微生物SOP文件

精心整理一、简易SOP文件：1.1、标本接收筛选方案：1.1.1、痰标本：目测：黄色、灰色、血性、铁锈色，浑浊、 稠厚，呈现团块状的标本为合格标本； 而无色、白色、有黑色小点，清稀，呈现泡沫状，有明显食物渣滓、纸屑灰尘、泥土的为不合格标本。 显微镜下筛选：对经过目测筛选的标本须经过显微镜下再次筛选，凡脓细胞25/HP且复层鳞状上皮10/HP的标本为合格标本，可进入下一步程序；而脓细胞25/HP的标本为不合格标本，应拒收。1.1.2、尿标本：目测：采纳一次性无菌杯，杯盖严密者为初步合格； 显微镜下筛选：标本经过离心后镜检，凡有较多复层鳞状上皮的，脓细胞较少而细菌数量较多的、或有大量尿结晶析出的均为不合格标本，应拒收。1.1.3、大便标本：采纳一次性无菌杯，杯盖严密，无明显灰尘、泥土或纸屑者为合格标本。1.1.4、咽拭子标本：须采纳显微镜下筛选，凡无脓细胞的标本为不合格标本，应拒收；而脓细胞10/HP的为合格标本。疑心为风湿热、猩红热的病人除外。1.1.5、血液、骨髓、心包液：凡未接种于血造就瓶中的均为不合格标本，应拒收。1.1.6、各种穿刺液：全部标本均采纳无菌容器送检或未接种于血造就瓶中，否那么为不合格标本，应拒收。1.1.7、脑脊液、生殖道标本：采纳一次性无菌杯或干脆接种于血造就瓶中，由医护人员住院病人或病人家属门诊病人当面交送给专业微生物检验人员，经过询问是在30min内，保温保湿条件下运输的方为合格标本，否那么应拒收。1.1.8、其他标本：必需是采纳无菌容器运输的，且在相应规定时间内送检的才是合格标本。1.2、标本预处理：1.2.1、痰标本：按全国临床检验操作规程其次版相关章节，采纳先用20ml生理盐水洗涤两次，经过10ml生理盐水稀疏后，用接种钩钩取脓性局部，采纳压片法制作痰涂片，再在杯中参加胰蛋白酶消化1-2小时后接种。1.2.2、尿标本：WBC5/HP时，取4 ml离心后，弃去上清液，留下200l混匀后接种，剩余标本涂片枯燥后染色；不离心标本用于菌落计数，方法，取5ml生理盐水，参加50l尿液标本，混匀后取100l接种，结果1000为每毫升菌落数。1.2.3、大便标本：取绿豆大小的粪便标本参加生理盐水制成匀浆，用接种环取一环涂片，视察有无脓细胞，真菌孢子及菌丝，有真菌的须接种CHROMagar念珠菌造就基，脓细胞+以上的接种粪便选择性造就基，已经经历应用抗生素的采纳改良TTC增菌液或Na2S2O3肉汤增菌液先进展增菌。留下涂片枯燥后Gram染色，视察菌群状况，留意有无菌群失调。对于无脓细胞的标本无须进展接种。1.2.4、咽拭子标本：润湿后接种。剩余标本干脆涂片，枯燥后染色。1.2.5、脑脊液：由临床医生按无菌操作干脆注入血造就瓶1-3ml干脆送检。1.2.6、生殖道标本：须将造就基孵温后接种。剩余标本干脆涂片作Gram染色。1.2.7、其他标本：除血液、骨髓、心包液等全部标本必需在接种完后用剩余标本作干脆涂片，枯燥后作Gram染色。1.3、读片：依据人体对细菌/真菌感染在早期主要以非特异性免疫的细胞免疫为主的特点，结合标原来源部位系统器官生理病理特点，收寻2030个视野中脓细胞聚集处的脓细胞胞浆中有无吞噬的细菌及细菌的染色排列特征，菌体特征如粗细、长短、扭曲并作记录。其中痰液标本的读片尤为重要：阐述痰液形成过程和排出过程，我们可以得知，在下呼吸道中感染中形成的炎性渗出、包袱物中存在与感染干脆相关的病原菌，在自然排痰的过程中会被上呼吸道的正常菌群所污染，但污染菌位于炎性包袱物之外，且人体对正常菌群具有共生性爱护因而不会产生吞噬现象，借此理论，我们将选择痰标本中脓细胞成团块状分布，集中而不稠密，且四周无鳞状上皮细胞或无大量成团状分布的细菌球的区域为读片区，谨慎收寻脓细胞聚集处的脓细胞胞浆中有无吞噬的细菌及细菌的染色排列特征，菌体特征如粗细、长短、扭曲并作记录，将此作为确定病原菌的理论依据。粪便标本：在视察吞噬现象的同时，作好菌群比例计算，并记录菌群比例分析参照相关文件。1.4、 标本接种：1.4.1、痰液：一般：BA、Choc参加万古霉素的养分强化嗜血杆菌造就基、MecK、CHROMagar；疑心为军团菌的加种BCYE-造就基，疑心为百日咳的加种Boudet-Gengou造就基，疑心为肺炎支原体感染的加种Hayflick双相造就基或采纳免疫学及分子生物学方法检测，肺炎衣原体须用免疫学或分子生物学方法。