赛润ELISAclassic风疹病毒IgGIgM

赛润 ELISA classic 风疹病毒 IgG/IgM目录1.用途2.诊断意义3.赛润 ELISA classic- 检测原理4.试剂盒构成5.检测所需物质，试剂盒未提供6.储存和稳定性7.赛润 ELISA classic的检查环节 7.1注意事项 7.2样品准备和储存 7.3试剂盒反映试剂的准备工作 7.4检测程序概要 7.5检测过程8.检测成果评估 8.1 4PL单点定量法 8.2检查有效性原则 8.3计算赛润 ELISA classic风疹病毒 IgG/IgM（定量） 8.4检测成果分析9. 性能特性 9.1反复性 9.2 敏感性和特异性10. 风疹病毒IgG抗体的亲和力评估11. 警告 11.1警告和安全措施 11.2废料解决12.参照文献 V9.03/07-1赛润 ELISA classic 风疹病毒 IgG/IgM酶联免疫测定法体外诊断人体抗体（IgG/IgM） - 只限用于体外诊断- IgG试剂盒（定量） 编号 ESR129GIgM试剂盒（定量） 编号ESR129M检测评估原则: Dade Behring BEP III / BEP , DSX, 手动操作1.用途 赛润 ELISA classic 风疹病毒 IgG/IgM用于定性和/或定量检测人体内血清、脑脊液或血浆中抗风疹病毒的抗体。检测抗风疹病毒IgG和IgM对于风疹病毒的血清学研究具有特殊的价值，如判断机体免疫状态及初次感染。2.诊断根据 风疹病毒是一种人类病原体，属于RNA病毒的披膜病毒科，可通过飞沫和直接接触等方式传播，潜伏期一般为10-21天。大概50%的感染病例初期伴有弥散性斑疹，随后这些微小的斑疹也许融合。出生后感染一般并无大碍，有25-30%的患者尽管浮现心肌炎，神经炎，耳炎，支气管炎，脑炎等并发症，也属于亚临床感染。风疹病毒感染的临床诊断都应有血清学证据的支持，由于皮疹和关节炎这些临床症状也可以由其他病毒引起。（见1.，2.）妊娠期风疹感染也许导致胎儿受到严重损伤及多系统疾病。因此，妊娠期风疹的诊断就尤显重要。当其她的检查系统（如血细胞凝集克制实验）的成果为弱阳性或可疑，不能由此判断免疫状态的时候，免疫球蛋白G-酶联免疫吸附实验（IgG-Elisa）在确认检查成果和判断免疫状态方面就非常重要了。一般来讲，IgM-Elisa (免疫球蛋白 M-酶联免疫吸附实验)的阳性成果是初次感染的指标。患者感染后，抗风疹病毒的IgM抗体一般存在1-2个月，但也也许在可检测水平上维持一年。由于风疹再次感染也也许产生IgM（免疫球蛋白M）抗体，在这种状况下，对所有IgM检测成果阳性的患者取双份血进行检测是至关重要的，并且我们也应苏醒的结识到，没有任何一种血清检测的特异性和敏感性是100%（见2.,3.）。鉴于风疹感染对胎儿带来的严重后果，抗风疹IgM检测为阳性的怀孕患者，应当用另一种反映原理的酶联免疫吸附实验对IgM再次进行检测。此外，也应进行其她的确认检测，如IgA(免疫球蛋白A)抗体实验，免疫印迹或亲和力实验。（见2.）。多数状况下，妊娠期的初次感染不会导致胎儿子宫内感染。因此，为评价也许引起胎儿损伤的风险（5.），应当进行产前诊断（4.）。3.赛润ELISA classic - 检查原理用抗原包被微量板孔，制成固相载体。加患者血清到板孔中，其所含的抗体特异性地与固相载体中存在的抗原结合，形成免疫复合物。除去多余物质后，加入碱性磷酸酶标记的IgG、IgA和IgM抗体，使之与上述免疫复合物反映。洗板，除去多余的结合物，加入底物（对硝基苯磷酸盐）。其与酶结合的免疫复合物反映，产生有颜色产物，颜色强度与特异性抗体含量成正比。4.