临床生物化学：第七章 临床专用生化分析仪分析技术

第七章第七章 临床专用生化分析仪临床专用生化分析仪分析技术分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术教学目标与要求教学目标与要求v掌握：掌握：浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪分析技术浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪分析技术的基本原理和方法。的基本原理和方法。v熟悉：熟悉：浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的结构组浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的结构组成特点，仪器的维护保养，质量控制和临床应用。成特点，仪器的维护保养，质量控制和临床应用。v了解：了解：浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的分类。浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的分类。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术小结与展望小结与展望电泳自动化分析技术电泳自动化分析技术血气自动化分析技术血气自动化分析技术电解质自动化分析技术电解质自动化分析技术浊度自动化分析技术浊度自动化分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术基本原理和方法基本原理和方法 分类和基本结构分类和基本结构 维护和保养维护和保养临床应用临床应用质量控制质量控制第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y浊度分析浊度分析通过检测溶液浊度通过检测溶液浊度,对物质含量进行分析的方法。临床上多用于对物质含量进行分析的方法。临床上多用于特定蛋白的分析特定蛋白的分析，其基本原理是，其基本原理是液相中的免疫沉淀反应液相中的免疫沉淀反应。y特定蛋白特定蛋白在机体内具有某种生理功能，疾病状态时又有着在机体内具有某种生理功能，疾病状态时又有着特定的病理生特定的病理生理意义理意义的蛋白质，临床上常被称为特定蛋白（的蛋白质，临床上常被称为特定蛋白（special protein）或特种蛋白或特种蛋白。临临床常规监测的特定蛋白项目参见第床常规监测的特定蛋白项目参见第101101页，表页，表7-17-1。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.胶体溶液胶体溶液胶胶体溶液是由粒径不同的溶质均匀地分散或悬浮于溶剂体溶液是由粒径不同的溶质均匀地分散或悬浮于溶剂中构成悬浮液。中构成悬浮液。粒子对光具有粒子对光具有反射、折射、散射和吸收反射、折射、散射和吸收等作用。等作用。y2.2.光透射理论光透射理论朗伯朗伯-比尔（比尔（Lambert-Beer）定律）定律：y3.3.光散射理论光散射理论雷莱（雷莱（Rayleigh）公式：）公式：KLCA 222240sr)cos1(N8II第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.胶体溶液胶体溶液胶胶体溶液是由粒径不同的溶质均匀地分散或悬浮于溶剂体溶液是由粒径不同的溶质均匀地分散或悬浮于溶剂中构成悬浮液。中构成悬浮液。粒子对光具有粒子对光具有反射、折射、散射和吸收反射、折射、散射和吸收等作用。等作用。y2.2.光透射理论光透射理论朗伯朗伯-比尔（比尔（Lambert-Beer）定律）定律：y3.3.光散射理论光散射理论雷莱（雷莱（Rayleigh）公式：）公式：KLCA 222240sr)cos1(N8II第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术该公式来自气溶胶悬浮微粒，用于溶液时需进行校正。该公式来自气溶胶悬浮微粒，用于溶液时需进行校正。当使用高强度光源（如激光）时，液相悬浮颗粒与非当使用高强度光源（如激光）时，液相悬浮颗粒与非偏振光源的散射作用公式为：偏振光源的散射作用公式为：公式可见，散射光强度与颗粒的公式可见，散射光强度与颗粒的浓度浓度和和分子量分子量有关。有关。242220srN)cos1(CM)dCdn(4II第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y雷莱公式与修正公式雷莱公式与修正公式雷莱公式雷莱公式v仅适合直径仅适合直径110入射光波长的小颗粒入射光波长的小颗粒Debye修正公式修正公式v适合于颗粒直径适合于颗粒直径略小于略小于入射光波长的溶液入射光波长的溶液Mie修正公式修正公式v适合于颗粒直径适合于颗粒直径等于或大于等于或大于入射光波长的溶液入射光波长的溶液第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y4.4.免疫浊度分析免疫浊度分析在一定条件下，在一定条件下，可溶性抗原与抗体在液相中特异结可溶性抗原与抗体在液相中特异结合，合，形成有一定大小的形成有一定大小的抗原抗原-抗体免疫复合物颗粒抗体免疫复合物颗粒，使反应液出现浊度；使反应液出现浊度；当光线通过介质中的复合物颗粒时，可形成光的吸当光线通过介质中的复合物颗粒时，可形成光的吸收、透射、散射和折射；通过测量透射光或散射光收、透射、散射和折射；通过测量透射光或散射光信号强弱，从而推算出被测物的量。信号强弱，从而推算出被测物的量。