1.4.2、尿液：一般：BA、MecK；疑心为真菌感染的加CHROMagar，疑心为淋病的加巧克力造就基，疑心为软下疳的加种Choc；疑心支原体感染的接种支原体选择性造就基如PPLO、A7B分别鉴定造就基或商品造就基1.4.3、大便标本：一般感染性腹泻的粪便标本干脆接种或增菌后接种：SS、SMC、TCBS；疑心为金黄色葡萄球菌性食物中毒或伪膜肠炎的加HSM高盐甘露醇造就基，疑心为真菌性肠炎的加CHROMagar，疑心为伪膜性肠炎的应作厌氧菌造就分别困难梭菌。1.4.4、耳、鼻、眼、咽拭子标本：BA、Choc、CHROMagar；疑心为白喉的加亚碲酸钾血琼脂或卵黄造就基1.4.5、脓液、及脓性穿刺物：一般：BA、MecK；来源于面部、扁桃体四周、颌下、腋下等处淋巴结脓肿的脓液加种Choc，疑心为真菌的加CHROMagar；来源于生殖系统的脓液须加种巧克力造就基。疑心厌氧菌感染时应作厌氧菌造就接种BAP强化血琼脂、KVLB卡拉-万古冻溶血琼脂、BBE胆七拟杆菌琼脂、PEA苯乙醇血琼脂等。1.4.6、血、骨髓标本：由医护人员床旁接种，需氧+厌氧或L-型血造就瓶，疑心播散型结核分枝杆菌感染的加种分枝杆菌血造就基。经过增菌后转种BA、Choc、MecK、厌氧菌BAP等固体造就基。1.4.7、胸腹水、鞘膜液：无菌操作注入血造就瓶内增菌后BA、Choc、MecK、厌氧菌BAP等固体造就基。1.4.8、脑脊液： 由临床医生按无菌操作干脆注入血造就瓶1-3ml干脆送检。1.4.9、手术创面、烧伤创面分泌物：接种BA、MecK；疑心为真菌感染的加CHROMagar。1.4.10、各种生殖道标本：种BA、Choc、MecK、CHROMagar。1.4.11、组织标本：暂未开展！先粉碎后接种BA、Choc、MecK、CHROMagar，有必要时作厌氧菌造就。1.4.12、皮屑、甲屑、毛发：种CHROMagar、沙氏斜面造就基、必要时种察氏造就基。1.5、读板：1.5.1、痰液：经过1824h隔夜造就，但孪生球菌、养分缺陷链球菌以及分枝杆菌那么需延长造就时间1.5.1.1、BA生长、Choc不生长、MecK不生长：Gram染色：分G+co革兰阳性球菌 ,G+ b革兰阳性杆菌G+co依靠溶血特征，菌落形态、菌落颜色、菌体形态区分:葡萄球菌：淡黄色/白色，中等大小，较凸，规那么圆形，/溶血，较潮湿，微球菌：黄色/白色/橙色，中等大小，较凸，规那么圆形，不溶血，较枯燥，不易乳化较葡萄球菌生长缓慢，该菌一般无临床意义；链球菌：白色/灰白色、凸起小菌落，溶血为溶血型链球菌，其中化脓性链球菌、无乳链球菌、停乳链球菌菌落相对较大多在1.0mm左右，而咽峡炎链球菌，马链球菌等菌落那么较小多在0.5mm左右；灰白隆起中心扁平或凹陷，大小的宽大溶血为肺炎链球菌，该菌是最常见的肺部感染病原菌，在社区获得性感染中有重要的地位；细如针尖，白色凸起溶血的为草绿色链球菌，自然咯痰标本中的草绿色链球菌一般不具有临床意义；孪生球菌：白色小菌落，/溶血，菌落黏着不易刮取，但在盐水中易乳化，较潮湿，在质量较好的别致血琼脂或哥伦比亚血琼脂上易生长，在含血MHA上不生长。从正常咳取的痰液中分别到一般不具有临床意义，但在套管爱护下采集的下呼吸道标本中分别出来具有临床价值。气球菌：白色凸起小菌落，溶血，1.0mm左右，有特别气味酷似乙醛，菌落较草链大。镜下为短链或葡萄球菌样排列，菌体大而着色不均。从痰液中分别到不具有临床意义。肠球菌：灰白，低凸，2.0mm左右之溶血菌落，较潮湿，口腔球菌：白色凸起较大菌落，不溶血，黏着，接种针挑之那么整个菌落挑起，琼脂上不留痕迹。该菌有时可引起肺部的紧要感染，一般好发生于COPD病人和肺气肿病人；G+ b依靠溶血特征，菌落形态、菌落大小、菌体形态区分：棒状杆菌：白色左右大小，较枯燥，不溶血/狭窄溶血的为白喉或一般棒状杆菌；小而潮湿，灰白/无色，半透亮的为J-K棒状杆菌；灰白细小，溶血的可能为假结核、化脓放线菌、溶血分泌杆菌；除白喉杆菌外，假结核、化脓放线菌、溶血分泌杆菌是罕见的咽喉部病源菌，棒状杆菌一般不导致肺部感染；芽孢杆菌：灰白大菌落，外表粗糙如毛玻璃状、蜡状、边缘不规那么，不同种类菌落形态差异巨大，宽大溶血。延长造就时间，菌落从潮湿变得枯燥，边缘呈放射状扩散，形成叶状、掌状、雪花状、齿轮状等，时时为痰造就的污染菌；1.5.1.2、BA生长、Choc生长、MecK不生长：Gram染色：分G+co及G+bG+co：平面球菌、藻球菌：血琼脂上为溶血，大小，在Choc上呈现金属色泽，无临床意义。 