试剂盒的构成实验成分IgG试剂盒 IgM试剂盒数量 / 剂量微孔条（此微孔条可拆下单独使用，每条有8孔，共96孔，已经包被了抗原）1个微孔条框架包被的抗原为灭活抗原12 12原则血清（立即可用）人血清溶于含蛋白的磷酸盐缓冲液；抗HIV抗体、抗乙肝病毒（HBV）表面抗原和抗丙肝病毒（HCV）抗体均为阴性；防腐剂： 0.1%叠氮化钠染色剂：紫红色O 22毫升 22毫升阴性质控血清（立即可用）人血清溶于含蛋白的磷酸盐缓冲液；抗HIV抗体、抗乙肝病毒（HBV）表面抗原和抗丙肝病毒（HCV）抗体均为阴性；防腐剂： 0.1%叠氮化钠染色剂：里沙明绿 V12毫升 12毫升酶标记的抗人IgG, IgA, IgM （立即可用）羊抗人IgG, IgA, IgM（多克隆），标记碱性磷酸酶后在蛋白稳定剂中储存。防腐剂：0.01%甲基异噻唑啉酮0.01%溴化硝基二垩烷13毫升 13毫升浓缩洗液（可稀释至1000毫升）氯化钠溶液，含吐温20和30mM Tris 防腐剂： 0.1%叠氮化钠133.3毫升 133.3毫升稀释缓冲液磷酸盐缓冲液，内含蛋白和吐温20防腐剂： 0.1%叠氮化钠0.01克/升的溴酚蓝钠盐250毫升 250毫升终结液1.2N 氢氧化钠15毫升 15毫升底物（立即可用）对硝基苯磷酸盐，不含其他溶剂的缓冲液防腐剂： 0.1%的叠氮化钠(未开封瓶子中的底物也许会轻微变黄，但不会影响其质量)13毫升 13毫升带有原则曲线和评估表的质量控制文献（抗体以IU/毫升或U/毫升计量）1 15.检测所需物质，试剂盒未提供- 一般实验室所配的仪器装置- IgM检测：另需赛润含对照抗原的类风湿因子Rf吸附剂 (Rf吸附剂/对照抗原(产品编号T200/20ml)- 分光光度计，波长405纳米，建议参照波长范畴620纳米- 690纳米（例如 650纳米）- 37温箱- 湿盒- 蒸馏水。6.储存及稳定性试剂储存稳定性微孔条（包被抗原）开封后放在2-8装有干燥剂的密封铝箔袋中。4星期质控血清 / 原则血清开封后保存于2-8。有效期内；24个月酶标记抗体立即可用的溶液于2-8储存。避免污染（使用无菌枪尖）。有效期内；24个月稀释缓冲液 启动后于2-8储存。有絮状沉淀时丢掉未开封18个月有效期内；36个月洗涤液浓缩液开封后保存于2-8。工作液在2-8。工作液在室温下。盛过工作液的瓶子应按常规措施清洗，并丢弃混浊溶液。有效期内2星期1星期底物2-8储存，避光。避免污染（使用无菌枪尖）。当溶液变为黄色时应予以丢弃（水作空白，吸光度不小于0.25时）。有效期内24个月终结液开封后保存于室温。有效期内7.赛润 ELISA classic的检查环节7.1注意事项只有所有使用赛润 ELISA classic试剂才干保证检测效果，由于所有试剂都是有关联的，不能混用其她制造商的产品。特别是原则血清，对照血清以及酶标记物，必须使用试剂盒配备的，不要使用其他批号产品。稀释缓冲液，洗液，终结液和底物溶液可用于所有赛润 ELISA classic试剂盒。ELISA classic试剂盒内所有试剂均必须对的地寄存。应在未开封的状况下，保存于2-8，并在有效期（见标签阐明）内使用。具体的稳定性和储存资料在“6. 储存及稳定性”内将加以详述。每一种试剂都是通过校准以保证最佳的检测成果。这些试剂如果未经规定被稀释或改动都会导致检测的敏感性的减少。在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以避免蒸发和污染，避免试剂受到微生物污染，由于蛋白水解酶的干扰将导致浮现错误的成果。请从标记处剪开密封袋。如果铝袋破损或者已启动装有干燥剂的铝袋而未以夹子封紧的，则不要继续使用微孔条。开始实验前，将所有试剂置于室温。从试剂管中吸取试剂的时候，应注意使用无菌技术以防污染。为避免假阳性成果，吸加酶结合物时，吸嘴应保证不接触或喷洒于小孔的顶避，注意不要盖错瓶盖或管盖。实验成果的可反复性依赖于充足混匀试剂。使用前振荡装有对照血清的小管和所有稀释过的溶液（例如使用混合器）。小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注旨在吸取标本 / 对照血清，酶结合物或底物时，第一种孔与最后一种孔加样之间的时间间隔如果长，将会导致不同的 “预孵育”时间，从而明显地影响到测量值的精确性及反复性。