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y浊度分析方法的分类浊度分析方法的分类根据检测器的位置及其接收光信号的性质分：根据检测器的位置及其接收光信号的性质分：v透射免疫浊度法（透射免疫浊度法（turbidimetry immunoassay）v散射免疫浊度法（散射免疫浊度法（nephelometry immunoassay）根据复合物形成速度和测定方式分：根据复合物形成速度和测定方式分：v终点浊度法终点浊度法v速率浊度法速率浊度法根据根据浊度形成的原理浊度形成的原理分分：v化化学浊度法学浊度法v免疫免疫浊度法浊度法第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.透射免疫浊度法透射免疫浊度法指在光源的指在光源的光路光路0o角角方向上测量方向上测量透射光强度透射光强度，并，并研究其与被检测溶液微粒浓度关系的方法。研究其与被检测溶液微粒浓度关系的方法。y2.2.散射免疫浊度法散射免疫浊度法指在指在光路的光路的5o90o角角的方向上测量的方向上测量散射光强度散射光强度，并研究其与被测溶液中微粒浓度关系的方法。并研究其与被测溶液中微粒浓度关系的方法。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.终点散射浊度法终点散射浊度法检测反应终点与起始点之间信号变化的方法为终点检测反应终点与起始点之间信号变化的方法为终点测定法。测定法。y2.2.速率散射浊度法速率散射浊度法所谓速率即指在抗原抗体结合反应过程中，所谓速率即指在抗原抗体结合反应过程中，单位时单位时间内两者结合成复合物的量间内两者结合成复合物的量。速率散射浊度法是在抗原与抗体反应的最高峰测定速率散射浊度法是在抗原与抗体反应的最高峰测定其复合物形成的量，该峰值的高低与抗原的量成正其复合物形成的量，该峰值的高低与抗原的量成正比。比。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y粒子强化免疫粒子强化免疫透射比透射比浊法浊法为一种为一种带载体的免疫浊度法带载体的免疫浊度法，其敏感度较高。该，其敏感度较高。该方法选择一种方法选择一种大小适中、均匀一致的胶乳颗粒，大小适中、均匀一致的胶乳颗粒，吸附或交联抗体吸附或交联抗体；当遇到相应抗原时，则发生聚；当遇到相应抗原时，则发生聚集。集。单个胶乳颗粒在入射光波长之内，光线可透过。单个胶乳颗粒在入射光波长之内，光线可透过。当两个或更多胶乳颗粒凝聚时，透过光减少，光当两个或更多胶乳颗粒凝聚时，透过光减少，光减少的程度与胶乳凝集量成正比。减少的程度与胶乳凝集量成正比。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.分光光度仪分光光度仪采用终点法作免疫浊度分析的测定仪。采用终点法作免疫浊度分析的测定仪。y2.2.自动生化分析仪自动生化分析仪目前较流行的大型多通道自动生化分析仪多目前较流行的大型多通道自动生化分析仪多专门编有或可自编透射浊度分析程序。专门编有或可自编透射浊度分析程序。y3.3.散射浊度分析仪散射浊度分析仪（特种蛋白分析仪）（特种蛋白分析仪）应用较为普遍的有应用较为普遍的有固定时间散射分析仪固定时间散射分析仪、速、速率散射分析仪和双光路自动免疫浊度分析仪。率散射分析仪和双光路自动免疫浊度分析仪。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y主要由分析系统、计算机系统组成。主要由分析系统、计算机系统组成。分析系统分析系统v用于加样、稀释、保温和测用于加样、稀释、保温和测试等；试等；v包括包括散射测浊仪散射测浊仪、加液系统、加液系统、试剂转盘、样品转盘、卡片试剂转盘、样品转盘、卡片阅读器以及软盘驱动器等；阅读器以及软盘驱动器等；计算机系统计算机系统v用于输入病人数据、选择程用于输入病人数据、选择程序菜单、计算参考曲线和储序菜单、计算参考曲线和储存测试结果；存测试结果；v包括计算机主机、包括计算机主机、CRT显示显示屏和键盘等。屏和键盘等。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.日保养日保养关机前冲洗管道，以防止管道阻塞。关机前冲洗管道，以防止管道阻塞。开机前应检查注射器，防止漏液。开机前应检查注射器，防止漏液。检查稀释液、缓冲液及抗体试剂中液体的体积。检查稀释液、缓冲液及抗体试剂中液体的体积。检查废液桶中的废液是否已经装满。检查废液桶中的废液是否已经装满。在做标本之前必须对所有光路进行光路校正。在做标本之前必须对所有光路进行光路校正。y2.周保养周保养更换流动比色杯和小磁棒。更换流动比色杯和小磁棒。用纱布蘸用纱布蘸 10%漂白溶液清洁探针的外部。漂白溶液清洁探针的外部。检查蠕动泵和钳制阀控制着管路中液体的流动情况。检查蠕动泵和钳制阀控制着管路中液体的流动情况。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y3.月保养月保养更换注射器插杆顶端；更换注射器插杆顶端；空气过滤网冲洗；空气过滤网冲洗；疏通标本和抗体探针的内部。疏通标本和抗体探针的内部。y4.半年保养半年保养更换钳制阀上管道和泵周管道；更换钳制阀上管道和泵周管道；给机械传动部分的螺丝上润滑油。给机械传动部分的螺丝上润滑油。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y免疫浊度分析的基本要求免疫浊度分析的基本要求：始终保持反应体系中始终保持反应体系中抗体适量过剩抗体适量过剩。y抗原过剩的检测方法：抗原过剩的检测方法：连续监测抗原抗体反应曲线，当抗原过剩时，连续监测抗原抗体反应曲线，当抗原过剩时，反应曲线呈现异常反应曲线呈现异常。反应体系中反应体系中追加抗体追加抗体，如果，如果浊度继续增大浊度继续增大则提则提示抗原过剩。示抗原过剩。待测标本用两种稀释度测定，待测标本用两种稀释度测定，浓度高的样本浊浓度高的样本浊度反而降低则提示抗原过剩度反而降低则提示抗原过剩。