（浙江选考）2018版高中生物 考前特训 非选择题集训 题型4 围绕选修1（含解析）

题型4围绕选修1、3展开的命题3年选考真题1(2017浙江4月选考，32)(加试题)回答下列(一)、(二)小题：(一)回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题：(1)制作泡菜时，为缩短发酵周期，腌制前可加入乳酸菌。取少量酸奶，用无菌蒸馏水稀释后，再用_蘸取少量的稀释液，在MRS乳酸菌专用培养基的平板上划线，以获得乳酸菌单菌落。下图所示的划线分离操作，正确的是_。(2)泡菜腌制过程中，会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐，其中醇类是由_进行厌氧呼吸产生。亚硝酸盐对人体有害，为测定泡菜中亚硝酸盐含量，从泡菜中提取亚硝酸盐，与_发生重氮化反应，再与N1萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物。然后用光程为1 cm的_，在550 nm光波下测定光密度值，与由已知浓度梯度亚硝酸钠制作的_比对，计算样品中亚硝酸盐的含量。(3)已知乳酸菌中的亚硝酸还原酶能降解亚硝酸盐。在一定的腌制时间内，随着腌制时间的延长，泡菜中亚硝酸盐含量逐渐降低，是由于在厌氧和_环境下亚硝酸盐被亚硝酸还原酶降解。(二)回答与生态工程有关的问题：(1)对农作物秸秆多途径利用的基本过程示意图如下，贯穿全过程的核心技术是_技术。其中“过腹还田”的具体途径是_。将秸秆和动物粪便等通过微生物发酵产生沼气，这是利用了农业生态工程中的_技术。(2)农业生产上，畜牧业依赖和受制于种植业，可以通过种植业和畜牧业的_技术提高经济和社会效益。“退耕还林”后，林地的增加可以减少_，更有利于受损生态系统的恢复。使用农药能有效控制农业害虫，但也使生态系统的_减少，因此利用生物的_进行生物防治是今后的发展方向。2(2016浙江4月选考，32)(加试题)回答下列(一)、(二)小题：(一)请回答与“果汁中的果胶和果胶酶”实验有关的问题：(1)果胶是细胞壁的重要组成成分，其化学本质是_(A.蛋白质B脂质C核酸D多糖)。它在细胞壁的形成过程中的主要作用是将相邻的细胞_在一起。(2)制取果汁时，先用果胶酶将果胶分解成_和半乳糖醛酸甲酯等物质，再用_酶处理，可得到比较澄清的果汁。用适量且浓度适宜的上述两种酶处理时，果汁的出汁率、澄清度与酶的_高低成正相关。(3)由于果胶不溶于乙醇，故可用乙醇对果胶粗提物(经酶处理后的混合物)进行_处理，从而得到干制品。(二)兔肝细胞中的基因E编码代谢甲醛的酶，拟利用基因工程技术将基因E转入矮牵牛中，以提高矮牵牛对甲醛的代谢能力，请回答：(1)从兔肝细胞中提取mRNA，在_酶的作用下形成互补DNA，然后以此DNA为模板扩增得到基因E。在相关酶的作用下，将基因E与Ti质粒连接在一起，形成_，再导入用氯化钙处理的_，侵染矮牵牛叶片。将被侵染的叶片除菌后进行培养，最终得到转基因矮牵牛。其中培养过程正确的是()A叶片在含适宜浓度生长素的培养基上分化形成愈伤组织B愈伤组织在含细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽C再生的芽在细胞分裂素含量较高的培养基上生根D愈伤组织在含适宜浓度植物生长调节剂的培养基上脱分化形成再生植株(2)取转基因矮牵牛叶片，放入含MS液体培养基和适宜浓度甲醛且密封的试管中。将试管置于_上，进行液体悬浮培养液。一段时间后测定培养基中甲醛的含量，以判断基因E是否在转基因矮牵牛中正常表达。培养过程中液体培养基的作用：一是提供营养；二是_，从而使叶片保持正常的形态。1年名校模拟3(2017温州市联考)(加试题)卡那霉素和头孢霉素都有抗菌作用，此外，卡那霉素还对葡萄细胞有抑制作用。研究人员将Barnase基因(雄性不育基因)转入葡萄细胞，利用卡那霉素和头孢霉素，通过植物克隆方法成功培育出大粒、无核的葡萄新品种。请回答：(1)构建含Barnase基因、葡糖苷酸酶基因和卡那霉素抗性基因的重组质粒，导入农杆菌，在固体培养基中培养形成_以便鉴定是否混有杂菌，再用_将农杆菌转移至LB_培养基中进行扩大培养。构建重组质粒需要用到的工具酶是_、_。