屏障动物实验室工作人员岗前培训

*实验动物研究中心屏障动物实验室工作人员岗 前 培 训2011年2月目录外单位在我中心开展动物实验流程 2一、提出实验意向、洽谈实验细节 3二、提交实验动物使用计划 3三、屏障动物实验室工作人员岗前培训内容 31、屏障设施概述 4（1）、概念 4（2）、屏障设施的布局 42、进入屏障设施实验人员的要求 6（1）、屏障设施动物实验人员的卫生及健康检查 6（2）、屏障设施动物实验人员卫生管理 63、屏障动物实验室工作流程 7（1）、进入屏障实验区 7（2）、人员进入屏障动物实验室的步骤 7（3）、动物进入屏障动物实验室的步骤 8（4）、物品进入屏障动物实验室的注意事项 8（5）、进入屏障动物实验室后的准备工作 9（6）、屏障动物实验室内工作的注意事项 9（7）、离开屏障动物实验室的注意事项104、屏障动物实验室常见突发事件的应急处理 10（1）、意外断电 10（2）、动物咬伤 11（3）、漏电 11外单位在我中心开展动物实验流程向我单位提出实验意向、洽谈实验细节向我单位提交实验动物使用计划签订实验室使用协议进行屏障动物实验室工作人员岗前培训实验开始前准备工作（动物、仪器等的传入）进行实验实验结束收尾工作（动物、取材、数据的传出）各项费用的结算一、提出实验意向、洽谈实验细节外单位在我中心开展动物实验首先需要提出实验意向，包括：实验名称、实验方案、实验周期、实验人员（具体进入屏障内工作的实验人员）、实验动物使用计划、实验器材及其他特殊要求。同时实验单位须向我中心保证不得在屏障设施内有任何威胁屏障安全运转的行为或实验操作（包括不得违反各项操作规程、不得带入任何病原微生物等）。二、提交实验动物使用计划及时提交实验动物使用计划是动物实验顺利进行的前提和保障。实验动物使用计划包括以下内容：动物品系、数量、性别、体重或周龄、需求时间。分批使用实验动物的还要注明使用每批动物的间隔时间。如需外购实验动物在我中心开展动物实验必须征求我中心同意。三、屏障动物实验室工作人员岗前培训内容为保证在屏障内各单位实验的顺利进行、及屏障设施的安全运转，所有进入屏障设施的实验人员都必须进行屏障动物实验室工作人员岗前培训。培训内容包括：屏障设施的基本概念、了解我中心屏障动物实验室的各个区域及其功能、学习屏障动物实验室各项SOP、屏障动物实验室工作流程、常见突发事件的应急处理。1、屏障设施(Barrier Facility)概述（1）、概念是指一个相对密闭的实验动物设施环境，设有恒温、恒湿和除菌换气系统。要求送入空气的洁净度达10,000级，室内保持正压，具有严格的微生物控制，用以饲养清洁级或SPF级动物。（2）、屏障设施的布局屏障设施一般分为清洁区、污染区和外部。凡是进入该设施内的物品均需经过消毒灭菌处理，人员经过专门培训，进入清洁区前经淋浴，更换无菌衣帽，遵循严格的操作规程和管理制度，保证屏障内不被污染。同时，设施内产生的污染气体和尘埃也不能污染外部，一般应根据设施内产生的污染物的特点，采取行之有效的方法。屏障设施的组成*实验动物中心屏障动物室实验区平面图五号动物实验室清洁走廊六号动物实验室污染走廊三号动物实验室四号动物实验室污染走廊一号动物实验室二号动物实验室传递窗高压蒸汽灭菌锅清洁物品贮存库动物检验检疫间缓冲间缓冲间洗刷间男内更衣室淋浴间男外更衣室走廊女内更衣室淋浴间女外更衣室办公室动物尸体暂贮间卫生间电梯间走 廊图例人员走向物品走向 人员、物品走向洁净区2、进入屏障设施实验人员的要求进入屏障设施的实验人员必须经过特定的技术培训，这是屏障设施内安全和标准化运行的前提也是实验结果真实可信的保证。（1）、屏障设施动物实验人员的卫生及健康检查检查、了解动物实验人员及其家庭有无过敏史，尤其是对动物的皮屑、血液、尿液等有无过敏反应；应没有明显的运动、呼吸、循环等系统障碍。