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y伪浊度伪浊度：在反应体系中，除待测在反应体系中，除待测抗原抗体免疫复合物产生抗原抗体免疫复合物产生的浊度外的浊度外，其它可引起，其它可引起透射光或散射光发生变化透射光或散射光发生变化的浊度的浊度都称为都称为伪浊度伪浊度。y减少产生伪浊度的方法：减少产生伪浊度的方法：1.标本：采用新鲜、合格标本。标本：采用新鲜、合格标本。2.检测体系：保持比色杯和稀释杯清洁。检测体系：保持比色杯和稀释杯清洁。3.试剂：使用合格的抗体试剂。试剂：使用合格的抗体试剂。4.增浊剂浓度：严格控制增浊剂的浓度。增浊剂浓度：严格控制增浊剂的浓度。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y无论是散射比浊还是透射比浊，入射光波长的选择无论是散射比浊还是透射比浊，入射光波长的选择原则原则：除了抗原抗体免疫复合物外，反应体系中的其除了抗原抗体免疫复合物外，反应体系中的其他成分对入射光的干扰应为最小，因为如果反他成分对入射光的干扰应为最小，因为如果反应体系中其他成分应体系中其他成分吸收了部分入射光吸收了部分入射光，透射比透射比浊法测定结果浊法测定结果将使抗原浓度偏高，而将使抗原浓度偏高，而散射比浊散射比浊法测定法测定将使抗原浓度偏低。将使抗原浓度偏低。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.胶体溶液胶体溶液胶胶体溶液是由粒径不同的溶质均匀地分散或悬浮于溶剂体溶液是由粒径不同的溶质均匀地分散或悬浮于溶剂中构成悬浮液。中构成悬浮液。粒子对光具有粒子对光具有反射、折射、散射和吸收反射、折射、散射和吸收等作用。等作用。y2.2.光透射理论光透射理论朗伯朗伯-比尔（比尔（Lambert-Beer）定律）定律：y3.3.光散射理论光散射理论雷莱（雷莱（Rayleigh）公式：）公式：KLCA 222240sr)cos1(N8II第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.选择合适的校准品选择合适的校准品y2.2.校准曲线的绘制校准曲线的绘制校准曲线的形状取决于校准曲线的形状取决于抗血清和促聚剂的浓度的抗血清和促聚剂的浓度的选择选择，也与所用免疫浊度法类型、校正方法及校，也与所用免疫浊度法类型、校正方法及校准品的质量有关。准品的质量有关。多推荐多推荐5 5点或点或6 6点定标点定标。选择适当的数学方法进行选择适当的数学方法进行曲线拟合曲线拟合。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术电解质电解质是是指在溶液中能解离指在溶液中能解离带电离子带电离子而具有而具有导电性能的物质。在体液中最常测定导电性能的物质。在体液中最常测定NaNa+、K K+CL CL-、CaCa+等等近年来，近年来，基于离子选择电极的电解质分析仪基于离子选择电极的电解质分析仪迅速发展，由于其方法简单、快速，在临床迅速发展，由于其方法简单、快速，在临床得到广泛应用。得到广泛应用。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术基本原理和方法基本原理和方法 分类和基本结构分类和基本结构 维护和保养维护和保养临床应用临床应用质量控制质量控制第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y离子选择性电极离子选择性电极（ion selective electrode，ISE）是一类用是一类用特殊敏感膜特殊敏感膜制成，对溶液中某种特定制成，对溶液中某种特定离子具有离子具有选择性响应的电化学传感器选择性响应的电化学传感器。在临床实验室，常用于测量在临床实验室，常用于测量离子的活度或浓度离子的活度或浓度。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y通常由通常由电极管、内电极、电极内充溶液电极管、内电极、电极内充溶液和和电极膜电极膜（敏感膜）（敏感膜）四个部分组成。四个部分组成。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y大多数大多数电极膜电位电极膜电位的产生是基于膜材料与溶液界面发生的的产生是基于膜材料与溶液界面发生的离离子交换反应子交换反应。当电极置于溶液中时，由于离子交换和扩散作用，改变当电极置于溶液中时，由于离子交换和扩散作用，改变了二相中原有的电荷分布，因而形成双电层，其间产生了二相中原有的电荷分布，因而形成双电层，其间产生一定的一定的电位差即膜电位电位差即膜电位。ISE的电位与溶液中特定的电位与溶液中特定离子活度的对数呈线性关系离子活度的对数呈线性关系。Nernst方程式方程式：阴离子时为，阳离子时为：阴离子时为，阳离子时为 iISElgnF2.303RTKE第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术yISE的的EISE值不能直接测定值不能直接测定必须将必须将ISE与参比电极共同浸入待测样品中组与参比电极共同浸入待测样品中组成一个成一个原电池原电池，通过测量通过测量E电池电池来测定来测定E EISEISE值值。y电池的电动势电池的电动势在一定条件下，在一定条件下，原电池的电动势原电池的电动势与与被测离子被测离子活度的对数呈线性关系活度的对数呈线性关系。ilgnF2.303RTKE电池第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.定量方法定量方法（1 1）标准比较法（或直读法）标准比较法（或直读法）v指在指在pH计或离子计上直接读出数值的方法，适计或离子计上直接读出数值的方法，适用于用于少量样本少量样本的分析。的分析。（2 2）标准曲线法）标准曲线法v适用于适用于大批量的试样大批量的试样分析。分析。（3 3）标准加入法）标准加入法v当待测当待测溶液组分较复杂，很难控制相同的离子强溶液组分较复杂，很难控制相同的离子强度时度时，选用标准加入法。