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2020/8/10,第四章高效液相色谱法和超临界流体色谱法,4.2.1 高效液相色谱仪与结构流程 4.2.2 主要部件 4.2.3 检测器,第二节高效液相色谱仪,instrument of HPLC,High performance liquid chromatography and Supercritical fluid chromatography,2020/8/10,4.2.1 液相色谱仪与结构流程,2020/8/10,液相色谱仪（2）,2020/8/10,液相色谱仪（3）,2020/8/10,液相色谱仪（4）,2020/8/10,液相色谱仪（5）,2020/8/10,液相色谱仪（6）,2020/8/10,1. 结构流程,2020/8/10,2020/8/10,4.2.2 主要部件,(1) 高压输液泵 主要部件之一，压力：150105350105 Pa。 为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相(10m)，液体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。 应具有压力平稳，脉冲小，流量稳定可调，耐腐蚀等特性。,（动画）,2020/8/10,(2) 梯度淋洗装置,外梯度（高压梯度）: 利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。,内梯度（低压梯度）: 一台高压泵, 通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。,2020/8/10,(3) 进样装置,流路中为高压力工作状态，通常使用耐高压的六通阀进样装置， 结构如图所示：,2020/8/10,(4) 高效分离柱,柱体为直形不锈钢管，内径16 mm，柱长540 cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。,2020/8/10,(5) 检测器,紫外检测器 示差折光检测器 荧光检测器 光电二极管阵列检测器,2020/8/10,4.2.3 检测器,a. 紫外检测器 应用最广，对大部分有机化合物有响应。 特点：,灵敏度高； 线性范围宽； 流通池可做得很小(1mm 10mm ，容积 8L)； 对流动相的流速和温度变化不敏感； 波长可选，易于操作； 可用于梯度洗脱。,2020/8/10,b. 光电二极管阵列检测器,紫外检测器的重要进展； 光电二极管阵列检测器：1024个二极管阵列，各检测特定波长，计算机快速处理，三维立体谱图。,2020/8/10,2020/8/10,光电二极管阵列检测器,2020/8/10,三维：光谱-色谱图,2020/8/10,c. 示差折光检测器（Differential refractive index detector）,除紫外检测器之外应用最多的检测器。 可连续检测参比池和样品池中流动相之间的折光指数差值。差值与浓度成正比。,通用型检测器（每种物质具有不同的折光指数）。 灵敏度低，对温度敏感，不能用于梯度洗脱。 偏转式、反射式和干涉型三种。,2020/8/10,示差折光检测器,2020/8/10,d. 荧光检测器（Fluorescence detector）,高灵敏度，高选择性。 对多环芳烃，维生素B，黄曲霉素，卟啉类化合物，农药，药物，氨基酸，甾类化合物等有响应。,2020/8/10,请选择内容,结束,4.1 高效液相色谱法的特性 4.2 高效液相色谱仪 4.3 液相色谱的固定相与流动相 4.4 液相色谱中的主要分离类型 4.5 液相色谱分析条件的选择 4.6 高效液相色谱法的应用 4.7 离子色谱法 4.8 超临界流体色谱法,
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