只有严格遵守赛润ELISA classic试剂的实验阐明才会得到最佳的检测成果。如果实验中未严格遵守质量控制认证文献上的有效性特异准则，则实验成果无效。洗涤不充足将影响实验成果： 应当小心进行洗涤。洗涤环节应遵守有关洗涤器（平底孔，孔直径7毫米，深10.9毫米）指引手册进行，所有的孔内均应加入相似体积的洗涤缓冲液。洗涤结束时，应将微孔板倒扣于纸巾上并轻轻敲打，以保证所有孔内均无洗涤缓冲液。避免产生泡沫！如果使用自动洗板机，注意对的操作。7.2检查前的准备工作和储存避免使用高血脂、溶血或黄疸的标本，尽管在我们的检测中没有发既有副影响。明显被污染的标本（血清或血浆）不能用于检测。样品不应加热灭活。7.2.1样品准备赛润 ELISA classic风疹病毒 IgG开始实验前，患者的待测样品必须以稀释缓冲液稀释如下（V1+V2）：V1+V2=1+100 加 10微升 患者待测样品 于 1000微升 稀释缓冲液稀释后及加入微孔板前，样品必须充足混匀。赛润 ELISA classic风疹病毒 IgM 类风湿因子抗体是自身IgM型的抗体，可与IgG免疫复合物结合。非特异性风湿因子抗体的存在将导致IgM检测的假阳性成果。此外，也存在弱结合的病原体特异性IgM抗体被强结合的IgG抗体取代的也许性。在这种状况下，IgM的检测将得到假阴性的成果。因此，在进行IgM检测前应用类风湿因子吸附剂对血清作预解决。特别类风湿因子Rf吸附剂（产品编号T200,20ml）不仅涉及抗人IgG抗体，还具有一定量的对照抗原，对照抗原同步能与类风湿因子及可辨认宿主细胞膜成分的抗体结合。因此，不必再进行微量孔包被对照抗原的平行实验。在进行如下SERION ELISA classic IgM检测时，此类RF吸附剂需作为附加试剂另行购买:巨细胞，单纯疱疹病毒，麻疹，腮腺炎，风疹病毒，刚地弓形虫，带状疱疹病毒一方面应当使用稀释缓冲液(V2)对类风湿因子吸附剂(Rf-吸附剂/对照抗原)(V1)进行如下稀释：V1+V2=1+4 加 200微升 Rf-吸附剂/对照抗原 于 800微升 稀释缓冲液中然后将患者的待测样品(V1)在此Rf-稀释缓冲液(V3)中进行稀释：V1+V3=1+100 加 10微升 患者待测样品 于 1000微升 Rf-稀释缓冲液中 7.2.2样品储存密封的患者样品可在冰箱中2-8保存7天。 -20可保存更久。避免样品反复冻融。已稀释的样品可在2-8 保存一星期。7.3 试剂和反映试剂的准备工作7.3.1 微孔条微孔条置于一框架内，并与干燥剂一同封于铝袋之中。应将不需要的微孔条取下并重新放入铝袋。将袋口折叠2-3次，并以夹子夹紧，保证铝袋的密封性。7.3.2 对照血清 / 原则血清对照和原则血清立即可用，不必进一步稀释。实验时，可直接使用。对于每次实验和每批检测体系，无论使用的微量板数目的多少，均应涉及阴性阳性对照孔。临界值血清应作双份测定。如果是定量实验，原则血清也应作双份。不要用RF吸附剂解决对照血清！7.3.3 抗人 IgG, IgA 或IgM抗体稀释液，用 AP标记（即用）严禁将不同试剂盒的酶标抗体混合。同一试剂盒才干具最佳检测效果。7.3.4 洗液以1：30稀释浓缩洗涤缓冲液（V1）至终体积V2。例如：浓缩缓冲（V1）终体积（V2）33.3毫升1000毫升1.0毫升30毫升7.3.5 样品的稀释缓冲液（即用）7.3.6 底物（即用）实验时戴手套以避免污染。必须以无菌枪尖吸取底物溶液。7.3.7 终结液（即用）7.4 检测程序概要定量的风疹病毒IgG / IgM进行IgM检测时先用类风湿因子吸附剂预解决血清，请参见7.2.1；室温孵育15分钟或4过夜样品稀释液（病人血清）1+100将稀释的样本，和立即可用的对照血清 / 原则血清，加到微量孔内（100微升）孵育60分钟 / 37湿盒中洗涤加入立即可用的酶标记抗体溶液（100微升）再孵育30分钟 / 37湿盒中洗涤加入底物溶液（100微升）再孵育30分钟 / 37湿盒中加入终结液（100微升） 在405 纳米处读数7.5检测过程 7.5.1 将检测所需数目的微孔条放到微孔板框上并准备好一张草签。