(2)将经过_的幼嫩葡萄叶片切成小块，浸入农杆菌悬浮液中，4分钟后取出(此时已有较多农杆菌附着在叶片小块上)并接种到固体培养基中。培养至第3天时，可以看到在叶片小块周围出现_和大量菌落。这时再用头孢霉素处理叶片小块，其目的是_(A.抑制葡萄细胞脱分化B促进葡萄细胞再分化C杀灭农杆菌D促进农杆菌生长)。(3)将叶片小块放入卡那霉素培养基中培养一段时间后，转移至生芽培养基中，待其长出_后，再转移至生根培养基中继续培养形成试管苗。卡那霉素培养基起着_作用，植物克隆的技术基础是_。(4)在卡那霉素培养基中，由于转化细胞对周围的非转化细胞有保护作用，获得的试管苗中可能存在假的转基因试管苗，因此还需对试管苗的_基因的表达产物进行生化检测，才能鉴别出真正的转基因试管苗。(5)最后，对转基因试管苗还需进行逐渐_湿度的锻炼，使之适应自然环境。4(2017杭州建人高复学校月考)(加试题)回答下列(一)、(二)小题：(一)如图为果酒和果醋的制作流程，回答下列问题：(1)从自然菌样中筛选较理想的醋化醋杆菌进行纯化培养，通常采用_法接种，接种之前要对接种工具进行_，避免接种工具上可能存在的微生物污染培养基。(2)由果酒转变成果醋的制作时，需要改变的环境条件是_和温度控制住3035 。写出由果酒酿制成果醋过程的总反应式：_。(3)若在果汁中含有醋化醋杆菌，在果酒发酵旺盛时，醋化醋杆菌_(填“能”或“不能”)将果汁中的糖发酵为醋酸，理由是_。(4)在用果汁制作果酒的过程中，发酵瓶溶液中pH的变化是_。A增大 B不变C减小 D先减小后增大(二)回答下列关于生物工程的有关问题：(1)基因工程的核心是_；将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是_，将目的基因导入动物细胞最有效的方法是_。(2)植物体细胞杂交技术中，诱导原生质体融合的化学方法一般是用_作为诱导剂来诱导细胞融合；动物细胞工程中_技术是其他动物细胞工程技术的基础，动物细胞工程的一项重要应用是单克隆抗体的制备，与普通抗体相比单克隆抗体的最主要优点是_。(3)若对囊胚进行胚胎分割，要注意_，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。5(2017教育绿评联盟3月)(加试题)回答下列(一)、(二)小题：(一)已知某细菌的两种突变类型细菌和细菌的营养条件和菌落特征都相同，但细菌能分解有机物A而不能分解有机物B，细菌能分解有机物B而不能分解有机物A。现有这两种类型细菌的混合液样品，要将其分离，有人设计了一种方案，部分操作步骤如下图。(1)步骤一使用的是_培养基，其中含有细菌生长所需的水、无机盐、碳源和氮源等营养物质，此外还必须加入_，以利于对不同菌种进行分离操作。(2)步骤一采用_法接种，此接种法可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可形成单个、独立的_，最终可能得到纯种的细菌；要进行上述接种操作，必须在_及酒精灯火焰附近进行，以避免杂菌污染。(3)步骤三中，若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物含量进行测定，当培养液中检测出如下的实验结果，其中能说明培养液只有细菌的是_。A化合物A与B含量都明显下降B化合物A含量明显下降，B含量基本不变C化合物A含量基本不变，B含量明显下降D化合物A、B含量都基本不变(二)绿色城市的重要标志之一是实现垃圾的“减量化、资源化和无害化”。下图是垃圾资源化、无害化处理的一种方案：(1)该生态系统中属于分解者的生物有_。该生态工程主要利用了_的原理。(2)从资源与环境的角度来看，、途径优于途径的主要原因是_和减少环境污染等。(3)该生态系统中能利用发酵技术产生沼气开发生物能，从该角度看，应属于_的生态工程。A物质循环利用B清洁及可再生能源系统组合利用C山区小流域综合治理与开发D节水和废水处理与利用(4)种植业和_是人类食物生产系统的两大支柱，两者结合的优化设计需要按照_规律进行综合优化，使系统从总体上获得最佳的经济效益、生态效益和社会效益。6(2017杭州学军中学9月)(加试题)回答下列生物科技及其实践的相关问题：(1)培育转基因抗虫棉时为构建重组DNA分子通常需要用同种限制性核酸内切酶分别切割_和_。