基因敲除小鼠学习教案

会计学1基因敲除小鼠基因敲除小鼠第一页，编辑于星期一：九点 五十七分。CONTENTS基因敲除技术原理简介1基因敲除小鼠的基因型鉴定2基因敲除小鼠的饲养和繁殖3第1页/共16页第二页，编辑于星期一：九点 五十七分。一、第2页/共16页第三页，编辑于星期一：九点 五十七分。（棕褐色（棕褐色AAAA）（白色）（白色）（AaAa）（AaAa）(AA)(AA)(AA)(AA)（AaAa）（AaAa）(aa)(aa)第3页/共16页第四页，编辑于星期一：九点 五十七分。鉴定方法把这种胚胎移植到雌性假孕鼠的子宫内，是否形成“ 嵌合体 ”胚胎 。 将ES细胞注入到同种或免疫缺陷性小鼠的皮下、睾丸或肾包囊，观察注入的细胞在宿主动物体内是否形成畸胎瘤。把受试细胞在体外进行随机自发的分化或诱导它们向不同胚层的细胞分化。一般的方法是去除饲养层细胞后，ES细胞聚集并形成类胚体 。 第4页/共16页第五页，编辑于星期一：九点 五十七分。靶向载体Fam172a同源序列靶基因第5页/共16页第六页，编辑于星期一：九点 五十七分。第6页/共16页第七页，编辑于星期一：九点 五十七分。正负双向选择法正负双向选择法neo:正向选择基因。具有新霉素(G418)抗性，其在发生随机组合和同源重组的细胞中都可以表达。HSV-tk：负向选择基因。在发生同源重组时别剪切掉，发生随机组合时被保留。tk基因可使无毒的丙氧鸟苷（GANC）转化为毒性核苷酸而杀死细胞。 neoneo基因保留，基因保留，tktk基因被切除基因被切除对对G418G418和和GANCGANC都有抗性都有抗性对对G418G418有抗性，对有抗性，对GANCGANC敏感敏感neoneo、tktk基因均被保留基因均被保留靶向载体靶向载体筛选出中靶筛选出中靶ESES第7页/共16页第八页，编辑于星期一：九点 五十七分。第8页/共16页第九页，编辑于星期一：九点 五十七分。二、第9页/共16页第十页，编辑于星期一：九点 五十七分。第10页/共16页第十一页，编辑于星期一：九点 五十七分。第11页/共16页第十二页，编辑于星期一：九点 五十七分。三、第12页/共16页第十三页，编辑于星期一：九点 五十七分。第13页/共16页第十四页，编辑于星期一：九点 五十七分。第14页/共16页第十五页，编辑于星期一：九点 五十七分。THANK第15页/共16页第十六页，编辑于星期一：九点 五十七分。