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空气、食品接触面微生物检验方法、检验标准1、目的：检测生产车间空气、操作人员手部、与食品有直接接 触面的机械设备的微生物指标，生产区域环境当中病原微生 物的监控，达到规定标准，以控制食品成品的质量。2、参照标准：中华人民共和国国家标准一次性使用卫生用品卫生标 准GB15979 1995、 HACCP原理与实施、中华人民共和 国国家标准公共场所空气微生物检验方法细菌总数测定 GB/T 18204.1、中华人民共和国进出口商品检验行业标 准 SN 0169-92/SN 0172-92/ SN 0170-92,出入境检验检疫局二000四年出入食品微生物检验培训教材中出入食 品生产厂卫生细菌检验方法、日本东京冷冻食品检验方法。3、采样与检测方法：3.1空气的采样与测试方法3.1.1样品采集：（1）取样频率：a）车间转换不同卫生要求的产品时，在加工前进行采样，以 便了解车间卫生清扫消毒情况。b）全厂统一放长假后，车间生产前，进行采样。c）产品检验结果超内控标准时，应及时对车间进行采样，如有检验不合格点，整改后再进行采样检验。d) 实验性新产品，按客户规定频率采样检验。e) 正常生产状态的采样，每周一次。(2) 采样方法在动态下进行，室内面积不超过30 m2,在对角线上设 里、中、外三点，里、外点位置距墙1m;室内面积超过 30 m2,设东、西、南、北、中五点，周围4点距墙1m。 采样时，将含平板计数琼脂培养基的平板(直径9 cm)置采样 点(约桌面高度)，并避开空调、门窗等空气流通处，打开平 皿盖，使平板在空气中暴露5 min。采样后必须尽快对样品 进行相应指标的检测，送检时间不得超过6h,若样品保存 于04C条件时，送检时间不得超过24h。3.1.2菌落培养：(1) 在采样前将准备好的平板计数琼脂培养基平板置37C1C培养24 h，取出检查有无污染，将污染培养基剔 除。(2) 将已采集样品的培养基在6 h内送实验室，细菌总数于 37C + 1C培养48h观察结果，计数平板上细菌菌落数。(3) 菌落计算：a) 记录平均菌落数，用”个/皿”来报告结果。用肉眼直接 计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用510倍放 大镜检查，不可遗漏。b）若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以 2个或2个以上菌落计数。3.2工作台（机械器具）表面与工人手表面采样与测试方法:3.2.1样品采集：（1）取样频率：a）车间转换不同卫生要求的产品时，在加工前进行擦拭检验, 以便了解车间卫生清扫消毒情况。b）全厂统一放长假后，车间生产前，进行全面擦拭检验。c）产品检验结果超内控标准时，应及时对车间可疑处进行擦 拭，如有检验不合格点，整改后再进行擦拭检验。d）实验新产品，按客户规定擦拭频率擦拭检验。对工作表面消毒产生怀疑时，进行擦拭检验。f）正常生产状态的擦拭，每周一次。（2）采样方法：a）工作台（机械器具）：用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检 物体表面（取与食品直接接触或有一定影响的表面）取 25cm2的面积，在其内涂抹10次，然后剪去手接触部分棉 棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。b）工人手：被检人五指并拢，用浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面，从指尖到指端来回涂擦10次，然后剪去手接触 部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内 送检。(3) 采样注意事项：擦拭时棉签要随时转动，保证擦拭的准确性。对每个擦 拭点应详细记录所在分场的具体位置、擦拭时间及所擦拭 环节的消毒时间3.2.2细菌大肠菌群的检测培养：样液稀释：将放有棉棒的试管充分振摇。此液为1： 10 稀释液。如污染严重，可十倍递增稀释，吸取1ml 1: 10样 液加9ml无菌生理盐水中，混匀，此液为1: 100稀释液。3.2.2.1细菌总数：(1)以无菌操作，选择12个稀释度各取1ml样液分别注入 到无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿(平行样)，将 已融化冷至45C左右的平板计数琼脂培养基倾入平皿， 每皿约15ml，充分混合。(2) 待琼脂凝固后，将平皿翻转，置36C + 1C培养48 h 后计数。(3) 结果报告：报告每25cm2食品接触面中或每只手的菌落 数3.2.2. 2大肠菌群：(1)平板法：a)以无菌操作，选择12个稀释度各取1ml样液分别注入 到无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿(平行样)，将已 融化冷至45C左右的去氧胆酸盐琼脂培养基倾入平皿，
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