将重组DNA转入农杆菌时，可以用_处理农杆菌，使重组DNA易于导入。(2)科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育“番茄马铃薯”植株的过程中，首先用_酶解除去掉植物细胞的细胞壁，以使植物原生质体相互分离；在动物细胞培养技术中，使细胞分离开来的酶是_。(3)进行早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和_。(4)分离细菌时通常用固体培养基，原因是_。与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和_，这些植物激素一般需要事先单独配制成_保存备用。使用过的培养基及其培养物必须经过_处理后才能丢掉，以防止培养物的扩散。(5)一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，若用_测试，流出物呈_色，表明水解产物糊精生成。7(2017十校联盟高三3月)(加试题)回答下列(一)(二)小题：(一)请回答果醋制作和醋化醋杆菌扩大培养及筛选的相关问题：(1)醋化醋杆菌在_条件下才能将乙醇转化为醋酸，因此需要持续往发酵瓶中通入足量的_。(2)底物充足条件下，醋酸发酵液pH值变化是_(A.持续变大B先变大后稳定C持续变小D先变小后稳定)。(3)对醋化醋杆菌进行扩大培养所需的液体培养基(1 L)配方为：蛋白胨3 g、酵母提取物5 g、_25 g和蒸馏水，并调pH至_，再用_法进行灭菌。若要分离醋化醋杆菌，还需在上述的培养基中加入适量的_。(二)请回答利用基因工程生产人胰岛素的相关问题：(1)先从人体_细胞中获取控制人胰岛素合成的mRNA，然后在_酶催化下合成人胰岛素基因。(2)构建重组DNA分子通常需要_的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体，然后用DNA连接酶使两者连接在一起。(3)大肠杆菌的_会阻碍重组DNA进入细胞，通常使用氯化钙处理大肠杆菌。(4)为检测目的基因是否在大肠杆菌中高效稳定表达，最简单有效的方法是_(A.检测大肠杆菌中有无人胰岛素基因B检测培养基中葡萄糖浓度C检测大肠杆菌中人胰岛素基因mRNA含量D检测培养基中胰岛素含量)。人胰岛素基因能在大肠杆菌中表达是因为人和大肠杆菌共用_。(5)胰岛素除了用于治疗糖尿病之外，还可以用来提高动物_形成率。8(2017稽阳联谊学校3月)(加试题)回答下列(一)、(二)小题：(一)炭疽杆菌能引起人畜患炭疽病。对炭疽病疑似患者，可通过甲图所示鉴定炭疽杆菌的实验进行确诊，其中实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌。(1)若要从炭疽病疑似患者体内分离出炭疽杆菌，可将患者皮肤脓胞渗出物稀释后滴于培养基表面，用无菌玻璃刮刀涂匀，该接种方法称为_。乙图所示的四种菌落分布图中，该接种方法不能得到的是_。(2)制备甲图中的液体培养基时需采取_法灭菌。接种可疑菌后，需将三角瓶置于35 下的摇床上_培养24小时，可疑菌会大量繁殖，液体培养基变浑浊。(3)甲图中，对照组与实验组试管同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_(高/低)，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。此判断的依据是_。(二)印度沙漠猫是一种珍稀猫科动物，通过胚胎工程技术，可以让家猫代孕而繁育，主要步骤如下图所示。(1)步骤甲、乙分别是指_、_。(2)卵巢经超数排卵处理后，要使用超声监视器确定_的位置，插入穿刺针吸取其液体，取出_，在体外进行人工培养得到成熟的卵细胞。(3)若在早期细胞培养过程中，发现某个细胞出现变异性状，科研人员提取这个细胞进行单独培养，此种培养方法称为_。培养过程中，下列哪种细胞比较难以克隆？_。A有限细胞系 B无限细胞系C转化细胞系 D肿瘤细胞系3年选考真题1(2016浙江10月选考，32)(加试题)回答下列(一)(二)小题：(一)请回答从土壤中分离产脲酶细菌和脲酶固定化实验的有关问题：(1)LB固体培养基：取适量的蛋白胨、酵母提取物、NaCl，加入一定量的蒸馏水溶解，再加_，灭菌备用。