯胺基反应：、芳伯胺基反应：氯氮卓水解生成芳伯胺基氯氮卓水解生成芳伯胺基(重氮化偶合反应重氮化偶合反应)2 2、茚三酮反应：、茚三酮反应：地西泮水解生成甘氨酸（茚三酮反应）地西泮水解生成甘氨酸（茚三酮反应）3 3、硫酸荧光反应：、硫酸荧光反应：本类药物本类药物加硫酸，在紫外灯下，呈荧光。加硫酸，在紫外灯下，呈荧光。地西泮（黄绿色）；氯氮卓（黄色）地西泮（黄绿色）；氯氮卓（黄色）二、鉴别二、鉴别（一）有关物质检查（一）有关物质检查（TLCTLC）（二）降解产物的检查二）降解产物的检查地西泮注射液（地西泮注射液（HPLCHPLC）系统适用性试验系统适用性试验三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查第六节、含量测定第六节、含量测定 （一）非水碱量法：（一）非水碱量法：在水中碱性较弱，不能顺利地进行在水中碱性较弱，不能顺利地进行中和滴定（滴定突跃不明显，难以判中和滴定（滴定突跃不明显，难以判断滴定终点）。断滴定终点）。在酸性非水介质中（如在酸性非水介质中（如HAcHAc中），中），则能显示出较强的碱性，滴定突跃增则能显示出较强的碱性，滴定突跃增大，可以顺利地进行中和滴定。大，可以顺利地进行中和滴定。吩噻嗪类药物母核上氮原子碱性极弱吩噻嗪类药物母核上氮原子碱性极弱,不能进行滴定不能进行滴定,10,10位取代基上位取代基上NN原子为原子为碱性碱性,可在非水介质中以高氯酸标准液，可在非水介质中以高氯酸标准液，以以CVCV为指示剂。为指示剂。1 1测定方法测定方法 供试品：以消耗标准液供试品：以消耗标准液8 8mlml计算。计算。溶剂：溶剂：HAcHAc，一般用量一般用量10301030mlml，滴定剂：滴定剂：0.10.1mol/L HClOmol/L HClO4 4/无水无水HAcHAc 溶液溶液 指示剂：结晶紫指示剂：结晶紫 做空白试验做空白试验 2 2讨论讨论 适用范围适用范围 K Kb b1010-8-8的有机碱盐。的有机碱盐。K Kb b为为1010-8-81010-10-10 选冰醋酸作溶剂选冰醋酸作溶剂K Kb b为为1010-10-101010-12-12 选冰醋酸和醋酐作溶剂选冰醋酸和醋酐作溶剂K Kb b 1010-12 -12 选醋酐作溶剂选醋酐作溶剂4HClOABHHAClOBH4 HA HA不同，对滴定反应的影响也不同。不同，对滴定反应的影响也不同。盐的滴定盐的滴定置换滴定，即用强酸置换滴定，即用强酸（HClOHClO4 4）置换出置换出与生物碱结合的较弱的酸（与生物碱结合的较弱的酸（HAHA）。）。HClOHClO4 4、HBrHBr、HClHCl、H H2 2SOSO4 4、HNOHNO3 3在在HAcHAc中酸强度不相同。中酸强度不相同。HClOHClO4 4HBrHBrHClHClH H2 2SOSO4 4HNOHNO3 3 其它弱酸其它弱酸在水中酸强度相等在水中酸强度相等中难电离）（HAcHgXAcBHHgAcXBH 2222（1 1）氢卤酸盐的测定氢卤酸盐的测定排除方法：排除方法：加入过量的加入过量的HgAcHgAc2 2/HAcHAc溶液溶液氢卤酸氢卤酸HAcHAc中酸性较强，对滴定有影响。中酸性较强，对滴定有影响。（2 2）硫酸盐的测定硫酸盐的测定 （以硫酸奎宁的测定为例）（以硫酸奎宁的测定为例）a.a.直接滴定法直接滴定法 注意硫酸盐的结构，正确判断反应注意硫酸盐的结构，正确判断反应的摩尔比。的摩尔比。