，选用标准加入法。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.2.样本测定方式样本测定方式直接法直接法v指样本不经稀释直接由电极测量离子活度；指样本不经稀释直接由电极测量离子活度；v优点是可采用全血测定，它迅速方便，结果准确，不会因血清中优点是可采用全血测定，它迅速方便，结果准确，不会因血清中水体积所占比例改变而影响结果。水体积所占比例改变而影响结果。间接法间接法v指样本经一定离子强度缓冲溶液稀释后由电极测量离子活度。指样本经一定离子强度缓冲溶液稀释后由电极测量离子活度。v与直接法相比，间接法样品用量少；由于样品预先进行稀释，不与直接法相比，间接法样品用量少；由于样品预先进行稀释，不易堵塞管道；降低了血脂、不溶性蛋白质对电极的污染，以及对易堵塞管道；降低了血脂、不溶性蛋白质对电极的污染，以及对电极的损耗，使寿命延长。电极的损耗，使寿命延长。直接法比间接法测定结果高直接法比间接法测定结果高35，因为血脂及蛋白质等不，因为血脂及蛋白质等不包含有包含有K、Na。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.按自动化程度分类按自动化程度分类分为半自动和全自动电解质分析仪。分为半自动和全自动电解质分析仪。y2.2.按工作方式分类按工作方式分类分为湿式和干式电解质分析仪。分为湿式和干式电解质分析仪。y3.3.按仪器的功能分类按仪器的功能分类可分为电解质分析仪、含电解质分析的血气分析可分为电解质分析仪、含电解质分析的血气分析仪、含电解质分析的自动生化分析仪等。仪、含电解质分析的自动生化分析仪等。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y湿式电解质分析仪湿式电解质分析仪一般由离子选择性电极组、液路系统、电路系统、程一般由离子选择性电极组、液路系统、电路系统、程序控制模块和显示操作系统等组成序控制模块和显示操作系统等组成第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.离子选择性电极组离子选择性电极组电极组包括电极组包括指示电极和参比电极指示电极和参比电极。ISE的构成的构成v通常采用流动式毛细管结构，即在毛细管的侧臂通常采用流动式毛细管结构，即在毛细管的侧臂开多个小孔，孔里插入各种离子选择性电极。开多个小孔，孔里插入各种离子选择性电极。v在真空泵的负压作用下，待测样被吸入毛细管中，在真空泵的负压作用下，待测样被吸入毛细管中，与各个插入电极接触，并将溶液浓度的变化转换与各个插入电极接触，并将溶液浓度的变化转换成电极电位的变化。成电极电位的变化。v一次进样可完成多个参数的测量。一次进样可完成多个参数的测量。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y钠、钾、氯电极钠、钾、氯电极钠电极是一种含钠电极是一种含铅硅酸钠的玻璃膜电极铅硅酸钠的玻璃膜电极；钾电极为由钾电极为由缬氨霉素和聚氯乙烯（缬氨霉素和聚氯乙烯（PVC）等组成的膜电极；等组成的膜电极；氯电极由一个氯电极由一个银氯化银银氯化银电极组成。电极组成。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术 2.2.液路系统液路系统通常由标本盘、溶液通常由标本盘、溶液瓶、驱动电机、采样瓶、驱动电机、采样针、电极系统、蠕动针、电极系统、蠕动泵、三通阀、管道等泵、三通阀、管道等组成。组成。主要用于将检测样品、主要用于将检测样品、定标液和缓冲稀释液定标液和缓冲稀释液等按工作要求吸取和等按工作要求吸取和输送至电极管道中，输送至电极管道中，并完成冲洗电极管道、并完成冲洗电极管道、排除废液的工作。排除废液的工作。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y3.3.电路系统电路系统一般由微处理器模块、信号放大及数据采一般由微处理器模块、信号放大及数据采集模块、蠕动泵和三通阀控制模块、输入集模块、蠕动泵和三通阀控制模块、输入输出模块、电源电路模块等五大模块组成。输出模块、电源电路模块等五大模块组成。共同完成对仪器各部件的动作进行控制，共同完成对仪器各部件的动作进行控制，并对前置放大器采集的电极并对前置放大器采集的电极mVmV值进行处理值进行处理和计算，完成仪器设定的工作程序，并将和计算，完成仪器设定的工作程序，并将运算、处理后结果送显示单元显示或打印运算、处理后结果送显示单元显示或打印输出。输出。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y4.4.程序控制系统程序控制系统主要包括仪器微处理系统程序、仪器设定程序、主要包括仪器微处理系统程序、仪器设定程序、仪器测定程序和自动清洗程序等。仪器测定程序和自动清洗程序等。y5.5.显示操作系统显示操作系统轻触键盘用于控制仪器工作和输入数据。轻触键盘用于控制仪器工作和输入数据。液晶显示器用于显示输出测量结果，仪器操作提液晶显示器用于显示输出测量结果，仪器操作提示等。示等。在分析检测样品时，操作者可以通过按键操作控在分析检测样品时，操作者可以通过按键操作控制分析检测过程。制分析检测过程。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术yl.l.每日维护每日维护检查试剂量，如不足检查试剂量，如不足14液面，应及时更换；清液面，应及时更换；清洁仪器表面灰尘及吸样探针，保持探针的畅通；洁仪器表面灰尘及吸样探针，保持探针的畅通；及时弃去废液瓶中的废液。及时弃去废液瓶中的废液。y2.2.每周维护每周维护清洗仪器流路，除去蛋白质、脂类沉积和盐类结清洗仪器流路，除去蛋白质、脂类沉积和盐类结晶。晶。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y3.3.