7.5.2 在微量孔内分别加入100微升的已稀释样本或立即可用的对照血清。留一种孔为底物空白使用，例如：定量的IgG / IgM微量孔孔A1孔B1孔C1孔D1孔E1底物空白阴性对照原则血清原则血清标本 17.5.3 将样品于湿盒内37（-1）孵育60分钟（5分钟）。7.5.4 孵育后以洗液缓冲液洗涤板孔（使用自动洗板机或手工洗板）：- 吸去或甩去洗液- 每孔内加入300微升洗液- 吸去或甩去洗液- 反复洗涤过程3次（共4次！）- 将微孔板翻转过来在纸巾上拍打，使微孔中不再具有液体7.5.5 加入酶标记抗体。于合适孔内（底物空白除外）加入100微升 IgG / IgM / IgA酶标记抗体7.5.6 湿盒内37（1）孵育30分钟（ 1分钟）* 注意：在特殊的工作环境下有必要对孵育时间进行调节。7.5.7 孵育后，以洗液清洗板孔（洗涤见上）7.5.8 加入底物于每孔内加入100微升底物溶液（涉及底物空白孔）7.5.9 湿盒内37（1）孵育30分钟（1分钟）。7.5.10 终结反映每孔内加入100微升终结液，轻微振荡微孔板以混合溶液。7.5.11 读取消光度以底物空白为空白对照液， 60分钟内读取405纳米的OD值，建议参照波长范畴为620纳米-690纳米（例如650纳米）。8. 检测成果评估赛润 ELISA classic风疹病毒 IgG/IgM（定量）8.1 4PL单点定量法通过运用非线性方程，可以保证根据消光信号的定量数值精确计算出抗体活性，该方程可在不对OD值作任何改动的状况下调节S型曲线。赛润 ELISA classic抗体浓度的拟定是通过逻辑对数模型（4PL, 4参数）计算得出的，此模型可精确合用于有关曲线。它是基于如下公式：参数A,B,C,D分别代表曲线的精确形状：1. 下端渐近线 参数A 2. 曲线斜率 参数B 3. 转折点 参数C 4. 上端渐近线 参数D 原则曲线是由德国维润赛润研发有限公司（维尔茨堡市）在严格条件下通过多次实验制定的。使用者无需耗费大量的时间和使用昂贵的仪器来制作原则曲线。每一种试剂盒内均附有专用的原则曲线和评估表用来计算抗体浓度。如有需要也可获得有关的评估软件。为了校正正常实验偏差和建立实验对照，每轮实验均需使用原则血清作为对照。该对照血清的有效范畴参照值是由厂商的质量控制部门拟定的，在此范畴内可保证抗体浓度测定的对的性。原则血清不一定是阳性对照，且在某些ELISA实验中原则血清数值也许是临界值或阴性成果。8.2有效性原则- 底物空白的OD值必须 0.25- 阴性对照值必须为阴性（请参见试剂盒内所附定量表）- 赛润 ELISA classic实验：原则血清的平均OD值必须在有效范畴内，此范畴在试剂盒的特异性质量控制认证书上给定（减去底物空白之后！）- 赛润 ELISA classic实验：阳性对照的平均OD值必须在有效范畴内，此范畴在试剂盒的特异性质量控制认证书上给定（减去底物空白之后！）如果未达到以上原则，实验无效且必须重做。8.3赛润 ELISA classic风疹病毒IgG / IgM的定量计算IgG抗体活性以IU/ml计算，以世界卫生组织风疹病毒参照血清为原则。该血清浓度为1000IU/ml。IgM抗体活性以U/ml计算，以风疹病毒IgM参照血清（莱比锡, 德国）为原则。该血清浓度为30 U/ml。8.3.1非自动评估每个试剂盒内均备有一种原则曲线和一种评估表，因而每一种OD值就可得到一种抗体活性值。原则血清的参照值和有效范畴会在求值表格（质量控制认证）中给定。所有的OD值在评估前必须先减去空白A1。措施1：定性评估为拟定临界值范畴，请将已测得原则血清的OD平均值与质量控制证书上给出的数据相乘（见专用公式），例如： OD=0.502MW (STD) 临界值上限 OD=0.352MW (STD) 临界值下限如果得到的原则血清的平均消光度值是0.64, 那么临界值的范畴即为 0.225-0.321。 