N C H(O H)N C H 3 O C H C H 2 2.H 2 S O 4.2 H 2 O（喹核碱）pKb=5.07（喹啉环）pKb=9.7 两个两个NN原子原子l喹啉喹啉NN，属于芳环族属于芳环族NN，碱性较弱碱性较弱l喹核喹核NN，属于脂环族属于脂环族NN，碱性较强碱性较强 在水中硫酸是二元酸，能够解离出两在水中硫酸是二元酸，能够解离出两个氢离子，即个氢离子，即42SOH4HSOH4HSO24SOH 在冰醋酸中硫酸是一元酸，能够解离在冰醋酸中硫酸是一元酸，能够解离出一个氢离子，即出一个氢离子，即42SOH4HSOH 奎宁与硫酸结合时，一分子的硫酸能奎宁与硫酸结合时，一分子的硫酸能与两分子的奎宁结合，即：与两分子的奎宁结合，即：N C H(O H)N C H 3 O C H C H 2 H N C H(O H)N C H 3 O C H C H 2 H+S O 4 2-.N C H(O H)N C H 3 O C H C H 2 H N C H(O H)N C H 3 O C H C H 2 H+S O 4 2-.NCH(OH)NCH3OCHCH2HH+.ClO4.HSO4+-NCH(OH)NCH3OCHCH2HH+.ClO4+-.ClO4滴定反应如下：滴定反应如下：+3+3HClOHClO4 4+用用HClOHClO4 4直接滴定硫酸喹宁时，摩尔比是直接滴定硫酸喹宁时，摩尔比是1313OCOCHCH2OHN CH3.H2SO4.H2O2用用HClOHClO4 4直接滴定硫酸阿托品直接滴定硫酸阿托品硫酸阿托品（莨菪碱）的结构如下：硫酸阿托品（莨菪碱）的结构如下：反应的摩尔比是反应的摩尔比是1111b.b.加入高氯酸钡消除加入高氯酸钡消除H H2 2SOSO4 4的影响的影响 2422NSOHN N C H(O H)N C H 3 O C H C H 2 H N C H(O H)N C H 3 O C H C H 2 H+S O 4 2-.244242422N)HClON(2BaSO)ClO(BaNSOHN)HClON(2)HClON(2HClO2N)HClON(244424加入高氯酸钡，摩尔比是加入高氯酸钡，摩尔比是1212c.c.硝酸盐的测定硝酸盐的测定 HNOHNO3 3在冰在冰HAcHAc中为弱酸，不影响中为弱酸，不影响滴定突跃。滴定突跃。HNO HNO3 3具有氧化性，应采用电位法具有氧化性，应采用电位法指示终点或将指示终点或将HNOHNO3 3破坏分解后再进破坏分解后再进行测定。行测定。（弱酸，不干扰滴定）HAHClOBHClOHAB44d.d.磷酸盐及有机酸盐的测定磷酸盐及有机酸盐的测定磷酸、有机酸为弱酸，不干扰滴定。磷酸、有机酸为弱酸，不干扰滴定。最常用的指示剂是最常用的指示剂是 结晶紫结晶紫 Crystal VioletCrystal Violet（CVCV）紫蓝蓝绿黄绿黄紫蓝蓝绿黄绿黄（碱性区）（碱性区）（酸性区）（酸性区）终点的颜色应用电位法校准。终点的颜色应用电位法校准。终点指示方法终点指示方法 注意事项注意事项a.a.水分的影响及排除水分的影响及排除冰冰HAcHAc和和HClOHClO4 4中都含有一定量的水分中都含有一定量的水分排除法：排除法：配制时，根据冰配制时，根据冰HAcHAc和和HClOHClO4 4含水量，含水量，加入计算量的醋酐。加入计算量的醋酐。费休氏（费休氏（FischerFischer）水分测定法准确测水分测定法准确测出冰出冰HAcHAc和和HClOHClO4 4中含水量，准确加入中含水量，准确加入醋酐。醋酐。b.b.标准溶液的稳定性标准溶液的稳定性 水的膨胀系数是水的膨胀系数是0.210.211010-3-3/C C 冰冰HAcHAc膨胀系数是膨胀系数是1.11.11010-3-3/C C，较大，较大，体积随温度变化较大，且还具有挥发体积随温度变化较大，且还具有挥发性。性。测定样品与标定标准溶液时温度不同，测定样品与标定标准溶液时温度不同，应对浓度进行校正。应对浓度进行校正。)