每月维护每月维护用酒精棉球清洁泵管和不锈钢转轴，在用酒精棉球清洁泵管和不锈钢转轴，在泵管的弯处涂硅油或白色凡士林等润滑泵管的弯处涂硅油或白色凡士林等润滑剂。剂。y4.4.每季度进行每季度进行MV值试验值试验电极的电极的MV值由仪器使用说明书给出。值由仪器使用说明书给出。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.电极系统的保养电极系统的保养定期更换电极膜和电极内充液。定期更换电极膜和电极内充液。定期进行去蛋白清洗及电极的活化。定期进行去蛋白清洗及电极的活化。y2.2.流路系统的保养流路系统的保养 保证流路中没有蛋白质、脂类沉积和盐类结晶。保证流路中没有蛋白质、脂类沉积和盐类结晶。每天工作结束关机前，都要进行管路的清洗。每天工作结束关机前，都要进行管路的清洗。冲洗完毕，应当对仪器进行重新定标。冲洗完毕，应当对仪器进行重新定标。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术分析前分析前分析中分析中分析后分析后定标校准液定标校准液电极保养电极保养质控品质控品评价分析性能评价分析性能第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.样本的采集与处样本的采集与处理理采血用器材必须干燥、清洁，最好选用一次性用品。采血用器材必须干燥、清洁，最好选用一次性用品。减少输液对结果减少输液对结果的影响。的影响。采血中应避免溶血。采血中应避免溶血。应尽快送检，不能剧烈振荡，不能长时间被日光照射；应尽快送检，不能剧烈振荡，不能长时间被日光照射；不能立即测定时应分离血清，置于不能立即测定时应分离血清，置于4冰箱中保存。冰箱中保存。当血样与空气接触时，可造成血样中的当血样与空气接触时，可造成血样中的CO2浓度偏低，浓度偏低，pH值升高，进而使钙离子浓度降低。值升高，进而使钙离子浓度降低。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.抗凝剂与药物的影响抗凝剂与药物的影响抗凝剂抗凝剂v血样不能血样不能使用使用EDTA、柠檬酸盐或草酸盐等抗凝剂。、柠檬酸盐或草酸盐等抗凝剂。v即使用肝素，其浓度通常也不超过即使用肝素，其浓度通常也不超过20U/ml血样。血样。药物对测量结果的影响有两方面药物对测量结果的影响有两方面：v药物或它的代谢产物，能引起患者体内被测物的浓度药物或它的代谢产物，能引起患者体内被测物的浓度发生改变。如利尿剂促进发生改变。如利尿剂促进K+、Na+、Cl-从尿中排出。从尿中排出。v药物直接对药物直接对ISE的响应产生影响。如水杨酸盐对的响应产生影响。如水杨酸盐对Cl-电电极响应有干扰，维生素极响应有干扰，维生素C对对K+电极响应有干扰等电极响应有干扰等。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y3.仪器安装仪器安装仪器要求安装在干净、平稳的工作台上，仪器要求安装在干净、平稳的工作台上，尽可能避免潮湿和阳光直射；尽可能避免潮湿和阳光直射；实验室的供电必须符合要求，必要时需连实验室的供电必须符合要求，必要时需连接稳压电源；接稳压电源；周围不得有强的电磁干扰源（如离心机周围不得有强的电磁干扰源（如离心机等），并确保仪器外壳接地良好。等），并确保仪器外壳接地良好。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.定标校正液定标校正液各厂家的定标校正液基本上都不能互换使各厂家的定标校正液基本上都不能互换使用。用。y2.电极保养电极保养电极使用一段时间后就需要保养。电极使用一段时间后就需要保养。y3.质控品质控品选用质量好、性能稳定和对离子选择性电选用质量好、性能稳定和对离子选择性电极响应没有干扰的质控血清，作为实验室极响应没有干扰的质控血清，作为实验室内的质控品。内的质控品。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y4.评价分析性能评价分析性能仪器、试剂、方法等整个检测系统一旦确定仪器、试剂、方法等整个检测系统一旦确定之后，必须对整个系统的不精密度、不准确之后，必须对整个系统的不精密度、不准确度、病人结果的可报告范围、分析灵敏度、度、病人结果的可报告范围、分析灵敏度、分析干扰和参考范围等分析性能进行评价；分析干扰和参考范围等分析性能进行评价；并建立严格的质量控制规范（包括选用质控并建立严格的质量控制规范（包括选用质控品，设定靶值、标准差，绘制质控图，失控品，设定靶值、标准差，绘制质控图，失控情况处理及原因分析等）；情况处理及原因分析等）；然后才能正式用于检测病人样品。然后才能正式用于检测病人样品。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y异常结果的分析取舍：异常结果的分析取舍：如葡萄糖、碳酸氢根过低，同时钾离子过高往往如葡萄糖、碳酸氢根过低，同时钾离子过高往往是血样未经分离放置时间过长所致。是血样未经分离放置时间过长所致。多项检测结果过低，往往提示样品稀释比例不对、多项检测结果过低，往往提示样品稀释比例不对、样品中有纤维蛋白凝块或吸样针部分堵塞导致吸样品中有纤维蛋白凝块或吸样针部分堵塞导致吸样量不足所致。样量不足所致。y对某些急诊检验项目：对某些急诊检验项目：如血钾、血钙等遇到特别异常结果时，应及时与如血钾、血钙等遇到特别异常结果时，应及时与临床医生联系，以便对患者进行紧急处置。临床医生联系，以便对患者进行紧急处置。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y血钠测定在临床的表现为低钠血症和高钠血血钠测定在临床的表现为低钠血症和高钠血症；症；y血钾测定在临床的表现为血清钾增高和血清血钾测定在临床的表现为血清钾增高和血清钾降低；钾降低；y血氯测定在临床的表现也是增高和减低。血氯测定在临床的表现也是增高和减低。