重点检查人与动物存在交叉传染的细菌如沙门氏菌、布氏杆菌、结核杆菌等，真菌如皮肤真菌及寄生虫等。与动物接触的人员每年应进行1次健康状况检查。（2）、屏障设施动物实验人员卫生管理主要控制好设施内人员的清洁卫生，否则容易通过人员进出污染设施，因此，必须建立屏障设施内人员卫生管理规程，并由指定负责人检查、记录、实施。其卫生管理有以下要求： 设施内作业人员要养成无菌观念和清洁习惯，勤洗头、勤修剪指甲及胡须等。 皮肤有损伤、炎症、瘙痒症者，对化学纤维、化学试剂、药品及动物等有过敏反应者，手汗严重者不宜进入洁净区。 患流感、感冒、咳嗽、喷嚏者、腹泻者、头皮多者，者等待其恢复正常健康后方可进入洁净区。 禁止化妆进入洁净区，女性经期不宜进入屏障设施工作。 禁止在洁净区内吸烟、进食和饮水。吸烟后30min内或饮酒后不能进入洁净区。3、屏障动物实验室工作流程（1）、进入屏障实验区进入屏障实验区要通知屏障实验室管理人员，在非工作日进入屏障区要事先与屏障实验室管理人员沟通。进入和离开屏障区都必须填写进出记录，并更换拖鞋。进入屏障动物实验区需更换实验区拖鞋。进出屏障动物实验室需填写实验室进出记录。进入屏障实验区开展一个新实验还需填写与实验相关的各种表格（2）、人员进入屏障动物实验室的步骤： 进入外更衣室，关闭外侧门。脱下的衣服及其他物品放在更衣柜内（个人物品如钥匙、手表、饰品等禁止带入洁净区，请事先妥善保管）。 通过淋浴间，进入内更衣室，先用外科洗手液将双手反复搓洗消毒后才能接触内更衣室的无菌物品。 先戴一次性口罩，再穿上隔离服，最后戴上一次性手套。 打开内更衣室紫外灯开关同时关闭照明灯开关，迅速离开内更衣室。 进入风淋间进行风淋后进入清洁走廊。注意事项： 要尽量减少进入洁净区的人次。 未按规定处理的任何物品不能带入洁净区。 在屏障设施内操作人员动作幅度要小，不能拖步行走和跳跃。 各区域要随手关门，并更换在该区域内使用的拖鞋，实验人员不得进入与其实验无关房间。 禁止在洁净区内解(拉)开工作服暴露身体，戒除在操作中用手摸口、鼻、眼睛和头发的习惯，手更不得接触暴露部位。 严格执行人流、物流、动物流单向流动的原则。（3）、动物进入屏障动物实验室的步骤： 动物到达后在屏障外检查运输盒是否完好，有无破损情况。 按照动物运输箱上的标签，核对动物的出生日、周龄或体重、品系名、性别、数量、供应单位名称、动物的微生物控制等级等与要求是否相符。 运输盒表面用消毒液喷雾或擦拭消毒。 确认传递窗两侧门关闭后，再打开外侧门，将运输盒放入。 打开传递窗紫外灯，15min照射。 打开内侧门，将运输盒搬入屏障清洁区。 打开运输盒盖，将动物移入饲养盒内，加入饲料与饮水瓶。在动物饲养盒上挂上标签，记录必要的背景资料。 取出动物后的运输盒，尽快从传递窗或传递室传出。（4）、物品进入屏障动物实验室的注意事项：进入实验动物屏障设施内的物品品种多、数量大、无菌技术要求严格。必须严格执行净化操作规程。屏障动物实验室内常用的物品概括起来有以下几类。玻璃类 注射器、试管、烧杯、量筒、培养皿等。金属类 各类器械、针头和各种小型仪器设备、笼架、笼盒、容器等。塑胶类 各类实验用胶管、连接管、塑料动物笼盒及容器等。棉布、纱布类 棉球、工作服、帽、鞋、创巾、创布等。液体 实验用水、卫生用水、动物饮用水、试剂、培养基等。饲料 颗粒饲料、粉状饲料及特殊饲料。垫料 刨花、纸屑等。纸张 各种记录用纸、资料等。以上各种物品能进行高压蒸汽灭菌的尽量使用高压蒸汽灭菌，不能高压蒸汽灭菌的可根据其具体情况选择消毒液表面灭菌后经传递窗紫外灯辐射30min后传入屏障实验室。饲料应使用60Co辐照灭菌。（5）、进入屏障动物实验室后的准备工作：计划好当日工作内容，在洁库配好消毒液，取足当天所需物品、实验器材、动物饮水、饲料等，一次移入实验室，遵循人员物品单向流动的原则。