tt(0011.01FF0101其中：其中：0.0011 0.0011：gHAcgHAc的膨胀系数的膨胀系数 t t0 0和和t t1 1：标定标准溶液和测定样品时的温度标定标准溶液和测定样品时的温度 F F0 0和和F F1 1：t t0 0和和t t1 1所对应的标准溶液的所对应的标准溶液的F F值值说明：说明：t t1 1-t-t0 0 1010 C C或贮存时间超过或贮存时间超过3030天天则在临用前必须重新标定标准溶液的则在临用前必须重新标定标准溶液的浓度。浓度。校正公式：校正公式：二、提取中和法二、提取中和法1 1基本原理基本原理 利用本类药物的盐类可溶于水利用本类药物的盐类可溶于水,游离药物不溶于水而溶于有机溶游离药物不溶于水而溶于有机溶剂的性质进行提取，然后进行滴剂的性质进行提取，然后进行滴定的方法。定的方法。即：即：有机有机碱以游碱以游 样品样品 提取液提取液(洗净、脱水等洗净、脱水等)直接加定过量酸标准液直接加定过量酸标准液 提取提取 残渣残渣 水水 or 酸的水溶液酸的水溶液 溶解溶解 有机溶剂有机溶剂 提取提取 OH 碱化碱化 有机碱以有机碱以 盐的形式存盐的形式存在在 蒸去溶剂蒸去溶剂 蒸去溶剂蒸去溶剂 定过量酸标准溶液定过量酸标准溶液 碱标准液滴定碱标准液滴定 残渣残渣 中性乙醇溶解中性乙醇溶解 酸标准液滴定酸标准液滴定 酸提取液用碱标准液滴定酸提取液用碱标准液滴定 重量法重量法干燥、恒重、称量干燥、恒重、称量 有机碱以游有机碱以游离形式存在离形式存在 2 2讨论讨论(1)(1)碱化试剂碱化试剂 常用的碱化试剂常用的碱化试剂 NaOH NaOH、NHNH3 3、NaNa2 2COCO3 3、NaHCONaHCO3 3、Ca(OH)Ca(OH)2 2、MgOMgO等。等。对碱化试剂的要求对碱化试剂的要求 碱化试剂碱性大于被测药物的碱性，即碱化试剂碱性大于被测药物的碱性，即 碱化试剂的碱化试剂的pKpKb b被测药物的被测药物的pKpKb b 选用碱化试剂时应考虑的因素选用碱化试剂时应考虑的因素 具有酯结构（阿托品）易水解，与具有酯结构（阿托品）易水解，与强碱接触时分解，不能用强碱性碱化强碱接触时分解，不能用强碱性碱化试剂。试剂。有脂肪性物质共存时，不能用强碱有脂肪性物质共存时，不能用强碱性的碱化试剂，以免形成乳化而难以性的碱化试剂，以免形成乳化而难以用有机溶剂提取。用有机溶剂提取。氨水是最常用的碱化试剂。氨水是最常用的碱化试剂。NHNH3 3优点优点 氨氨K Kb b值：值：1.751.751010-5-5 一般生物碱一般生物碱K Kb b：1010-6-61010-9-9 氨碱性适当，能使大部分生物氨碱性适当，能使大部分生物碱游离，又不能使酯结构水解。碱游离，又不能使酯结构水解。此外，氨具有挥发性，多余的氨此外，氨具有挥发性，多余的氨可加热除去。可加热除去。(2)(2)提取溶剂提取溶剂 提取溶剂要求提取溶剂要求 不与水相混溶不与水相混溶 沸点低，容易挥散除去沸点低，容易挥散除去 对所提取药物有极大的溶解度，对所提取药物有极大的溶解度，而对其它共存物质不溶或极少溶解而对其它共存物质不溶或极少溶解 与碱化试剂或被测药物不起任何化学与碱化试剂或被测药物不起任何化学 反应反应 常用的提取溶剂常用的提取溶剂氯仿、乙醚，氯仿、乙醚，有时也使用混合溶剂有时也使用混合溶剂氯仿：氯仿：比重大，易于分离比重大，易于分离对大部分杂环类药物都有较大的溶解度对大部分杂环类药物都有较大的溶解度不燃烧，使用安全不燃烧，使用安全氯仿在碱性下受热很容易分解，尤其是碱氯仿在碱性下受热很容易分解，尤其是碱性较强时更容易分解。性较强时更容易分解。乙醚：乙醚：沸点太低，极易挥发沸点太低，极易挥发容易被氧化，着火容易被氧化，着火在水中的溶解度较大在水中的溶解度较大在乙醚中溶解的本类药物不多在乙醚中溶解的本类药物不多 乙醚的应用不如氯仿广泛。