(2)尿素固体培养基：先将适宜浓度的尿素溶液用_灭菌过的G6玻璃砂漏斗过滤，因为G6玻璃砂漏斗_，故用于过滤细菌。然后将尿素溶液加入到已经灭菌的含有酚红的培养基中，备用。(3)取适量含产脲酶细菌的104、105两种土壤稀释液，分别涂布接种到LB固体培养基和尿素固体培养基上，培养48 h，推测固体培养基上生长的菌落数最少的是_(A.105稀释液尿素固体培养基B105稀释液LB固体培养基C104稀释液尿素固体培养基D104稀释液LB固体培养基)。在尿素固体培养基上产脲酶细菌菌落周围出现_，其原因是细菌产生的脲酶催化尿素分解产生_所致。(4)制备固定化脲酶时，用石英砂吸附脲酶，装柱。再用蒸馏水洗涤固定化酶柱，其作用是_。(二)某小组欲进行烟草原生质体分离与培养的研究。请回答：(1)原生质体的分离：在无菌条件下，取烟草无菌苗的叶片，放入含有0.5 mol/L甘露醇(维持较高渗透压)的_混合液处理，经过离心纯化后获得原生质体。(2)原生质体的培养：将原生质体进行培养，重新长出细胞壁，形成胚性细胞。此时，应该_培养基中甘露醇浓度，以利于胚性细胞继续培养形成细胞团，然后经两条途径形成再生植株。途径一：细胞团经球形胚、_和胚状体，最后发育成植株。途径二：细胞团增殖为愈伤组织，然后在发芽培养基上诱导出芽，切割芽经过生根后形成完整植株。上述发芽培养基中含量相对较高的激素是_，胚性细胞的主要特点是：_(A.液泡小、细胞核小B液泡大，细胞核大C液泡大，细胞核小D液泡小、细胞核大)。(3)为了对烟草的某些性状进行改良，分离得到两种烟草的原生质体后，通过_方法将它们的遗传物质组合在一起，经培养获得具有新性状的再生植株。提取再生植株的DNA，采用_扩增相关基因，来鉴定遗传物质是否成功重组。2(2015浙江10月选考，32)(加试题)科研人员拟将已知的花色基因(目的基因)转入矮牵牛的核基因组中，培育新花色的矮牵牛。请回答：(1)为了获得大量的目的基因，将其与含有抗生素抗性基因的质粒DNA形成重组DNA，再与经_(A.氯化钙B氯化钠C蔗糖D葡萄糖)处理的大肠杆菌液混合，使重组DNA进入大肠杆菌。用_的玻璃刮刀将稀释后的大肠杆菌液_接种到含有抗生素的固体培养基上，经培养形成_，再进行鉴定和扩大培养。(2)从扩大培养的大肠杆菌中提取含有目的基因的DNA，用_分别切割含目的基因的DNA和农杆菌的Ti质粒，然后用DNA连接酶连接，形成重组DNA并导入农杆菌。(3)取田间矮牵牛的幼嫩叶片，经自来水冲洗，先用70%_浸泡，再用5%次氯酸钠浸泡，最后用_清洗，作为转基因的受体材料。(4)将消毒后的矮牵牛叶片剪成小片，在含有目的基因的农杆菌溶液中浸泡后，取出并转移至加有适当配比生长调节剂的MS培养基(含蔗糖、琼脂和抗生素，下同)上，使叶小片先脱分化形成_。再将其转移至另一培养基诱导形成芽，芽切割后转移至_(A.LB培养基BMS培养基适宜浓度NAACMS培养基适宜浓度BADNAA/BA小于1的MS培养基)上生根，形成完整植株。(5)取出试管苗，在适宜的光照、温度和80%以上的_等条件下进行炼苗。提取叶片组织的DNA，采用PCR技术_目的基因，鉴定目的基因是否成功导入。(6)为判断本研究是否达到预期目的，可比较转基因植株和非转基因植株的_性状。1年名校模拟3(2017宁波市十校9月联考)(加试题)如下表是4组生物学实验培养基。请回答下列问题：组别培养基a无机盐、蔗糖、维生素和甘氨酸等有机物、琼脂b葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、酚红、水、琼脂糖c蛋白胨、酵母提取物、NaCl、水、琼脂d葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等(1)进行动物细胞培养应选用_培养基(填组别)。在进行细胞培养时，首先，将动物体内的一部分组织取出，经过机械消化或_消化，使其分散成单个的细胞。如果是培养胚胎干细胞，则首先需要在培养皿底部制备一层细胞，称为_，这层细胞具有_的特点。胚胎干细胞是一种未分化细胞，具有_性和_核型。(2)分离以尿素为氮源的细菌应选用培养基b。在含有_酶的细菌菌落周围会出现_，这是由于尿素被分解产生的_使pH升高，酚红指示剂产生颜色变化。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力_。