措施2：用评估表格来拟定抗体活性。1. 计算原则血清两个OD值的平均值，并检查其与否在给定的有效范畴内。2. 然后，将所得成果转入“原则血清OD范畴”栏，在此进行求值。3. 已测得的患者样品值通过读取“IU / ml或U / ml”来求得相应的抗体活性。例如： 原则血清OD范畴0.57-0.610.62-0.65IU / ml 或 U / ml其他 0.060.070.07-0.120.13-0.22 20 IU / ml 临界值成果： 10-20 IU / ml 阴性成果： 3.5 U / ml 临界值成果： 2.5-3.5 U / ml 阴性成果： 2.5 U / ml 针对临界值成果的样品，应在1-2 周后对相应的病人再取样，重新检测。8.3.2 通过SERION easy base 4PL软件 / SERION自动评估软件进行自动评估。输入四个参数和原则血清参照值之后，联机软件就会计算出抗体活性。如果原则血清的消光值超过有效范畴，SERION easy base 4PL软件就会显示如下信息： “原则已超过容许范畴”和 / 或“原则差别不小于20%”。SERION 评估软件只用英语显示：Standard values out of ranges in following groups: Group 1-24. Standard value differ more than 20% in following groups: Group 1-24.” (“如下组样品原则值超过范畴：组1-24。如下组样品原则值差别不小于20%：组1-24。”) 在这种状况下，此轮实验无效，需重做。只有更换批号时，参数和参数值才需要变化（评估表中标有参数与参照值）。组别特异性数据的对的输入与否可以以原则血清的 IU / ml 或 U / ml 值为基本进行检查。计算出的平均单位值需与组别特异性认证书所示的单位值相相应。可自动校正测定值。使用原则版本打印机会显示如下内容：样本编号OD值IU / ml或 U / ml成果解释8.4检测成果分析我们采用血清学研究措施来判断风疹免疫状况及诊断风疹病毒及有关病毒的感染。风疹病毒 IgG抗体浮现于初次感染后，并于1-2个月后消失。鉴于所采用实验的敏感性，某些状况下 IgM抗体在感染一年后仍也许检测到。由于再次感染后IgM的浮现，使得对于阳性成果的进一步研究成为必须。并且，患者血清的配对实验也是非常重要的。感染后， IgG抗体的产生晚于IgM。抗体水平会达到一种最大值，然后再次跌落，保持在可检测的水平。血清检测的成果分析只能与完整的临床诊断图谱共同使用。当检测成果可疑时，应采用进一步的诊断手段。感染有EB病毒或细小 病毒 B19将引起多克隆免疫应答，从而导致风疹病毒IgM实验的假阳性。当也许感染这两种病毒时，有必要对患者2-3周后再次采血进行进一步的检测。9.性能特性：9.1反复性测定内反复性通过在同一轮实验中检测20次不同反映的血清来判断。测定间反复性通过度别在5天进行10次独立的血清检测分析来判断。 赛润 ELISA classic风疹病毒IgG：平均消光值 (OD)检测内分析(CV%)平均消光值 (OD)检测间分析(CV%)样品弱阳性阳性强阳性0.7041.3521.8538.36.63.50.6071.2911.68811.610.48.9赛润 ELISA classic风疹病毒IgM：平均消光值 (OD)检测内分析(CV%)平均消光值 (OD)检测间分析(CV%)样品弱阳性阳性强阳性0.9871.4561.7495.45.36.70.2821.1062.6226.86.48.09.2敏感性和特异性赛润 ELISA classic风疹病毒IgG：在外部操作评估研究中（6.），我们检测了427名患者的血清（免疫，加疫苗，非免疫，风疹感染及潜在交叉反映血清），并对不同价位的风疹IgG ELISA 产品相比较。