G+b：乳杆菌：细小，白色凸起溶血菌落，有特别的酸臭味，口腔正常菌群，无临床意义；G-菌：依据形态分为G- b革兰阴性杆菌 、G-co革兰阴性球菌 、以及依据对特别养分的需求对苛养性G- b进一步分类，常见的如嗜血杆菌，军团菌等：1.5.1.3、BA生长、Choc生长、MecK生长：Gram染色：G- b氧化酶、分科琼脂颜色肠杆菌：氧化酶-，MecK上红色、淡红色或无色潮湿大菌落；弧菌：氧化酶+，MecK上红色或无色扁平大菌落；非发酵菌：氧化酶+/-，MecK上无色或淡红色透亮小菌落1.5.1.4、BA生长、Choc生长、MecK不生长：Gram染色：分G-b及G-coG-b：苛养性G-b：HACEK族：嗜沫/副嗜沫嗜血杆菌、艾肯氏菌、碳酸噬胞菌、放线杆菌、金氏菌；心杆菌：人类心杆菌；鞘氨醇单胞菌：少动鞘氨醇单胞菌；莫拉菌：缺陷莫拉菌、非液化莫拉菌、奥斯陆莫拉菌；寡源菌：全部种；黄杆菌及相关种：包括鞘氨醇杆菌、产吲哚金色杆菌、黏液威克菌、动物伤口伯杰氏菌、短稳杆菌等；甲基杆菌：嗜中温甲基杆菌；巴斯德菌：除产气和溶血巴斯德菌外的全部种；鲍特氏菌：百日咳/副百日咳鲍特氏菌；弗朗西丝菌：全部种。G-co：氧化酶+、触酶+奈瑟菌：白色/黄色中等大小菌落，该类细菌为口腔常见正常菌群，该菌在痰造就中含量的凹凸反响了标本采集状态的合格程度，大量出现提示造就结果将是不行信的； 卡他莫拉菌：白色小菌落24h内，菌落有脆性，用接种环推之可移，是儿科和老年病人常见的下呼吸道病原菌；1.5.1.5、BA不生长/细小、Choc生长、MecK不生长：Gram染色：G-b、菌体细小或呈扭曲之长丝状嗜血杆菌：灰色/无色，半透亮，的多为流感嗜血杆菌17，该菌为最常见的肺部感染病原菌，可发生于各个年龄层次，其高携带与COPD发病有较强的相关性；灰色略黄，不透亮，的多为副流感嗜血杆菌。一般副流感嗜血杆菌不导致肺部感染，大量出现提示造就结果将是不行信的；1.5.1.6、BA不生长、Choc不生长、MecK不生长、BCYE-生长/或在含有L-半胱氨酸、铁离子、复合抗生素选择剂的强化血琼脂上生长Gram染色：G-b、菌体细、长丝状提示可能为军团菌：该菌在BCYE-上4872 h为中等大小扁平菌落，灰白色，较粘着；该菌具有较强的生物危急性，其中嗜肺军团菌可传染；1.5.1.7、真菌及奴卡菌：BA、Choc、MecK、CHROMagar均生长Gram染色形态、生长速度真菌：酵母样真菌，菌落中等大小，生长快，多数可在CHROMagar上显色；大多为口腔咽喉正常菌群，一般不导致肺部感染，但免疫缺陷、糖皮质激素、长期大剂量的抗生素运用可增加该类微生物时机感染的可能性；烟曲霉菌，丝状真菌菌落，35造就2448h时菌落为白色泛绿，72h后菌落快速转为褐色，中心粉末状反面为黄褐色如烟熏状，该菌为肺部最常见的条件致病菌，感染时患者病症重，预后特别差；奴卡菌：小菌落，生长慢，菌落皱褶，呈颗粒状，有时产生褐色、黄色、黑色等色素，该类细菌可导致肺脓肿，标本脓性，有硫磺颗粒者应高度疑心该菌；肺炎支原体：固体造就基上，低倍镜或解剖显微镜下为典型“荷包蛋”样菌落，在Hayflick双相造就基的液体中使造就基变黄，该类微生物是最常见的非典型性肺炎的病原体，在社区获得性感染中有着很高的比例。1.5.2、大便：沙门菌：SS:中心黑色之乳糖阴性菌落亚利桑拉群可以为阳性,SMC: 红色菌落志贺菌：SS、SMC均为无色透亮之乳糖阴性菌落O-157大肠埃希菌：SS：为红色乳糖阳性菌落，SMC为无色透亮之山梨醇阴性菌落 其他致病性大肠埃希菌多数为：SS、SMC均为红色 其中A-D大肠埃希菌在SS上可能为无色菌落霍乱弧菌：SS：无色菌落，TCBS：黄色大菌落 其他弧菌：SS、TCBS均为无色或淡绿色菌落小肠结肠耶尔森菌：SS为无色小菌落，SMC为红色牛眼状小菌落气单胞菌：全部气单胞菌转种血琼脂均呈现溶血嗜水气单胞菌，SS红色菌落，TCBS为黄色，SMC无色之大菌落 其他气单胞菌：SS无色菌落，TCBS为黄色，SMC无色之大菌落邻单胞菌：SS、TCBS及SMC均为无色菌落1.5.3、尿液: 肠杆菌、非发酵菌、弧菌，葡萄球菌、肠球菌、参照痰液读碟方法；J-K棒状杆菌：小而潮湿，灰白/无色，半透亮，生长慢；真菌：中等大小，生长快，多数可在CHROMagar上显色支原体：固体造就基上，低倍镜或解剖显微镜下为典型“荷包蛋”样菌落 解脲支原体：含尿素和酚红的支原体液体造就基中使造就基变红； 人型支原体: 含精氨酸和酚红的支原体液体造就基中使造就基变红；各种生殖道标本：肠杆菌、非发酵菌，葡萄球菌、肠球菌、无乳链球菌参照痰液读碟方法；真菌：中等大小，生长快，多数可在CHROMagar上显色；支原体：固体造就基上，低倍镜或解剖显微镜下为典型“荷包蛋”样菌落 解脲支原体：含尿素和酚红的支原体液体造就基中使造就基变红；人型支原体: 含精氨酸和酚红的支原体液体造就基中使造就基变红；淋病奈瑟菌：在GC造就基上为灰/灰白半透亮小菌落，特别潮湿；在强化血琼脂上为灰白凸起，不溶血，有银色光泽1.0-2.0大小的菌落；阴道加德纳尔菌：GC造就基上不生长，强化血琼脂上无色/灰白，细小，狭窄溶血的菌落，生长缓慢，多数需48h才能形成明显小菌落。