药物分析第二章课件

Identification test of drugs鉴别：判定真伪鉴别：判定真伪检查：安全性、有效性、均一性检查：安全性、有效性、均一性含量测定：有效成分的定量含量测定：有效成分的定量Basic regularity of drug inspectionIdentification test of drug药物的鉴别试验药物的鉴别试验目的：根据药物的分子结构特征，采用物理、化学、或生物学方法，判断(鉴别)药物真伪。适用性：仅用于证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物，并非对未知物化学结构的确证鉴定。要求：方法专属，每个品种一般23项不同类型的鉴别试验。第一节、鉴别试验的内涵第一节、鉴别试验的内涵Principles of Identification Test 一、性状一、性状 和和 物理常数物理常数 二、鉴别项下规定的试验二、鉴别项下规定的试验一般鉴别：区分药物的一般鉴别：区分药物的类别类别专属鉴别：区分专属鉴别：区分个别个别的药物单体的药物单体 (同类或相同母核同类或相同母核)第二节、鉴别试验的项目第二节、鉴别试验的项目Items in Identification Test原原料料药药鉴鉴别别制制剂剂鉴鉴别别一、性状一、性状 和和 物理常数物理常数 外 观溶解度物理常数Characters/DescriptionPhysical Constants外观：外观：指药物的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等。指药物的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等。如如ChPChP对维生素对维生素B1B1的描述为的描述为“本品为白色结晶或结晶性本品为白色结晶或结晶性粉末；有微弱的特臭，味苦；干燥品在空气中迅即吸收约粉末；有微弱的特臭，味苦；干燥品在空气中迅即吸收约4%4%的的水分水分”。对于链霉素片的描述为对于链霉素片的描述为“本品为糖衣片或薄膜衣片，除本品为糖衣片或薄膜衣片，除去包衣后，显白色至微带黄绿色去包衣后，显白色至微带黄绿色”。溶解度：溶解度：不同溶剂中的溶解特性；不同溶剂中的溶解特性；一定程度上反映了药品的纯度。一定程度上反映了药品的纯度。物理常数：物理常数：内在物理特征；内在物理特征；既可鉴别，也可反映纯净的程度。既可鉴别，也可反映纯净的程度。性状性状 和和 物理常数物理常数熔熔 点点固体熔化成液体的温度固体熔化成液体的温度 熔融同时分解的温度熔融同时分解的温度 自初熔至全熔的一段温度自初熔至全熔的一段温度 物理常数（物理常数（Physical Constants）玻璃毛细管测定法：玻璃毛细管测定法：“初熔初熔”：开始局部液化，出现明显液滴时的温度。：开始局部液化，出现明显液滴时的温度。“全熔全熔”：全部液化时的温度。：全部液化时的温度。熔点熔点 及其及其 测定法测定法性状性状 和和 物理常数物理常数第一法第一法：测定易粉碎的固体药品：测定易粉碎的固体药品(一端熔封一端熔封)毛细管放入：传温液加热至较规定熔点低限约低毛细管放入：传温液加热至较规定熔点低限约低10时时 升温速率：升温速率：1.01.5/min；熔融分解；熔融分解 2.53.0/min；重复测定重复测定3次，取平均。次，取平均。第二法第二法：测定不易粉碎的固体药品：测定不易粉碎的固体药品(如脂肪、脂肪酸、石蜡、如脂肪、脂肪酸、石蜡、羊毛脂等羊毛脂等)(两端开口，吸入熔融样品，两端开口，吸入熔融样品，冷冻凝固冷冻凝固测定测定)升温速率升温速率：0.5/min ，供试品在毛细管中开始上升时的温度。供试品在毛细管中开始上升时的温度。第三法第三法：测定凡士林或其他类似物质：测定凡士林或其他类似物质 熔点熔点 及其及其 测定法测定法性状性状 和和 物理常数物理常数比旋度比旋度：在一定波长与温度下，偏振光透过长：在一定波长与温度下，偏振光透过长1dm1dm且每且每1ml1ml中中含有旋光性物质含有旋光性物质1g1g的溶液时测得的旋光度。用的溶液时测得的旋光度。用 表示。表示。吸收系数吸收系数：在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质：在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。摩尔摩尔()与百分吸收系数与百分吸收系数()()。