y详细应用情况见第十三章体液与酸碱平衡紊详细应用情况见第十三章体液与酸碱平衡紊乱。乱。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y血气分析仪血气分析仪(blood gas analyzer)是应用电化学分析技术和原理，采用电极对是应用电化学分析技术和原理，采用电极对血液中的血液中的pH值、值、PCO2和和PO2进行测定的临床进行测定的临床分析仪器。分析仪器。近年来，血气分析仪又增加了新功能，如电近年来，血气分析仪又增加了新功能，如电解质，尿素氮、肌酐、葡萄糖、乳酸等代谢解质，尿素氮、肌酐、葡萄糖、乳酸等代谢物及血氧系统定量测定，现代血气分析仪又物及血氧系统定量测定，现代血气分析仪又称为全自动血气电解质代谢物血氧分称为全自动血气电解质代谢物血氧分析仪。析仪。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y电极的工作原理即电极的工作原理即电化学分析原理。电化学分析原理。y电化学分析电化学分析(electrochemical anaIysis)是建立在溶液电化学性质基础上并利用这是建立在溶液电化学性质基础上并利用这些性质，通过些性质，通过电极电极这个变换器，将被测物这个变换器，将被测物质的浓度转变成质的浓度转变成电学参数电学参数而进行检测的方而进行检测的方法。法。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.pH电极电极属属玻璃膜电极，由钠或锂玻璃熔融吹制而成。玻璃膜电极，由钠或锂玻璃熔融吹制而成。通常需与参比电极构成一个电化学电池，通过通常需与参比电极构成一个电化学电池，通过测量该测量该电池的电动势电池的电动势E E而获得相应溶液的而获得相应溶液的pH。在一定温度下，玻璃电极的电极电位在一定温度下，玻璃电极的电极电位E玻玻与待测与待测溶液的溶液的pH有线性关系：有线性关系：pHnF2.303RTKE玻玻第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.2.PCO2电极电极属气敏电极属气敏电极，是由，是由pHpH玻璃电极玻璃电极和和银银-氯化银电极氯化银电极组装在一起形成的组装在一起形成的复合电极复合电极。由内电极、由内电极、渗透膜、尼龙网渗透膜、尼龙网和外和外缓冲液组成，内电极为缓冲液组成，内电极为pH玻璃电玻璃电极和银极和银-氯化银参比电极。氯化银参比电极。渗透膜只允许血液样品中渗透膜只允许血液样品中CO2分子分子通过通过。气体气体CO2分子在内溶液中酸化后使分子在内溶液中酸化后使pH下降下降，再通过，再通过pH电极测定。电极测定。待测溶液中待测溶液中pH值的变化值的变化与与lg PCO2有线性关系。有线性关系。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y3.3.PO2电极电极是一种气敏电极、是一种气敏电极、极谱电极极谱电极，属氧化还原电极，它基于，属氧化还原电极，它基于电解氧的原理实现对氧的测量电解氧的原理实现对氧的测量。PO2电极由电极由铂丝阴极铂丝阴极与银与银-氯化银阳极组成。铂丝被封氯化银阳极组成。铂丝被封闭在玻璃柱中，玻璃柱装在一个有机玻璃套内，套的一闭在玻璃柱中，玻璃柱装在一个有机玻璃套内，套的一端覆盖着端覆盖着O2渗透膜，套内空隙充满渗透膜，套内空隙充满PO2电极缓冲液。电极缓冲液。O2渗透膜渗透膜为聚丙烯膜或聚四氟乙烯膜或聚乙烯、聚酯。为聚丙烯膜或聚四氟乙烯膜或聚乙烯、聚酯。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术在在0.65V的极化电压下，电极电流的的极化电压下，电极电流的大小取决于铂阴极表面大小取决于铂阴极表面O2量。量。O2在在铂阴极表面铂阴极表面发生的反应如下：发生的反应如下：极限扩散电流的大小决定于极限扩散电流的大小决定于渗透到渗透到阴极表面氧的多少，后者又取决于阴极表面氧的多少，后者又取决于膜外的膜外的PO2。PO2电极电流与电极电流与PO2成正比，成正比，过过0点点的一条直线，只需要的一条直线，只需要1点定标（校点定标（校准）准）。而其他电极的电压与含量。而其他电极的电压与含量（或对数含量）关系都不过（或对数含量）关系都不过0点，所点，所以需要两点定标，且偏差不能大于以需要两点定标，且偏差不能大于5%。222222OHOHOOH2e2OH22第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y血气分析的基本方法血气分析的基本方法包括直接计算法、标准曲线法和标准加包括直接计算法、标准曲线法和标准加入法。入法。y具体内容具体内容参见离子选择电极电位分析方法一节。参见离子选择电极电位分析方法一节。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y血气分析仪的结构血气分析仪的结构由电极系统、管路系统和电路系统三大由电极系统、管路系统和电路系统三大部分组成。部分组成。电极系统基本结构参见本节仪器工作原电极系统基本结构参见本节仪器工作原理部分。理部分。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y通常由溶液瓶、气瓶、正压泵、负压泵、电磁通常由溶液瓶、气瓶、正压泵、负压泵、电磁阀、转换装置和连接管道等部分组成。阀、转换装置和连接管道等部分组成。y1.1.气路系统气路系统主要用来主要用来提供提供PO2和和PCO2两种电极定标时两种电极定标时所需的两种标准气体。所需的两种标准气体。依据配气方式，气路系统可分两种类型：依据配气方式，气路系统可分两种类型：v(1)(1)外配气方式，又叫压缩气瓶供气方式。外配气方式，又叫压缩气瓶供气方式。v(2)(2)内配气方式，又叫气体混合器供气方式。内配气方式，又叫气体混合器供气方式。