1.5.4、脑脊液：肠杆菌、非发酵菌、弧菌，葡萄球菌、肠球菌、链球菌、G+b、卡他莫拉菌、嗜血杆菌、奴卡菌等参照痰液读碟方法；真菌：中等大小，生长快，多数可在CHROMagar上显色；新型隐球菌：BA上为白色，1.0mm左右大小圆形凸起菌落，不溶血，CHROMagar上不显色。肺炎支原体：固体造就基上，低倍镜或解剖显微镜下为典型“荷包蛋”样菌落，在Hayflick双相造就基的液体中使造就基变黄。mm左右大小的露滴状菌落，Choc养分强化，含奈瑟菌选择剂上为灰色有银色光泽的，半透亮，凸起，1.5mm左右大小的潮湿菌落；血、骨髓标本：先经过增菌后转种，肠杆菌、非发酵菌、弧菌，葡萄球菌、肠球菌、链球菌、G+b、卡他莫拉菌、嗜血杆菌等参照痰液读碟方法；真菌：中等大小，生长快，多数可在CHROMagar上显色；同时应留意双相真菌和深部丝状真菌，如马尔尼菲青霉菌、荚膜组织胞浆菌、球孢子菌，烟曲霉菌、毛霉菌、镰刀菌、暗色孢科真菌新型隐球菌：BA上为白色，1.0mm左右大小圆形凸起菌落，不溶血，CHROMagar上不显色。肺炎支原体：固体造就基上，低倍镜或解剖显微镜下为典型“荷包蛋”样菌落，在Hayflick双相造就基的液体中使造就基变黄。mm左右大小的露滴状菌落，Choc养分强化，含奈瑟菌选择剂上为灰色有银色光泽的，半透亮，凸起，1.5mm左右大小的潮湿菌落红斑丹毒丝菌：可形成两种菌落，光滑型细小、圆形突起、有光泽、易乳化；粗糙型菌落大，外表颗粒状、边缘如卷发样，微溶血。1.5.5、其他标本：参照以上标本的读碟方法。1.6、鉴定在读碟的根底上进展 G+co： 触酶阳性、易乳化葡萄球菌：鸟氨酸、尿素、ONPG、硝还采纳酶法4-6h视察记录结果；试管法凝固酶，分别于1h、4h、24h视察一次；蕈糖、甘露醇、甘露糖、麦芽糖、蔗糖、木糖； 触酶阳性、不易乳化微球菌：葡OF、七叶苷、精氨酸、硝还、枸橼酸盐、动力、7.5%高盐肉汤； 溶血性链球菌触酶阴性6.5%高盐肉汤、CAMP试验、杆菌肽、胆七、蕈糖、乳糖、棉子糖、甘露醇、山梨醇、七叶苷、菊糖全部糖类均需参加血清； 肺炎链球菌Optochin假如R，需加6.5%高盐肉汤、胆七、乳糖、棉子糖、甘露醇、山梨醇、菊糖全部糖类均需参加血清，必要时作胆汁溶菌试验和乳胶凝集试验； D群链球菌及肠球菌触酶阴性6.5%高盐肉汤、胆七、精氨酸双水解、棉子糖、甘露醇、山梨醇、阿拉伯糖、蔗糖、动力； 口腔球菌触酶阴性/弱阳葡OF； 草绿色链球菌OptochinR6.5%高盐肉汤、胆七、棉子糖、甘露醇、山梨醇、乳糖、七叶苷、尿素；G+ b：触酶+棒状杆菌：硝还、尿素、七叶苷、明胶、动力、葡、麦、蔗、甘醇、木触酶+芽孢杆菌：动力、卵磷脂水解、甘露醇、木糖、青霉素酶触酶+李斯特菌：20动力、CAMP、甘露醇、木糖、鼠李糖、七叶苷触酶红斑丹毒丝菌：H2S、精氨酸水解、七叶苷、动力、蕈糖、阿拉伯糖 肠杆菌科：氧化酶、KIAGYZ15e、API 20E等鉴定系统；沙门菌、志贺菌、致病性大肠埃希菌需作血清学试验； 弧菌科：氧化酶+、KIA、GYZ9v、API 20E、或按操作规程上的经典双歧图表法鉴定； 非发酵菌：氧化酶、KIA、GYZ11n、15n、API 20N、或按操作规程上的经典双歧图表法鉴定； G-co:氧化酶+、触酶+、DNase、硝还、酶法葡、麦、蔗、甘醇、木糖； 嗜血杆菌：触酶、因子需求、酶法鸟氨酸、尿素、靛基质、ONPG、硝还、葡、蔗、乳、甘糖、木糖； 军团菌：氧化酶、触酶+、硝还、尿素、糖类、动力+/橡树岭军团菌血清学试验定种； 念珠菌：CHROMagar显色造就基不显色的玉米-土温80、TH-15c、API20c、YBC卡等鉴定系统； 其他罕见细菌按经典书籍供应的方法鉴定。