（在准备进入实验室前返回内更衣室关闭紫外灯开关）。（6）、屏障动物实验室内工作的注意事项： 打开实验室工作灯，进入实验室确认实验室有无异常。包括室内温度、湿度（一般屏障动物实验室要求温度在1626之间，相对湿度在4070之间）、水瓶有无漏水、有无动物逃逸、室内有无其他异常等。如有异常要及时与实验室管理人员沟通。 检查每盒动物的饮水及摄食状况，若饮水及摄食正常则继续一天的工作。若饮水及摄食不正常的动物笼，先检查是否饮水瓶阻塞，再观察动物是否有疾病征兆。若有，告知实验室管理人员。 发现动物死亡，要调查死亡原因，判断事故死亡还是异常死亡，不能确定原因的要将整盒动物送出屏障待查，并立即告知实验室管理人员，不得隐瞒。 动物饲喂及给水：灭菌饲料必须使用料铲添加，不能直接用手拿取。饲料用料斗给食，落在地上的不能使用。饮水要保证连续不断，必须拧紧瓶塞，防止瓶塞漏水造成动物溺死。还应常检查动物在吸水过程中，口内食物颗粒和唾液可倒流入水瓶。为避免微生物污染水瓶，水瓶灭菌后仅限一次性使用。严禁未经消毒的水瓶继续使用。完成当日实验离开实验室前应再次检查水瓶和饲料。 如工作需要从一个实验室到另一个实验室内，双手应放在消毒液中消毒，并脱去该实验室的拖鞋，进入另一实验室后换上新的拖鞋。 使用屏障动物实验室内仪器设备要及时登记，如有异常要及时告知实验室管理人员。（7）、离开屏障动物实验室的注意事项： 整理实验室中物品、器械。 登记实验室温湿度、压力记录。 将污物移至污染走廊（污物中如有实验处死动物必须保证动物死亡才能移出实验室）。 打扫实验室内卫生。饲育架、操作台等要用配好的消毒液擦拭，地面上的污物、垫料、饲料残渣要以从清洁走廊到污染走廊的方向先清扫干净，再用拖布沾消毒液擦拭干净。 关闭实验室工作灯、对讲机并断开一切电源，确认无异常后离开。 将污物及污水由缓冲间带出清洁区。 登记离开屏障动物实验室的时间。 将换下的隔离服放入洗刷间洗衣机旁的整理箱内。 实验结束后实验单位如需带走实验动物须事先告知实验室管理人员。在实验室管理人员在场的情况下方可进行。外单位运输实验动物的笼具必须远离屏障设施，由我中心综合办公室代为发放。4、屏障动物实验室常见突发事件的应急处理在屏障动物实验室发生任何突发事件请在第一时间通知我科室工作人员。（1）、意外断电 意外断电时，已进入屏障动物实验室的实验人员在所处的位置原地待命，禁止开启各实验室的门，以减少空气的流动。同时借助应急灯关闭正在操作的设备，待恢复供电后再逐个启动。 未进入屏障动物实验室的实验人员在休息室等待，待电力供应正常后再进入屏障系统。 如紧急备用发电系统无法立即启动，或为长时间停电，实验人员应借助应急灯迅速离开屏障动物实验室。以免实验人员进出屏障设施而引起的温度升高、室内外空气的对流等而影响动物的健康和质量。 恢复正常供电时，应逐个启动相关设备，以免瞬间的高启动电流引起的设备故障。 恢复供电后观察实验室的动物情况(死亡、出汗、行动状况等)及设备的运行等情况。（2）、动物咬伤 向实验室管理人员报告。 如伤口不大，可当场进行适当处理，我中心常备紧急救济所需要的基本物品，如棉花、纱布、胶布、消毒水、70酒精、碘伏、双氧水、抗生素等。 如感身体不适，应在接受适当治疗与防治后即刻送往医院进行诊治，并向有关医师与兽医师报告并做好相关记录。（3）、漏电 所有进入屏障实验区的人员应掌握一定的用电常识及一般电源维护知识。 在操作开、关电源时，应注意本身及场所具备干燥、绝缘不导电，以防漏电伤及工作人员。 严禁使用潮湿的用电器，以防漏电伤及工作人员。 不慎触电受到伤害，抢救者应先关掉漏电电源再行抢救。 注意高、低压电的安全性，若有高压电，除非具有相当的专业知识及工具，否则应避免碰触或操作，以免因操作不当或了解不够而伤及自身安全或导致更大的漏电灾害。