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y(1)(1)外配气方式外配气方式仪器由两个压缩气瓶提供定标气，一个仪器由两个压缩气瓶提供定标气，一个含有含有5CO2和和20O2；另一个；另一个含含10CO2，不含，不含O2。y(2)(2)内配气方式内配气方式仪器本身配备有气体混合器，以产生定标气。来仪器本身配备有气体混合器，以产生定标气。来自空气压缩机产生的压缩空气和气瓶送来的纯自空气压缩机产生的压缩空气和气瓶送来的纯CO2气体由气体混合器进行配比、混合，产生符气体由气体混合器进行配比、混合，产生符合要求的定标气体。合要求的定标气体。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术 2.2.液路系统液路系统液路系统具有两种功液路系统具有两种功能：为能：为pH电极系统电极系统提供定标缓冲液；提供定标缓冲液；管道冲洗。管道冲洗。该系统一般需要四个该系统一般需要四个溶液瓶，分别盛放缓溶液瓶，分别盛放缓冲液冲液1 1、缓冲液、缓冲液2 2、冲、冲洗液和废液。洗液和废液。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y血气分析仪电路系统将仪器测量信号进行放血气分析仪电路系统将仪器测量信号进行放大和模数转换，对仪器实行有效控制、显示大和模数转换，对仪器实行有效控制、显示和打印结果，通过键盘输入指令。和打印结果，通过键盘输入指令。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y每天检查大气压力、钢瓶气体压力；检查定标液、每天检查大气压力、钢瓶气体压力；检查定标液、冲洗液是否过期，检查气泡室是否有蒸馏水；冲洗液是否过期，检查气泡室是否有蒸馏水；y每周更换一次内电极液，定期更换电极膜；冲洗每周更换一次内电极液，定期更换电极膜；冲洗管道系统，擦洗分析室；管道系统，擦洗分析室；y若电极使用时间过长，电极反应变慢，可用电极若电极使用时间过长，电极反应变慢，可用电极活化液对活化液对pH、PCO2电极活化，对电极活化，对PO2电电极进行轻轻极进行轻轻打磨，除去电极表面氧化层。打磨，除去电极表面氧化层。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.pH电极电极血液中的蛋白质容易黏附在电极表面，必血液中的蛋白质容易黏附在电极表面，必须经常按血液须经常按血液缓冲液缓冲液(或生理盐水或生理盐水)水水空气的顺序进行清洗。若清洗后仍不能空气的顺序进行清洗。若清洗后仍不能正常工作，应更换电极。正常工作，应更换电极。无论使用与否，无论使用与否，pH电极的使用寿命一般都电极的使用寿命一般都为为12年。年。如果如果pH电极在空气中暴露电极在空气中暴露2h以上，应将其以上，应将其放在缓冲液中浸泡放在缓冲液中浸泡6h24h才能使用。才能使用。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.2.PCO2电极电极电极要经常用专用清洁剂清洗，如果经清电极要经常用专用清洁剂清洗，如果经清洗、更换缓冲液后仍不能正常工作时，应洗、更换缓冲液后仍不能正常工作时，应更换半透膜。更换半透膜。多数电极的缓冲液密封在电极内，但有些多数电极的缓冲液密封在电极内，但有些型号的要更换缓冲液。型号的要更换缓冲液。y3.3.PO2电极电极PO2电极中干净的内电极端部和四个铂丝电极中干净的内电极端部和四个铂丝点应该明净发亮。点应该明净发亮。每次清洗时，都应该用电极膏对每次清洗时，都应该用电极膏对PO2电极电极进行研磨保养。进行研磨保养。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y4.4.参比电极参比电极参比电极套需要定期更换。内电极部分不需参比电极套需要定期更换。内电极部分不需要保养。要保养。在更换盐桥或电极内的在更换盐桥或电极内的KCl溶液时，除加入溶液时，除加入室温下饱和的室温下饱和的KCl溶液外，还需要加入少许溶液外，还需要加入少许的的KCl结晶，使其在结晶，使其在37恒恒温条件下也达到温条件下也达到饱和。饱和。同时防止参比电极存在气泡，否则会严重影同时防止参比电极存在气泡，否则会严重影响电极的功能。响电极的功能。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y定标或校准定标或校准(calibration)制作或校正制作或校正pH、PCO2和和PO2电极系统工作曲电极系统工作曲线的线的过程。过程。y1.1.定标方式定标方式两点定标：对于不两点定标：对于不过过0点的直线点的直线，需要测量，需要测量2 2个标准的检测信号，以确定个标准的检测信号，以确定斜率和截距斜率和截距；一点定标：对于一点定标：对于过过0点的直线点的直线，通过测量，通过测量1 1个个标准的检测信号，以确定标准的检测信号，以确定斜率斜率。定标后，根据标准比较法测定血样含量。定标后，根据标准比较法测定血样含量。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.2.标准物质标准物质pH、PCO2电极为两点定标，电极为两点定标，PO2电极电极为为1 1点定标。点定标。pHpH系统：使用系统：使用7.3837.383和和6.8406.840两种标准缓冲液。两种标准缓冲液。O2和和CO2系统分别用系统分别用1 1种、两种混合气体来进行定种、两种混合气体来进行定标。标。y3.3.定标频率定标频率可以手动或自动执行，其频率由所用仪器类型及仪可以手动或自动执行，其频率由所用仪器类型及仪器状态而定。器状态而定。当仪器开机时，必须进行两点定标；仪器连续运转当仪器开机时，必须进行两点定标；仪器连续运转过程中，应多次进行一点标定，或重复进行两点定过程中，应多次进行一点标定，或重复进行两点定标，以保证结果的可靠性。标，以保证结果的可靠性。现代血气分析仪有自动校正程序。现代血气分析仪有自动校正程序。