乙醚的应用不如氯仿广泛。原理原理:适当适当pHpH下下,用硫酸铈氧化吩噻嗪进用硫酸铈氧化吩噻嗪进 行测定。行测定。开始时开始时,吩噻嗪失去一个电子吩噻嗪失去一个电子 游离基游离基 （红色）（红色）等电点吩噻嗪失去等电点吩噻嗪失去2 2个电子个电子 无色无色 终点：红色终点：红色无色（自身指示剂）无色（自身指示剂）条件：在硫酸酸性下条件：在硫酸酸性下三、铈量法：三、铈量法：（1 1）赋形剂不干扰）赋形剂不干扰,复方制剂中咖啡因、复方制剂中咖啡因、苯丙胺、可待因、巴比妥类药物等不苯丙胺、可待因、巴比妥类药物等不干扰；干扰；（2 2）反应为一价还原（）反应为一价还原（CeCe4+4+CeCe3+3+）,对环上取代基无作用；对环上取代基无作用；（3 3）用于原料药，也可用于制剂分析。）用于原料药，也可用于制剂分析。优点：优点：四、比色法四、比色法（一）酸性染料比色法（一）酸性染料比色法1 1原理原理:BHHBInHHInInBHBHIn2 2主要条件主要条件最主要条件是水相最主要条件是水相的的pHpH。要求：要求：能使有机碱全部以盐的形式存在，酸能使有机碱全部以盐的形式存在，酸性染料能够解离成离子，以便它们定量性染料能够解离成离子，以便它们定量地结合成离子对而转溶于有机相，且又地结合成离子对而转溶于有机相，且又能将剩余的染料完全保留在水相。能将剩余的染料完全保留在水相。B +H+B H+H I n H+I n H+O H O H H+pH pH（酸性）酸性）BHBH+，InInBHBH+InIn-，有机溶剂提取的是有机溶剂提取的是HInHIn pH pH（碱性）碱性）InIn-，BHBH+BHBH+InIn-，有机溶剂提取的是有机溶剂提取的是B B水相水相pHpH的选择方法：的选择方法：理论计算。理论计算。实验求得。实验求得。用待测的有机碱加入一定的酸性染料，用待测的有机碱加入一定的酸性染料，配制成一系列不同配制成一系列不同pHpH值的溶液，分别用有值的溶液，分别用有机溶剂提取后测定有机溶剂提取液的吸收机溶剂提取后测定有机溶剂提取液的吸收度，吸收度值最大的溶液所对应的度，吸收度值最大的溶液所对应的pHpH值就值就是水相的最佳是水相的最佳pHpH值。值。原理：原理：吩噻嗪类药物吩噻嗪类药物可与一些金属离子可与一些金属离子（如（如PdPd2+2+）在适当在适当pHpH值的溶液中形值的溶液中形成有色的络合物，进行比色测定。成有色的络合物，进行比色测定。Pd2+SS2Cl-NSRRPdCl2pH2（二）钯离子比色法：（二）钯离子比色法：（1 1）钯离子试剂：）钯离子试剂：PdCl PdCl2 2和十二烷基硫酸酯钯盐。和十二烷基硫酸酯钯盐。用用PdClPdCl2 2时，形成的有色络合物水中溶时，形成的有色络合物水中溶 解度小解度小,样品量大时样品量大时,产生沉淀产生沉淀.十二烷基硫酸酯钯盐十二烷基硫酸酯钯盐,其络合物溶解度其络合物溶解度 大大,吸收强度增大（约吸收强度增大（约2 2倍）倍）.（2 2）本法优点：）本法优点：氧化产物不干扰氧化产物不干扰。讨论：讨论：(1)(1)直接分光光度法直接分光光度法(2)(2)萃取后分光光度法萃取后分光光度法(3)(3)萃取萃取-双波长分光光度法双波长分光光度法(4)(4)二阶导数分光光度法二阶导数分光光度法五、五、UVUV法法249nm249nm处测定，百分吸收系数法计算。处测定，百分吸收系数法计算。直接分光光度法：直接分光光度法：盐酸异丙嗪片的含量测定盐酸异丙嗪片的含量测定 吩噻嗪类母核在紫外区有三个吸收峰吩噻嗪类母核在紫外区有三个吸收峰205205nmnm、254nm254nm和和300300nmnm附近。