中国药典用：中国药典用：%1cm1E应用应用：鉴别药物：鉴别药物 检查纯度检查纯度 含量测定含量测定(制剂制剂)%1cm1E性状性状 和和 物理常数物理常数e.g.e.g.VitCVitC 熔点熔点190190192192，+20.5+20.5 21.521.5,葡萄糖注射液的含量测定葡萄糖注射液的含量测定依据依据同类同类药物的结构、性质进行的真伪药物的结构、性质进行的真伪鉴别鉴别。无机药物：其无机药物：其 阴、阳离子的特殊反应阴、阳离子的特殊反应;有机药物：共有母核、官能团特征反应。有机药物：共有母核、官能团特征反应。特点：确定特点：确定(区分区分)类别，不能够确定个别品种。类别，不能够确定个别品种。常见一般鉴别试验常见一般鉴别试验：丙二酰脲类、托烷生物碱类、丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物类、有机酸盐、芳香第一胺类、有机氟化物类、有机酸盐、无机金属盐类、无机酸盐、无机金属盐类、无机酸盐、etcetcGeneral identification test二、一般鉴别试验二、一般鉴别试验有机氟化物鉴别方法：鉴别方法：取供试品约7mg，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，用水20ml与0.01mol/L氢氧化钠溶液6.5ml为吸收液，俟燃烧完全后，充分振摇，取吸收液2ml，加茜素氟蓝试液0.5ml，再加12%醋酸钠的稀醋酸溶液0.2ml，用水稀释至4ml，加硝酸亚铈试液0.5ml，即显蓝紫色，同时做空白对照试验。F-+OHOOOHCH2+Ce3+pH4.3NCH2COOHCH2COOHFOOOOCH2CeNCH2COOHCH2COOH 茜素氟蓝蓝紫色配合物蓝紫色配合物水杨酸盐 鉴别方法一：取供试品的稀溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫色。反应原理：本品在中性或弱酸性条件下，与三氯化铁试液生成配位化合物，在中性时呈红色，弱酸性时呈紫色。鉴别方法二：取供试品溶液，加稀盐酸，即析出水杨酸沉淀；分离，沉淀在醋酸铵试液中溶解。+FeCl3OOHOH+FeOOOOHH2O+3HCl依据：依据：特定特定药物药物分子中的分子中的特殊性质、特征基团特殊性质、特征基团或或官能团官能团的的专属反应专属反应 或或 测定测定 进行的进行的 真伪鉴别真伪鉴别。Specific identification test三、专属鉴别试验三、专属鉴别试验C17C17位上有位上有-醇酮基，醇酮基，与四氮唑反应与四氮唑反应e.g.醋酸泼尼松醋酸泼尼松Prednisolone Acetate取本品约1mg，加乙醇2ml 使溶解，加10氢氧化钠溶液2 滴与氯化三苯四氮唑试液1ml，即显红色生物学法生物学法 HPLC、GC鉴别法鉴别法 薄层色谱鉴别法薄层色谱鉴别法 纸色谱鉴别法纸色谱鉴别法 呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法 红外光谱鉴别法红外光谱鉴别法 沉淀生成反应鉴别法沉淀生成反应鉴别法 色谱鉴别法色谱鉴别法 气体生成反应鉴别法气体生成反应鉴别法 测定生成物的熔点测定生成物的熔点荧光反应鉴别法荧光反应鉴别法 第三节、鉴别试验方法第三节、鉴别试验方法Identification Test MethodsF专属性强，耐用性好，灵敏度高，操作简便、快速。F常用方法：化学法，光谱法，色谱法和生物学法。F中药材鉴别方法：还有显微鉴别法和特征图谱或指纹图谱鉴别法。F制剂的鉴别：尽可能与原料药相同；必须：排除辅料干扰；多组分或微量成分，须用更灵敏、专属的方法。F特殊性质：采用特定方法。如手性、晶型等。药物的鉴别方法要求药物的鉴别方法要求指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进行反应，生成易于指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进行反应，生成易于观测的有色产物。观测的有色产物。