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.质控物的使用质控物的使用血气分析的参考试剂按基质不同分为水剂缓血气分析的参考试剂按基质不同分为水剂缓冲液、全血、血液基质、血代氟碳化合物冲液、全血、血液基质、血代氟碳化合物4 4种，种，使用最多的是水剂缓冲液，该质控物用安瓿使用最多的是水剂缓冲液，该质控物用安瓿封存，具有稳定、使用方便等优点。封存，具有稳定、使用方便等优点。y2.2.质控要求质控要求临床实验室每天应测定质控液，并绘制质控临床实验室每天应测定质控液，并绘制质控图，检测仪器的运行状态和精密性。图，检测仪器的运行状态和精密性。主动参加各省市临检中心或卫生部临检中心主动参加各省市临检中心或卫生部临检中心组织的室间质评活动。组织的室间质评活动。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y水剂质控物水剂质控物用用Na2HPO4、KH2PO4及及NaHCO3配成不同配成不同的的pHpH缓冲液缓冲液，再与，再与不同浓度的不同浓度的CO2和和O2平衡平衡，加入防腐剂贮存，有高、正常、低加入防腐剂贮存，有高、正常、低3 3种水平种水平规格。规格。质控物用安瓿装，液体并未充满整支安瓿，质控物用安瓿装，液体并未充满整支安瓿，液相为水及缓冲物质，液相为水及缓冲物质，气相则气相则由由O2、N2、CO2及汽水及汽水组成。组成。使用时，需在室温平衡后，再用力振摇使用时，需在室温平衡后，再用力振摇2 2min3 3min，使气相与液相重新平衡。，使气相与液相重新平衡。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y血气分析在呼吸系统疾病和酸碱平衡紊乱中血气分析在呼吸系统疾病和酸碱平衡紊乱中的应用十分广泛。的应用十分广泛。y临床应用详见第十三章体液和酸碱平衡紊乱。临床应用详见第十三章体液和酸碱平衡紊乱。返回章目录返回章目录第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y电电泳泳(electrophoresis)带电粒子在电场中的带电粒子在电场中的移动移动现象。现象。y电泳技术电泳技术利用这种现象对化学或生物化学组分进利用这种现象对化学或生物化学组分进行分离分析的技术。行分离分析的技术。已广泛用于各种生物分子分离分析。已广泛用于各种生物分子分离分析。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.荷电性与移动方向荷电性与移动方向机体中的许多生物分子都是两性物质，其机体中的许多生物分子都是两性物质，其荷荷电性质电性质受受介质介质pH的影响。的影响。当当pH在生物分子等电点（在生物分子等电点（isoelectric point,pI）以下时，带正电荷，否则带负电荷。以下时，带正电荷，否则带负电荷。物质带电性质不同，在电场强度中移动的方物质带电性质不同，在电场强度中移动的方向不同。向不同。在某个设定的电场中，在某个设定的电场中，带电粒子带电粒子在支持介质在支持介质中可中可向与其所带电荷相反的电极方向向与其所带电荷相反的电极方向移动。移动。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.2.移动的速度与迁移率移动的速度与迁移率粒子恒定移动速度粒子恒定移动速度 v=QE6r迁移率（迁移率（）指）指单位电场强度下带电粒子的单位电场强度下带电粒子的运动速度，运动速度，它与带电粒子关系为：它与带电粒子关系为：粒子带粒子带净电荷量净电荷量Q Q愈多愈多、直径直径(2r)(2r)愈小愈小、愈接愈接近球形近球形，在电场中移动速度愈快。，在电场中移动速度愈快。r6QEv第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.待分离物质的性质待分离物质的性质一般来说，粒子带的电荷量越大、直径越小、一般来说，粒子带的电荷量越大、直径越小、形状越接近球形，则其电泳迁移速度越快。形状越接近球形，则其电泳迁移速度越快。y2.2.缓冲液的性质缓冲液的性质（1 1）溶液的溶液的pH值值：决定了待分离生物分子：决定了待分离生物分子的解离程度，影响其带电性质、净电荷量。的解离程度，影响其带电性质、净电荷量。（2 2）缓冲液离子强度缓冲液离子强度一般在一般在0.020.20molkg之间。之间。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y3.电场强度电场强度电场强度也称电位梯度，它是指单位长度的电位降电场强度也称电位梯度，它是指单位长度的电位降（V/cm）。电压越高，电场强度越大，迁移率越大，）。电压越高，电场强度越大，迁移率越大，带电粒子移动越快。带电粒子移动越快。y4.支持介质的性质支持介质的性质包括支持介质的黏性吸附对泳动的阻碍作用，支持包括支持介质的黏性吸附对泳动的阻碍作用，支持介质的介质的分子筛和电渗作用分子筛和电渗作用。y此外，此外，温度升高时，介质黏度下降，分子运动加剧，引温度升高时，介质黏度下降，分子运动加剧，引起自由扩散加快、区带变宽和分辨率下降。起自由扩散加快、区带变宽和分辨率下降。第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术有无固体有无固体支持物支持物支持物支持物特点特点不同不同使用目的使用目的用法类型用法类型区带电泳、等电聚焦电泳、区带电泳、等电聚焦电泳、免疫电泳免疫电泳水平电泳、柱状电泳、板状电泳、水平电泳、柱状电泳、板状电泳、毛细管电泳等毛细管电泳等无阻滞支持物电泳：醋酸纤维薄膜无阻滞支持物电泳：醋酸纤维薄膜高密度凝胶电泳：琼脂、聚丙烯高密度凝胶电泳：琼脂、聚丙烯核酸、血清蛋白、核酸、血清蛋白、DNA等等无固体支持物：细胞电泳、柱电泳等无固体支持物：细胞电泳、柱电泳等有固体支持物：薄层电泳、凝胶电泳（聚丙烯酰胺）有固体支持物：薄层电泳、凝胶电泳（聚丙烯酰胺）双向电泳、