附近。盐酸异丙嗪注射液的含量测定盐酸异丙嗪注射液的含量测定 因含抗氧剂维生素因含抗氧剂维生素C C在在249nm249nm处有吸处有吸收，干扰测定。故选用收，干扰测定。故选用299nm299nm处测定。处测定。Ch.P(2005)Ch.P(2005)盐酸氯丙嗪注射液盐酸氯丙嗪注射液 306nm306nm测定测定萃取后分光光度法萃取后分光光度法盐酸盐酸盐酸氯丙盐酸氯丙嗪注射液嗪注射液氨水氨水氯丙嗪氯丙嗪乙醚乙醚乙醚提取液乙醚提取液两次萃取使盐酸氯丙嗪两次萃取使盐酸氯丙嗪与制剂中干扰成分分离，与制剂中干扰成分分离，排除干扰。排除干扰。盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪（V VC C）氯丙嗪的最大吸收波长为氯丙嗪的最大吸收波长为254254nm,nm,其氧化产物在此波长也有吸收其氧化产物在此波长也有吸收,同时同时在在277277nmnm处氧化产物也有吸收处氧化产物也有吸收,且其且其吸收度与在吸收度与在254254nmnm处吸收度相等处吸收度相等,而而氯丙嗪在此波长处无吸收氯丙嗪在此波长处无吸收.故以故以 A=AA=A254254-A-A277 277 定量定量萃取萃取-双波长分光光度法双波长分光光度法-用于校正样品中氧化产物对测定影响用于校正样品中氧化产物对测定影响USP(24)USP(24)盐酸氯丙嗪注射液含量测定盐酸氯丙嗪注射液含量测定A A供供254254nmnm=A A254254nmnm氯氯+A A254254nmnm氧氧A A供供277277nmnm=A A277277nmnm氯氯+A A277277nmnm氧氧由于由于A A254254nmnm氧氧A A277277nmnm氧氧=A=AA=A供供254254nmnm-A-A供供277nm277nm=A A254254nmnm氯氯A A277277nmnm氯氯-消除样品中氧化产物对测定的影响消除样品中氧化产物对测定的影响A A供供254254nmnm=六高效液相色谱法六高效液相色谱法1 1特点：特点：8090%8090%反相色谱分离，最常用十八反相色谱分离，最常用十八烷基硅烷键合硅胶（烷基硅烷键合硅胶（ODSODS）。）。硅胶表面仅有硅胶表面仅有2550%2550%硅醇基可与硅硅醇基可与硅烷化试剂作用，在分离极性化合物特别是烷化试剂作用，在分离极性化合物特别是碱性药物时，裸露的硅醇基和碱性药物发碱性药物时，裸露的硅醇基和碱性药物发生吸附或离子交换作用，而使色谱峰拖尾，生吸附或离子交换作用，而使色谱峰拖尾，保留时间过长，甚至长期保留在色谱柱上。保留时间过长，甚至长期保留在色谱柱上。2 2三种主要方法：三种主要方法：（1 1）加扫尾剂法）加扫尾剂法 以十八烷基硅烷（以十八烷基硅烷（ODSODS）键合的键合的硅胶为固定相，在流动相中加入扫尾硅胶为固定相，在流动相中加入扫尾剂，以抑制或掩蔽固定相表面的游离剂，以抑制或掩蔽固定相表面的游离硅醇基的活性。最常用的扫尾剂是三硅醇基的活性。最常用的扫尾剂是三乙胺（乙胺（TEATEA）。）。（2 2）用硅胶作固定相法）用硅胶作固定相法 在不改性的普通硅胶柱上，利用碱性成在不改性的普通硅胶柱上，利用碱性成分与硅醇基相互作用，以高浓度极性有机分与硅醇基相互作用，以高浓度极性有机溶剂，碱性水相缓冲液为流动相分离碱性溶剂，碱性水相缓冲液为流动相分离碱性药物。药物。（3 3）用金刚烷基硅烷化硅胶作固定相法）用金刚烷基硅烷化硅胶作固定相法 这种固定相表面被一根根短的烃链这种固定相表面被一根根短的烃链（乙基）连着的烃球（金刚烷）将硅胶表（乙基）连着的烃球（金刚烷）将硅胶表面上未反应的硅醇基全部覆盖，使其不能面上未反应的硅醇基全部覆盖，使其不能与极性物质作用。与极性物质作用。