该实验用的分离方法是_。(3)用培养基a进行植物组织培养，则培养基还需要加入_。(4)下表对应关系中，错误的是_。选项对象方法A培养基cG6玻璃砂漏斗B培养皿高压蒸汽灭菌C超净台紫外灯照射D自然生长的茎段70%乙醇和5%次氯酸钠4.(2017杭州市建人高复学校月考)(加试题)回答下列(一)、(二)小题：(一)为了增强秸秆发酵效果，提高秸秆的营养价值，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答有关的问题：(1)纤维素是植物多糖，它在植物细胞中的作用是_(A.能源物质B贮能物质C结构组成成分D将不同的细胞粘连在一起)。该菌株在生态系统中能促进_循环。(2)用_培养基来鉴定和分离纤维素酶高产菌株，在将培养基转移到三角瓶或试管中时必须用_，以防止培养基沾到三角瓶壁或试管壁上。为了测定纤维素酶高产菌株的数量可以用_法在培养基上进行测定。(3)刚果红与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛选到了几株有透明圈的菌落。透明圈的大小与纤维素酶的_有关。(二)利用基因工程技术将突变的IPA1基因转入水稻细胞中从而获得某水稻新品种。(1)培育该转基因水稻新品种的核心是构建_，该过程需要用到的工具酶有_。本实验中常用CaCl2处理土壤农杆菌，其目的是增加其_的通透性，便于重组质粒的导入。(2)在含目的基因的水稻细胞培育成植株过程中可以将含有愈伤组织的培养物放在摇床上，通过_培养分散成单细胞。在该水稻的培养过程中，相关叙述正确的是_。A配制只含有适当营养物质的培养基，倒在灭菌试管中凝固成半固体B从灭菌的根、茎或叶上切取一些小组织块，进行培养C这种单细胞具有细胞质丰富、液泡大、细胞核大的特征D水稻体细胞与这种单细胞的全能性表达程度大不相同(3)利用水稻细胞制备原生质体时，需在0.50.6 mol/L的甘露醇溶液中进行处理，该溶液浓度与水稻细胞中的_浓度相当。5(2017“七彩阳光”新高考研究联盟)(加试题)回答下列(一)、(二)小题：(一)为从养猪场周围土壤中分离产脲酶的微生物，进行了如下实验。(1)培养基的制备：本实验需在LB固体培养基和尿素固体培养基上进行接种，因尿素_，只能用_过滤。下列对本实验选用的尿素固体培养基和LB固体培养基的叙述，错误的是()A都要进行高压蒸汽灭菌B都含有N源C都要添加琼脂糖D都要添加酚红指示剂(2)制备细菌悬液：在无菌条件下，将土样加到含有适量_的三角瓶中，振荡摇匀，并以此方法制备不同浓度的土壤稀释液。(3)接种：本实验采用的接种方法是_。(二)某研究小组利用下图所示的现代生物科学技术生产药用蛋白人组织纤溶酶原激活物(htPA)。请回答：(1)构建重组DNA分子时，通常用_切割htPA基因与载体，形成_，再通过DNA连接酶连接。(2)为获取更多的实验用受精卵，要对供卵母羊注射相应激素，使其_，获得较多的卵母细胞。采集的精子需要经过_处理，才具备受精能力。(3)若想获得更多转htPA基因母羊，还可以对含有htPA基因的胚胎进行_。然后再通过_技术可获得较多后代。(4)下列有关基因工程的叙述，正确的是()A载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达B大肠杆菌质粒是基因工程最常用的载体C若目的基因的序列是未知的，可选用PCR技术扩增目的基因DDNA连接酶催化形成氢键和磷酸二酯键的形成6(2017宁波九校高三上期末联考)(加试题)回答下列(一)、(二)小题：(一)利用紫甘薯制酒可以提高其经济附加值。请回答：(1)在工厂化生产时，为提高紫甘薯的利用率，可加入果胶酶和淀粉酶，其中果胶酶可来自_等微生物。由于酶在水溶液中不稳定，因此常将酶固定在某种介质上制成_。(2)果胶酶可将紫甘薯匀浆中的果胶水解为_。A半乳糖醛酸和葡萄糖B半乳糖和果糖C麦芽糖D半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯(3)紫甘薯匀浆流经淀粉酶柱后，取适量流出的液体，经脱色后加入KII2溶液，结果液体呈红色。表明该液体中含有_。(4)在发酵前，为使酵母菌迅速发生作用，取适量的干酵母，加入温水和_。(5)下图表示发酵液温度对酒精浓度的影响。