1.7、抗菌药物敏感试验：按CLSI2008版方案有关规定执行，其中链球菌采纳5%BloodMHA，嗜血杆菌用HTM，淋病奈瑟菌用GC造就基不加选择剂，其他非苛养菌用MHA；所选用药物依据CLSI选药规那么结合我院工作实践开展了以下几种组合： 肠杆菌科/弧菌科：AM、(AMC) 、GM、CIP、SXT、TE、AN、CZ、CTX/CA、CTX、CRO、FOX、FEP、AZT、(CXM)、 (CAZ)、(IPM)、 FT尿路用； 非发酵菌含盖假单胞菌、不动杆菌、窄食单胞菌、伯克菌在内：PIP、GM、TM、AN、CIP、SXT假单胞菌不选、TE假单胞菌不选、CFP/SB(即SCF)、CTX、CAZ、IPM、AZT 、FEP、(PIP/TZ)、FOX假单胞菌不选、LVF窄食单胞菌、伯克菌选用； 葡萄球菌： OX、FOX、CM、VA、E、TE、OFL、SXT、(RA)、FT尿路用； 肠球菌：GM120、AM/P、VA、OFL/LEV、RA、TE、E、FT尿路用； 肺链：OX、CM、VA、E、TE、OFL、SXT、RA、C； -链/草链：P草链用、FEP、CRO、CM、VA、E、TE、OFL 淋病奈瑟菌：P、CIP、TE、SPT、CRO、CXM、AZI； 脑膜炎奈瑟菌：不作常规测试：P、CRO、MEM、TE/MIN，常规测试：CIP、SXT、C、RA； 嗜血杆菌：AM、CIP、SXT、TE、AMX/CA、CXM、CRO、AZI。抑菌环测量后，依据相应breakpoint标准说明，得出S、I、R定性结果；肺链除OX外，全部-内酰胺类抗生素均须采纳稀释法得出准确得MIC值，才能由此得出S、I、R结果，K-B法不行用。二、各科病原菌接种微量生化管及所帖K-B药敏纸片1、肠杆菌科：G Y Z15：硫化氢、苯丙氨酸、葡萄糖酸盐；靛基质、甲基红、枸橼酸；尿素、动力、产气；赖氨酸、鸟氨酸、棉子糖；山梨醇、侧金盏花醇、木糖；可视状况补种DNA酶，丙二酸盐2、弧菌科： G Y Z9：1%NaCl赖氨酸精氨酸鸟氨酸、甘露醇、水杨素、6%高盐、枸缘酸3、肠杆菌科/弧菌科药敏：氨苄西林AM、庆大霉素(GM)、复方新诺明(SXT)；四环素(TE)、环丙沙星(CIP)、阿米卡星(AN)、头孢唑啉(CZ)、头孢曲松(CRO)、头孢噻肟(CTX)、头孢他定(CAZ)、头孢西丁(FOX)、头孢吡肟(FEP)、氨曲南(AZM)、亚胺培南(IPM,)、头孢噻肟/克拉维酸(CTX/CA)、头孢他啶/克拉维酸(CAZ/CA)假设病原菌来自小便或肠道那么加贴呋喃妥因4、非发酵菌GYZ11:FO(厌、需)、氧化酶、枸缘酸、麦芽糖非、精氨酸双水解、甘露醇非、木糖非、硝酸盐复原试验、DNA酶、乙酰胺GYZ15:精氨酸、鸟氨酸、赖氨酸、枸缘酸、硝酸盐复原试验、尿素、七叶苷、靛基质、-半乳糖苷酶(ONPG)、蔗糖非、麦芽糖非、木糖非、硫化氢、葡萄糖非、氧化酶非发酵菌药敏：哌拉西林PIP、庆大霉素(GM)、妥布霉素(TM)、阿米卡星(AN)、环丙沙星(CIP)、氨曲南(ATM)，四环素(TE)、复方新诺明(SXT)、头孢西丁(FOX)、舒普深(SCF)、头孢噻肟(CTX)、头孢他定(CAZ)、左氧氟沙星(LVF,嗜麦芽和窄食假单胞菌贴)、头孢吡肟(FEP)、亚胺培南(IPM)4、革兰氏阴性双球菌：OE(+)、H2O2(+)、硝酸盐复原试验、DNA酶、葡萄糖非、木糖非、麦芽糖非、甘露醇非、蔗糖非5、革兰氏阴性双球菌主要用于淋球菌药敏：四环素TE、环丙沙星(CIP)、青霉素G(PG)，壮丽霉素(SPT)、阿奇霉素(AZI)、头孢曲松(CRO)、头孢呋辛(CXM)；可用阿奇霉素经历性治疗6、嗜血杆菌科：H2O2(+)、OE+、V、X因子需求试验卫星试验、酶法硝酸盐复原试验、鸟氨酸、尿素、靛基质、-半乳糖苷酶(ONPG)、葡萄糖非、乳糖非、木糖非、甘露糖非、蔗糖非全部氨基酸,糖类生化管均要封石蜡防CO2挥发，厌氧也能生嗜血杆菌科药敏：复方新诺明SXT、氨卞西林(AM)、环丙沙星(CIP)，头孢曲松(CRO)、头孢呋辛(CXM)，阿奇霉素(AZI)、四环素(TE)、阿莫西林/克拉维酸(AMC)7、葡萄球菌：硝酸盐复原试验、鸟氨酸、尿素、-半乳糖苷酶(ONPG)、覃糖、甘露醇、甘露糖、麦芽糖、蔗糖、木糖葡萄药敏：红霉素E、克林霉素(CM)、苯唑西林(OX)、头孢西丁(FOX)、青霉素G(PG)、四环素(TE)、万古霉素(VA)、左氧氟沙星(LVF)、复方新诺明(SXT)、利福平(RA)、米诺四环素(MIN)、氯霉素CL8、肠球菌：H2O2(-)、胆汁七叶苷、七叶苷、6.5%高盐、蔗糖、动力、甘露醇、山梨醇、精氨酸双水解、棉子糖、阿拉伯糖、山梨糖肠球菌药敏：呋喃妥因FT、庆大霉素120(GM120)、红霉素(E)、四环素(TE)、万古霉素(VA)、氨曲南(ATM)、左氧氟沙星(LVF)、利福平(RA)8、肺炎链球菌药敏：红霉素E；四环素(TE)、万古霉素(VA)、左氧氟沙星(LVF)、复方新诺明(SXT)、利福平(RA)、氯霉素(CL)、克林霉素(CM)、苯唑西林(OX)9、-溶血链球菌： H2O2(-)，6.5%高盐，CAMP试验，胆汁七叶苷，覃糖，乳糖，棉子糖，甘露醇，山梨醇，七叶苷，菊糖注：全部糖类均要参加血清10、草绿色链球菌： OP：R，6.5%高盐，胆汁七叶苷，棉子糖，甘露醇，山梨醇，乳糖，七叶苷，尿素，覃糖；注：全部糖类均要参加血清-链/草链药敏：红霉素E、四环素(TE)、克林霉素(CM)、左氧氟沙星(LVF)、万古霉素(VA)、头孢吡肟(FEP)、青霉素(P)、头孢曲松(CRO)三、各科简易双歧鉴定表3.1、常见G+杆菌简易鉴定表棒状杆菌属需氧芽孢杆菌李斯特菌属丹毒丝属加德纳菌属诺卡菌属马红球菌形态棒状，一端或两端膨大,常呈“八”，倒“八”，栅栏状排列杆状，有芽孢短杆，链状或丝状细杆或线状细小杆菌，生长缓慢，多48小时才形成菌落 分枝丝状，可断裂成杆状、球杆状；产不同色素；可形成气生菌丝，抗酸弱阳性；菌落的外表皱褶,颗粒状卵圆形或短杆状,产不同色素，抗酸局部阳性革兰染色+初代为G+，陈旧造就物伟G染色阴阳不定，初代为G+触酶+-+动力-V+(筋斗状)-ND-硫化氢-ND-大多产H2S-NDND3.2、常见革兰氏阳性球菌双歧鉴定表一常见革兰氏阳性球菌双歧鉴定表一触酶H2O2阳性(+) 菌属严格需氧形态动力OFOE葡萄糖菌属-葡萄状排列，菌体较小，易乳化-F-微球菌属+四联状排列，菌体较大，不易乳化-O-口腔球菌属-白色，触酶弱阳性，易乳化，黏，挑那么整个菌落全部离开，琼脂上不留痕迹-FND？动性球菌属+OND巨球菌属+/-菌体细胞较大，2m-+触酶H2O2阴性(-)菌属形态万古霉素葡萄糖PYRLAP6.5%高盐4510链球菌属链状，成对S-+-V-肠球菌属链状，成对S-+乳球菌属链状，成对S-+V-+气球菌属成对，四联，成簇S-+-+-孪生球菌链状，四联，成簇，成对S-+V-片球菌属成对，四联，成簇R-+V+-无色藻球菌属链状，成对R+-V-+链球菌分群一、依据Lancefild抗原分群A群化脓性链球菌大菌落、咽峡炎链球菌小菌落，杆菌肽大多敏感SB群无乳链球菌小菌落，CAMP+，马尿酸钠+C群停乳链球菌马亚种大菌落、咽峡炎链球菌小菌落CAMP(-),6.5%高盐-，杆菌肽：R耐药D群肠球球菌、非肠球菌牛链球菌，马链球菌，猪链球菌6.5%高盐+，胆七+；但D群非肠球为：6.5%高盐-，胆七+F群咽峡炎链球菌小菌落G群停乳链球菌大、咽峡炎链球菌小二、依据菌落大小大菌落类化脓链球菌、停乳链球菌小菌落类咽峡炎链球菌、无乳链球菌三、依据溶血性质溶血草绿色链球菌、肠球菌及D群非肠球菌、肺炎链球菌溶血A群、B群、D群溶血草绿色链球菌、肠球菌及D群非肠球菌、肺炎链球菌四、按病理作用化脓链球菌群化脓链球菌、无乳链球菌、马链球菌、猪链球菌、停乳链球菌草绿色链球菌群牛链球、缓症链球菌、变异链球菌、唾液链球菌、咽峡炎链球菌米勒群、不相关链球菌草绿色链球菌鉴定双歧鉴定表七叶苷VP甘露醇脲酶精氨酸山梨醇代表菌种牛链球菌+/-牛链球，马肠链球菌，非解乳糖链球菌缓症链球-缓症链球菌，格式链球菌，口腔正常链球菌，血液链球菌变异链球菌+-+变异链球菌，鼠变异链球菌唾液链球菌+-+/-唾液链球菌，前庭链球菌咽峡炎链球菌+/-+/-+-咽峡炎链球菌，星群链球菌，中间链球菌血液链球菌+-+-生物1.2.3型非溶血链球菌分群OP奥普托新胆汁溶菌胆汁七叶苷肺炎链球菌+-草绿色链球菌-牛链球菌-+备注：精氨酸：-猪链球菌-+备注：精氨酸：+，能分解葡萄糖等多种糖溶血链球菌分群Lancefield杆菌肽CAMP覃糖七叶苷高盐备注化脓链球菌(大菌落)AS-+-无乳链球菌小菌落BR+-马链球菌小菌落CR-精水(+)G群停乳链球菌大菌落GR-ND-星座链球菌小菌落R-精水(+)3.3、革兰氏阳性球菌双歧鉴定表二触酶H2O2阳性(+)菌属严格需氧形态动力OFOE葡萄糖菌属-葡萄状排列，菌体较小，易乳化-F-微球菌属+四联状排列，菌体较大，不易乳化-O-口腔球菌属-白色，触酶弱阳性，易乳化，黏，挑那么整个菌落全部离开，琼脂上不留痕迹-FND？