（1 1）三氯化铁呈色反应：）三氯化铁呈色反应：用于酚羟基或水解后产生酚羟基用于酚羟基或水解后产生酚羟基（2 2）异羟肟酸铁反应：）异羟肟酸铁反应：多用于芳酸及其酯类、酰胺类多用于芳酸及其酯类、酰胺类（3 3）茚三酮呈色反应：）茚三酮呈色反应：用于用于AA AA 和和 结构中含有氨基糖单元的药物结构中含有氨基糖单元的药物（4 4）重氮化）重氮化-偶合显色反应：偶合显色反应：用于芳伯氨基或潜在芳伯氨基用于芳伯氨基或潜在芳伯氨基（5 5）氧化还原显色反应及其它颜色反应）氧化还原显色反应及其它颜色反应多巴胺等酚性药物与三氯化铁试液呈色多巴胺等酚性药物与三氯化铁试液呈色加碱溶液后的变色反应加碱溶液后的变色反应1.1.呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 2.2.沉淀生成反应鉴别法沉淀生成反应鉴别法 （1 1）与重金属离子的沉淀反应）与重金属离子的沉淀反应维生素维生素B1与碘化汞钾生成与碘化汞钾生成淡黄色淡黄色沉淀沉淀 BH2HgI4。（2 2）与生物碱沉淀剂的反应）与生物碱沉淀剂的反应丙二酰脲类药物与硝酸银反应丙二酰脲类药物与硝酸银反应 NHNOONaOR1R2+AgNO3+Na2CO3NHNOOAgOR1R2+NaHCO3NaNO3NHNOOAgOR1R2NNAgOOAgOR1R2+AgNO3+Na2CO3+NaCHO3NaNO3The reagent can be prepared by adding 10 grams of vanillin and 5 milliliters of acetaldehyde to 500 milliliters of ethanol 常用的荧光发射形式：常用的荧光发射形式：（1 1）药物本身可在可见光下发射荧光；）药物本身可在可见光下发射荧光；（2 2）药物溶液加硫酸后，在可见光下发射荧光；）药物溶液加硫酸后，在可见光下发射荧光；（3 3）药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光；）药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光；3.3.荧光反应鉴别法荧光反应鉴别法（4 4）药物和间苯二酚反应后，发射出荧光及药）药物和间苯二酚反应后，发射出荧光及药物经其它反应后，发射荧光。物经其它反应后，发射荧光。（1 1）大多数的胺（铵）类药物、酰脲类药物以）大多数的胺（铵）类药物、酰脲类药物以及某些酰胺类药物，可经强碱处理后，加热，及某些酰胺类药物，可经强碱处理后，加热，产生氨（胺）气。产生氨（胺）气。（2 2）化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，）化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加热，发生硫化氢气体。加热，发生硫化氢气体。（3 3）含碘有机药物，经直火加热，可生成紫色）含碘有机药物，经直火加热，可生成紫色碘蒸气；含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水碘蒸气；含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙醇可产生醋酸乙酯的香味。解后，加乙醇可产生醋酸乙酯的香味。4.4.气体生成反应鉴别法气体生成反应鉴别法氟胞嘧啶紫外光谱鉴别 本品本品8 8/ml的盐酸溶液的盐酸溶液(9100(91000.1mol/L)，最大吸收波长最大吸收波长286nm286nm，吸光度约为，吸光度约为0.570.57，最小吸收波长最小吸收波长244nm244nm。aba:Aa:A晶型晶型;b:Bb:B晶型晶型(有效晶型有效晶型)e.g.棕榈氯霉素棕榈氯霉素的石蜡糊片的石蜡糊片IR谱谱氯羟去甲安定红外光谱鉴别氯羟去甲安定红外光谱鉴别氯羟去甲安定的测定：氯羟去甲安定的测定：“取本品，经干燥后用溴化钾压片法测定取本品，经干燥后用溴化钾压片法测定其红外光吸收图谱中其红外光吸收图谱中3440cm-1，3220 cm-1，1695 cm-1，1614 cm-1，1324 cm-1，1132 cm-1以及以及828 cm-1波数附近处有吸收波数附近处有吸收”。氨苄西林四种结晶态氨苄西林四种结晶态 粉末粉末x-x-射线衍射射线衍射鉴别鉴别sr混sRsRElectron scanning microscope DNA testing for a murder investigation,1987 1：Notoginsenoside R1;211：Ginsenoside Rg1,Re,Rf,Rb1,Rg2,Rc,Rb2,Rb3,Rd and Rg3