据图判断，最佳温度是_。(二)科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有Pst 、Sma 、Hind 、Alu 等四种限制性核酸内切酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，其中是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，、表示相关结构或细胞。请据图作答：(1)在构建重组DNA时，可用一种或多种限制性核酸内切酶进行切割，为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实验中应该选用限制性核酸内切酶_分别对_、_进行切割，切割后产生的DNA片段分别为_、_种。(2)培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使重组DNA中含有_作为标记基因。(3)研究人员通常采用_法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。7(2017台州市期末)(加试题)回答下列(一)(二)小题：(一)在农村，泡菜的制作方法是：先对新鲜的蔬菜进行整理、清洁，然后放入彻底清洗并用白酒擦过的泡菜坛中，再向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”。密封后置于阴凉处，适宜环境温度为2830 。请回答：(1)用白酒擦拭泡菜坛的目的是_。(2)此过程中起主要作用的微生物是_(A.乳酸菌假丝酵母B乳酸菌醋化醋杆菌C酵母菌霉菌D酵母菌醋化醋杆菌)，这些微生物利用蔬菜中的糖类和其他物质进行发酵，产物有_等，其中也包括亚硝酸。(3)某同学想测定制作的泡菜中亚硝酸盐的含量，需要先用亚硝酸钠标准溶液绘制_，再通过测定泡菜匀浆的_进行计算。(4)若要获得优良乳酸菌菌种，纯化菌种时，更易分离得到单菌落的接种方法是_，培养时还需提供_条件。(二)干扰素是抗病毒的特效药，干扰素基因缺失的个体，免疫力严重下降。科学家设计了以下流程，利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失的患者进行基因治疗。请回答：(1)上图中进行的是_(填“体内”或“体外”)基因治疗，过程中利用的生物工程技术手段称为_。若导入的干扰素基因序列为已知，则可通过_获取。(2)ES细胞是由囊胚中的_分离出来的一类细胞，具有_性，可以将其培养成人体各种组织器官。在培养过程中常被用作饲养层细胞的一般是_。(3)下列关于上述操作中的叙述，正确的是_。A操作体现了上皮细胞具有全能性B过程可以用农杆菌转化法进行基因导入C完成基因导入的细胞就具有了合成并分泌干扰素的能力D基因治疗依据的变异原理是基因重组8(2017嘉兴市3月)(加试题)回答下列(一)、(二)小题：(一)泡菜是人们喜爱的食品，但在腌制的过程中会产生一定量的亚硝酸盐，危害人们的健康。研究人员检测了不同浓度的食盐、不同发酵阶段的泡菜中的亚硝酸盐含量，结果如下图所示。请回答：(1)制作泡菜时如希望发酵快一些，可将蔬菜放在_中浸泡1分钟后入坛。发酵坛中还可加一些白酒，加白酒的目的是增加醇香感和_。(2)据图分析，下列叙述错误的是()A腌制泡菜的最佳食盐用量约为5%B过多的食盐可能会抑制发酵作用C腌制初期泡菜的亚硝酸盐含量上升D食用泡菜最安全的是腌制后39天(3)在利用光电比色法测定泡菜亚硝酸盐含量时，在样品溶液中加入显色剂会生成_色产物。绘制标准曲线时，可以亚硝酸钠的质量为横坐标，以_为纵坐标。对样品和标准溶液的测定中，要用光程相同的_。(二)我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗，其有效成分是一种叫做乙肝表面抗原的蛋白质(S蛋白)，对应的基因为s基因。请回答：(1)在构建重组DNA分子时，要用限制性核酸内切酶处理_，并用_酶使两者结合。将重组DNA分子导入到哺乳动物细胞，经筛选得到工程细胞。(2)在细胞培养过程中，工程细胞在生长过程中有_现象，需要定期使用_酶处理，以便于分瓶培养。