成果表白，赛润 ELISA classic风疹病毒IgG的敏感性及特异性分别为99.11% 和98.92%。赛润 ELISA classic风疹病毒IgM：在外部(7.)和内部操作评估研究中，共检测了1021个血清样本。外部研究中，运用疫苗注射者与已证明初步感染风疹病毒患者来拟定测试的敏感性。四份取于初染患者疹期极早阶段的血清，赛润 ELISA classic风疹病毒IgM检查成果为阴性。这些血清中，2份在捕获测试中反映为阴性。另一方面，来自于感染后6-8周的一组血清中的3份，在赛润 ELISA classic风疹病毒IgG测试中，没有得到阳性成果。当来自感染后期的血清被计入后，检测的敏感性会受到限制。疫苗注射者中却发现了相反的成果，2份拟定为持续IgM滴的血清，在其她检测中却并未检测到IgM。当感染后6-8周的血清涉及在内时，实验的敏感性为93.7%，而此类血清不计时，敏感性上升为97.4%。外部操作评估研究表白检测的特异性为97.5%。此外，还检测了一组131个潜在交叉反映的血清，此组血清是新近感染非洲淋巴瘤病毒，梅毒密螺旋体，巨细胞病毒，单纯疱疹病毒，腮腺炎病毒或柯萨奇病毒的患者捐赠的。对此组进行赛润 ELISA classic风疹病毒IgG测定，7份血清反映为假阳性，4份血清反映成果不拟定。当以记名式参照检测进行平行实验时，得到11个阳性成果和6个不拟定成果。拟定实验敏感性的内部研究涉及55份记名式IgM捕获实验阳性的血清。对此组血清施以赛润 ELISA classic风疹病毒IgG，只有5份血清显示弱阳性，且此5份中有3份在另一种IgM捕获实验时体现为阴性。免疫印迹分析显示，这3份血清有一条明显的E2带，表白曾发生过免疫反映。一份源自初感染的血清，其赛润 ELISA classic风疹病毒IgG测试成果也许为假阴性，导致检测敏感性为98.04%。在内部操作评估研究中，检测了一组源自怀孕妇女和具有潜在交叉反映性的血清，其特异性为97.96%。成果： 赛润 ELISA classic IgG检测IgM检测敏感性99.11%98.04%特异性98.92%97.96%10. 风疹病毒IgG 抗体的亲和力评估：风疹病毒IgM抗体检测的阳性成果一般阐明是风疹病毒现行感染，而在继发感染后也会产生风疹病毒IgM抗体，长期持续存在的IgM抗体有时也可以被检测到，或许还存在多克隆刺激作用，在评估风疹IgM阳性样本时必须充足考虑这些状况（详见8.4 实验成果阐明）。风疹病毒IgG抗体亲和力的评估对于鉴别初次的现行感染、继发感染或继往感染具有很重要的意义。需要进行亲和力评估是由于在免疫反映过程中抗体的亲和力会随时间的推移明显增强（即亲和力成熟过程），在初次感染时IgG抗体的亲和力较低，而再次与病原体接触导致二次感染时产生的抗体具有很强的亲和力。 实验程序 在抗风疹病毒IgG抗体的亲和力评估实验中需要使用赛润风疹病毒IgG亲和试剂 （B129AVID，一种包装足够一种微板实验使用）。德国维润赛润研发有限公司生产的亲和试剂具有粘度低、无腐蚀性和无毒*等特点，特别合用于自动控制实验。将稀释的样品分两份加入到赛润ELISA classic风疹病毒IgG显微实验板上， 两份样品实验的差别在于：一种是孵化后加缓冲液冲洗，另一份则加入亲和试剂，然后再进行常规的冲洗操作，最后计算两个微孔OD 值的比例。根据这个比例便可以判断风疹病毒IgG抗体的亲和力。实验的有效性原则和对实验成果的阐明均已附在赛润风疹病毒IgG亲和试剂的使用阐明书中，对于亲和试剂的选择，可按规定使用评估工具来拟定。*) 亲和试剂的专利申请。11.警告11.1警告和安全措施赛润 ELISA classic试剂盒是针对熟悉实验室操作人员所设计使用的。所有试剂盒试剂及人类标本必须采用已有的良好实验技术，小心解决：- 此试剂盒内含人血成分。