动性球菌属+OND巨球菌属+/-菌体细胞较大，2m-+触酶H2O2阴性(-)链球菌属溶血奥普妥新S肺炎链球菌奥普妥新R胆汁七叶苷阴性-：草绿色链球菌胆汁七叶苷阳性+：D群链球菌及D群非肠球，猪链球菌溶血杆菌肽SA群链球菌CAMP+B群链球菌胆汁七叶苷阳性+D群链球菌Lancefield群血清抗原检测溶血胆汁七叶苷阴性-：草绿色链球菌胆汁七叶苷阳性+：D群链球菌注释:草链进一步分群见上，D群及猪链球菌进一步分群如下：七叶苷+，6.5%高盐阳性+肠球菌七叶苷+，6.5%高盐阳性-猪链球菌OP：R, 精氨酸：+，能分解葡萄糖，乳糖，蔗糖，麦芽糖，菊糖等多种糖七叶苷+，6.5%高盐阳性-D群非肠球棉子糖阳性+，精氨酸阴性-，能利用蔗糖，棉子糖，阿拉伯糖；山梨醇及菊糖：不定牛链球菌棉子糖阴性-，精氨酸阴性-：能利用蔗糖，不能利用棉子糖马肠链球菌3.4、常见8种葡萄球菌生化反响鉴别表：葡萄球菌双歧鉴定图： +：金葡、中间葡萄、猪葡萄血浆凝固酶： 一：施氏、里昂、溶血、表葡、腐生、猪葡 新生霉素 S R：金葡：利用大多数糖，可产色素凝固酶+： S S：中间 ：利用蔗糖 及ONPG阳性 多粘菌素B S R：猪葡 不利用甘露醇和麦芽糖，不产色素 蔗糖-：施氏：甘露糖为阳性 里昂 +：里昂 鸟氨酸+： 覃糖 表葡 -：表葡 凝固酶-：鸟氨酸： 多粘S:施氏 溶葡 -：猪葡 或施氏 表葡 麦芽糖 多粘R：猪葡 鸟氨酸-： 腐生 尿素 +、-：表葡 猪葡 +：溶表腐 -、+：溶葡 施氏 覃糖 +、+：腐生 生化试验菌名凝固酶试管法硝酸盐复原试验鸟氨酸尿素ONPG覃糖甘露醇甘露糖麦芽糖蔗糖木糖金黄色葡萄球菌+-d-+-表皮葡葡萄球菌-+d+-d+-溶血葡萄球菌-+-+d-+-里昂葡萄球菌-+d-+-+-施氏葡萄球菌-+-d+-+-腐生葡萄球菌-+-+d-+-中间葡萄球菌+-+d+d+-猪葡萄球菌+/-+-d-+-+-+-3.5、肠球菌双歧鉴定表肠球菌属初步分群试验群群群群群甘露醇产酸+-+山梨糖产酸+-精氨酸双水解-+-试验群鸟肠球菌浅黄肠球菌病臭肠球菌苍白肠球菌假鸟肠球菌棉子糖肠球菌解糖肠球菌阿拉伯糖+-+-棉子糖-+-+丙酮酸盐+-+-试验群粪肠球菌屎肠球菌铅黄肠球菌鹑鸡肠球菌蒙氏肠球菌动力-+-色素-+-+山梨醇+vv-V棉子糖-v+阿拉伯糖-+试验群豕肠球菌耐久肠球菌小肠肠球菌殊异肠球菌鼠肠球菌阿拉伯糖-棉子糖-+-蔗糖-+-试验群阿拉伯糖棉子糖动力鸽肠球菌+-河流漫游球菌-+试验群驴肠球菌盲肠肠球菌硫磺色肠球菌山梨醇-+-色素-+3.6、常见肠球菌简易双歧鉴定图精氨酸双水解-：鸟肠球菌精氨酸双水解+山梨醇-屎肠球菌甘露醇+、阿拉伯糖+、棉子糖-山梨醇+棉子糖-、阿拉伯糖-：粪肠球菌棉子糖+、阿拉伯糖+：鸟肠球菌3.7、肠杆菌科与其他科菌的区分试验肠杆菌科弧菌科非发酵科葡萄糖FF0/-氧化酶-+*形态杆状弧形杆状鞭毛周毛或无单毛单、丛、周、无注：非发酵中不动、嗜麦芽寡养单胞菌OE为-二、肠杆菌科初步分类：菌属苯丙氨酸葡萄糖酸盐变形杆菌+-普罗威登斯菌属+-摩根菌属+-克雷伯菌属-+肠杆菌属-*有例外+*有例外沙雷菌属-+哈夫尼亚菌属-+埃希菌属-志贺菌属-沙门菌属-枸橼酸杆菌属-爱德华菌属-耶尔森菌属-肠杆菌科中：尿素+：耶尔森、变形、枸橼酸 枸缘酸(+) ：肠杆菌、枸橼酸、沙雷、克雷伯 硫化氢+：变形、枸橼酸*、爱德华*、沙门甲型例外 赖：+：嗜水 邻单胞菌属： 甘露醇 +、一、一：气单胞菌 赖一：豚鼠 OE:+,现已归为肠杆菌属 鸟氨酸精氨酸 一、+、+、一：邻单胞菌：类志贺邻单胞弧 嗜盐性气单胞菌属： 、：弧菌菌 弧 蓝色：霍乱弧菌 菌 紫色：副溶血弧菌科 平 无色：溶澡弧菌 板 弧菌属：大便造就筛选致病菌1、筛选志贺、沙门菌：金黄色葡萄球菌平板，SS,MAC平板 无色透亮或产硫化氢黑色菌落，接种多支KIA，用志贺沙门血清做凝集试验。 A/A，产气 不须要进一步鉴定 KIA K/K 非发酵菌，不须要进一步鉴定老年人或幼儿需报告，可不鉴定 K/A,或A/A 按肠杆菌科鉴定，符合志贺沙门，那么药敏，血清学凝集，报告志贺沙门菌2、筛选大肠埃希菌：SS,MAC平板 只有红色菌落，接种多支KIA，赖氨酸及山梨醇 + + ：非致病性大肠，不需进一步鉴定 赖氨酸： - +：EIEC 肠侵袭性 -，不鉴定；+：做药敏，报EIEC山梨醇： + -: EHEC 肠出血性 -，不鉴定；+：做药敏，报EHEC3.8、常见G-双球菌双歧鉴定表试验 菌种 血琼脂22普通琼脂35葡萄糖利用试验麦芽糖利用试验乳糖利用试验蔗糖利用试验果糖利用试验硝酸复原试验DNA酶氧化酶触酶试验脑膜炎奈瑟菌-+-+淋病奈瑟菌-+-+解乳糖奈瑟菌v+-+枯燥奈瑟菌v+-+-+微黄奈瑟菌vv+-vv-+黏液奈瑟菌+-+-+浅黄奈瑟菌+-+灰色奈瑟菌v+-+卡他莫拉菌+-+注释：1、奈瑟菌为呼吸道正常菌群，临床意义不大2.