尽管所有的对照及定点对照都已通过验证并且发现对于乙型肝炎表面抗原，丙型肝炎抗体，HIV体均为阴性；但仍觉得它们具有潜在的感染性。- 移液过程严禁用口。- 在解决试剂和标本的地方严禁吸烟，饮食。- 使用试剂盒和标本时，必须戴一次性手套，穿实验服，戴安镜。使用后请彻底洗手清洁。- 患者样本及其她潜在感染材料实验后应予以消毒。 - 试剂应保存在安全的地方，严禁小朋友接触。- 终结液：具有腐蚀性（C）；发生酸烧伤（R34）；因此在操作时应穿戴防护镜，手套和实验服。11.2废料解决请注意有关规定！12.参照文献1.) Zuckermann, A.J., Banatvala, J.E., Pattison, J.R.临床病毒学原理与实践，第三版，11章，第363-400 页，1995年，John Weley & Sons2.)Porstmann, T., Pustowoit, B.风疹病毒诊断学，1993， Nr.17: 1-12Blackwell 科学出版社公司，柏林3.)Burkhardt, F., Enders G.风疹病毒微生物诊断学，1992，382-386Thieme出版社4.)Haller, O.A., Mertens, T.病毒感染的诊断和治疗病毒学学术准线，1999Urban & Fischer 出版社5.)Meitsch, K., Enders, G., Wolinsky, J.S., Faber, R., Pustoweit, B.风疹免疫印迹与风疹-肽-酶免疫测定在产前与新生儿阶段的先天风疹综合症诊断中的作用医学病毒学杂志1997年， 51： 280-283页6.)Liebert, U.G., Pustowoit, B.赛润 ELISA classic风疹病毒IgG（定量）的专业评估Leipzig 大学病毒研究所，写于12月21日7.)Liebert, U.G., Pustowoit, B.赛润 ELISA classic风疹病毒IgM（定量）的专业评估Leipzig 大学病毒研究所，写于3月8日赛润 ELISA classic标签注释：LOT 签号 / lotREF 订货号码 / reference or order numberxy 储存在xy之间的温度下 / store between x and y degree celsiusCE 按照欧共体原则98/79执行 / CE marking according to IVD guideline 98/79 ECCE0197 按照欧共体原则98/79附录II, B目录执行 / CE marking according to IVD guideline 98/79 EC according to annex II, list B 终结日期 / expiry dateMTP 微孔板 / microtiter plate(breakable strips)AG 抗原 / antigenCAG 对照抗原 / control antigenSTD 原则血清 / standard serumPOS 阳性对照 / positiv controlC / O 界定血清 / cut-off serumNEG 阴性对照 / negative controlAPC 酶标记的抗人 / alkaline phosphatase conjugate anti-human+ 低浓度的酶标记物 / conjugate with low concentration+ 中档浓度的酶标记物 / conjugate with medium concentration+ 高浓度的酶标记物 / conjugate with high concentrationRF 类风湿因子RF吸附剂 / rheumatoid factor absorbent(rf-absorbent)Rf/CAG 赛润对照抗原类风湿因子RF吸附剂 / rheumatoid factor absorbent(rf-absorbent) with control antigenDILB 血清稀释缓冲器 / dilution buffer for seraWASH 洗涤液 / washing solution concentratepNPP pNPP酶结合物 / pNPP substratSTOP 终结液 / stopping solution 有腐蚀性 / corrosiveCERT 原则曲线和评估表 / certificate(standard curve and evaluation table)INFO 用法阐明书 / instructionsRTU立即可用 / ready-to-useCONC 浓缩 / concentrateDIL 稀释或溶解 / dilute or disolve inAQUA 蒸馏水 / aqua detillataIVD 体外诊断使用 / in-vitro diagnostic use128 腺病毒 / Adeno, Virus132 烟曲霉 / Aspergillus fumigatus120 百日咳 / Bordetella pertussis1201 百日咳毒素 / Bordetella pertussis Toxin121 Burgdorferi 疏螺旋体 / Borrelia burgdorferi116 布鲁氏菌 / Brucella117 白色念珠菌 / Candida albicans137 衣原体 / Chlamydia1311 热柯克斯体 Q-Fever I / Coxiella brunetii (Q-fever) phase 11312 热柯克斯体 Q-Fever II / Coxiella brunetii (Q-fever) phase 2134 柯萨奇病毒 / Coxsackievirus109 巨细胞病毒 / Cytomegalovirus130 白喉 / Diphtheria1362 EB病毒 EBNA1 / Epstein-Barr, Virus/EBNA 11361 EB病毒 VCA / Epstein-Barr, Virus/VCA107 棘球属 / Echinococcus135 艾柯病毒 / Echovirus133 肠道病毒 / Enterovirus112 TBE病毒 / TBE Virus118 幽门螺旋杆菌 / Helicobacter pylori1051 单纯疱疹病毒1 / Herpes Simplex, Virus 11052 单纯疱疹病毒2 / Herpes Simplex, Virus 2105 单纯疱疹病毒1 / 2 / Herpes Simplex, Virus 1/21231 流感病毒 A / Influenza, virus A1232 流感病毒 B / Influenza, virus B106 嗜肺军团菌1-7 / Legionella Pneumophila 1-7125 钩端螺旋体 / Leptospira102 麻疹病毒 / Measles Virus103 腮腺炎病毒 / Mumps Virus127 肺炎支原体 / Mycoplasma pneumoniae1261 副流感病毒1 / Parainfluenza, virus 11262 副流感病毒2 / Parainfluenza,virus 21263 副流感病毒3 / Parainfluenza,virus 3126 副流感病毒1, 2, 3 / Parainfluenza,virus 1, 2, 3122 细小病毒 B19 / Parvovirus B19113 呼吸道合胞病毒 / Resp. Syncitial Virus129 风疹病毒 / Rubella virus108 破伤风 / Tetanus110 弓形虫 / Toxoplasma gondii104 带状疱疹病毒 / Varicella-Zoster Virus(VZV)138 耶尔森氏菌 / Yersinia