假设疑心为脑膜炎、淋病奈瑟菌，那么做生化反响时加点养分物质如：小牛血清或肉汤或正常人血浆代替3.卡他莫拉菌,不利用任何糖，为呼吸道感染，造就要求不高，平凡平板即可生长，涂片枯燥及不易乳化，推之及移3.9、肠杆菌双歧鉴定表一、苯丙氨酸+H2S+，迁徙生长变形杆菌鸟氨酸+、靛基质-、木糖+：奇变鸟氨酸-、靛基质+、木糖+：普变鸟氨酸-、靛基质-、木糖+：潘尼鸟氨酸-、靛基质-、木糖-：产黏变形H2S-，无迁徙生长摩根普罗威登鸟氨酸+、枸橼酸-：摩根菌属鸟氨酸-、枸橼酸+：普罗威登尿素-，侧金盏花醇+：产碱尿素+，侧金盏花醇+：雷极尿素，侧金盏花醇-：斯氏苯丙氨酸-苯丙氨酸-、37动力-克雷伯、不活泼大肠、志贺氏、耶尔森25，有动力葡盐+克雷伯A/A产气靛基质-、赖氨酸+、尿酶+，MR-：肺炎克雷伯靛基质+、赖氨酸+、尿酶+，MR-：产酸克雷伯靛基质-、赖氨酸、尿酶-，MR+：肺克亚种鸟氨酸+：解鸟氨酸克雷伯鸟氨酸-尿素+，赖氨酸+，丙二酸盐+：植生克雷伯尿素-，赖氨酸+，丙二酸盐+：土生克雷伯尿素-，赖氨酸d，丙二酸盐-：臭鼻克雷伯尿素-，赖氨酸-，丙二酸盐+：鼻硬结克雷伯葡盐-不活泼大肠：缓慢或不发酵乳糖，不产气，靛基质及赖氨酸山梨醇多阳性，尿素阴性志贺氏：血清学凝合，鸟氨酸阳性的为宋氏及看标原来源，菌落形态等耶尔森：尿素-：鼠疫耶尔森；尿素+：中间C+、鸟氨酸+，鼠李糖+、小肠C-、鸟氨酸+、鼠李糖-、假结核枸橼酸-、鸟氨酸-，鼠李糖+苯丙氨酸-、37动力+靛基质+，枸橼酸-大肠埃希菌：乳糖+，H2S-爱德华菌属缓慢爱德华：乳糖-，H2S+靛基质-，枸橼酸-且葡盐+：哈夫尼亚：蜂房哈夫尼亚靛基质-，枸橼酸且葡盐-，尿素-，赖氨酸除甲型伤寒外+，K/A，产气/不产气：沙门，用多价血清凝合靛基质，枸橼酸+枸橼酸杆菌A/A,产气，赖氨酸-鸟氨酸+，H2S-、侧金盏花醇+：异型枸橼酸杆菌鸟氨酸-，H2S+、侧金盏花醇-：氟劳地枸橼酸杆菌鸟氨酸+，H2S-、侧金盏花醇-：丙二酸盐枸橼酸杆菌靛基质-，枸橼酸+沙雷菌属：K/A，产气或不产气，葡盐阳性、DNA酶阳性棉子糖-，木糖-：黏质沙雷菌棉子糖+、木糖+：液化沙雷菌肠杆菌属：A/A，产气，葡盐阳性赖氨酸-、鸟氨酸-，山梨醇：聚团肠杆菌赖氨酸+、鸟氨酸+，山梨醇+：产气肠杆菌赖氨酸+、鸟氨酸+，山梨醇-：格高菲肠杆菌赖氨酸-、鸟氨酸+，山梨醇+：阴沟肠杆菌赖氨酸-、鸟氨酸+，山梨醇-：坂琦肠杆菌3.10、肠杆菌科双歧鉴定表二、苯丙氨酸-、葡萄糖酸盐+：克雷伯菌、肠杆菌属、沙雷菌属、哈夫尼亚菌属动力-、山梨醇+、DNA酶-、棉子糖+；A/A，产气：克雷伯菌属靛基质-、赖氨酸+、尿酶+，MR-：肺炎克雷伯靛基质+、赖氨酸+、尿酶+，MR-：产酸克雷伯靛基质-、赖氨酸、尿酶-，MR+：肺克亚种鸟氨酸+：解鸟氨酸克雷伯鸟氨酸-尿素+，赖氨酸+，丙二酸盐+：植生克雷伯尿素-，赖氨酸+，丙二酸盐+：土生克雷伯尿素-，赖氨酸d，丙二酸盐-：臭鼻克雷伯尿素-，赖氨酸-，丙二酸盐+：鼻硬结克雷伯动力+、山梨醇、DNA酶-、棉子糖+；A/A，产气：肠杆菌属赖氨酸-、鸟氨酸-，山梨醇：聚团肠杆菌赖氨酸+、鸟氨酸+，山梨醇+：产气肠杆菌赖氨酸+、鸟氨酸+，山梨醇-：格高菲肠杆菌赖氨酸-、鸟氨酸+，山梨醇+：阴沟肠杆菌赖氨酸-、鸟氨酸+，山梨醇-：坂琦肠杆菌动力+、山梨醇+、DNA酶+、棉子糖；K/A，产气或不产气：沙雷菌属棉子糖-，木糖-：黏质沙雷菌棉子糖+、木糖+：液化沙雷菌动力+、山梨醇-、DNA酶-、棉子糖-；哈夫尼亚菌属：枸橼酸-蜂房哈夫尼亚菌苯丙氨酸+、葡萄糖酸盐-：变形杆菌、摩根菌属、普罗威登菌属H2S+，迁徙生长变形杆菌鸟氨酸+、靛基质-、木糖+：奇变鸟氨酸-、靛基质+、木糖+：普变鸟氨酸-、靛基质-、木糖+：潘尼鸟氨酸-、靛基质-、木糖-：产黏变形H2S-，无迁徙生长摩根普罗威登鸟氨酸+、枸橼酸-：摩根菌属鸟氨酸-、枸橼酸+：普罗威登尿素-，侧金盏花醇+：产碱尿素+，侧金盏花醇+：雷极尿素，侧金盏花醇-：斯氏苯丙氨酸-、葡萄糖酸盐-：埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、枸橼酸杆菌属、爱德华菌属、耶尔森菌属动力+、靛基质+、枸橼酸盐-、H2S-：埃希菌属乳糖阳性大肠埃希菌动力+、靛基质+、枸橼酸盐-、H2S+：爱德华菌属乳糖阴性缓慢爱德华动力+、靛基质-、枸橼酸盐、H2S：且赖氨酸阳性甲型副伤寒