(3)为提高工程细胞培养的成功率，下列措施中不能采用的是()A取单个细胞进行培养B加入胰岛素C二氧化碳培养箱D加入动物血清(4)由于哺乳动物细胞培养较难，成本较高，近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”，进而从转基因动物的乳汁中提取所需产品。在这种技术中，作为重组DNA分子受体细胞的一般是_。答案精析题组特训一1(一)(1)接种环B(2)假丝酵母对氨基苯磺酸比色杯标准曲线(3)酸性(二)(1)物质的良性循环秸秆家畜粪便农作物洁净可再生的新能源开发(2)合理优化水土流失生物多样性种间关系2(一)(1)D粘合(2)半乳糖醛酸果胶甲脂活性(3)沉淀(二)(1)逆转录重组DNA分子农杆菌B(2)摇床维持渗透压解析(一)(1)果胶是由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯组成，其化学本质属于多糖。果胶起着将植物细胞粘合在一起的作用。(2)果胶酶能将果胶分解成半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯等物质，要使果汁更澄清，应同时使用果胶酶和果胶甲酯酶。用适量且浓度适宜的上述两种酶处理时，果汁的出汁率、澄清度与酶的活性高低成正相关。(3)由于果胶不溶于乙醇，故可用乙醇对果胶粗提取物(经酶处理后的混合物)进行沉淀处理，从而得到干制品。(二)(1)以mRNA为模板合成DNA的过程为逆转录过程，这一过程需要在逆转录酶的催化下进行。获得目的基因后，需在限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用下，将目的基因与载体(Ti质粒)连接形成重组DNA分子，再将其导入受体细胞。将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，先将重组DNA导入经氯化钙处理的农杆菌，再用导入目的基因的农杆菌感染植物细胞，最终将目的基因导入植物细胞内。导入目的基因的植物细胞经组织培养过程形成转基因植物。组织培养过程中，叶片在含适宜浓度的生长素的培养基上脱分化形成愈伤组织，然后在含细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽，继而在生长素含量高的培养基上生根，最后形成完整的植株，愈伤组织形成植株的过程中发生细胞的分化。(2)植物组织培养过程中，将愈伤组织等细胞置于摇床上，进行液体悬浮培养，形成多个分散的细胞。培养过程中培养液一方面为植物细胞提供营养，另一方面维持一定的渗透压，从而使叶片保持正常的形态。3(1)单菌落接种环液体限制性核酸内切酶DNA连接酶(2)消毒愈伤组织C(3)丛状苗筛选植物组织培养(4)葡糖苷酸酶(5)降低解析(1)构建含Barnase基因、葡糖苷酸酶基因和卡那霉素抗性基因的重组质粒，抗性基因是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。构建重组质粒时需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶。将菌种接种在液体培养基中需要用接种环接种。(2)幼嫩葡萄叶片需要经过消毒后切成小块，以防杂菌污染，离体植物组织或细胞在培养基中脱分化成愈伤组织。头孢霉素都有抗菌作用，用头孢霉素处理叶片小块，目的是杀灭附着在叶片上的农杆菌。(3)植物组织培养过程中包括脱分化成愈伤组织，再分化成胚状体，转移到生芽培养基中，待其长出丛壮苗再转移至生根培养基上。卡那霉素和头孢霉素都有抗菌作用，卡那霉素培养基起着筛选作用。(4)重组质粒含有Barnase基因、葡糖苷酸酶基因和卡那霉素抗性基因，因此对试管苗的葡糖苷酸酶基因的表达产物进行生化检测，就能鉴别出真正的转基因试管苗。(5)对转基因试管苗还需进行逐渐降低湿度的锻炼，防止根部细胞厌氧呼吸产生大量酒精，引起酒精中毒现象，出现烂根。4(一)(1)划线分离法或涂布分离灼烧(灭菌)处理(2)有氧(通入无菌空气或通入氧气)C2H5OHO2CH3COOHH2O(3)不能在果酒发酵旺盛时，发酵环境中无氧(4)C(二)(1)基因表达载体的构建农杆菌转化法显微注射法(2)聚乙二醇(PEG)动物细胞培养特异性强、灵敏度高，并可大量制备(3)将内细胞团均等进行分割解析(一)(1)纯化培养微生物时常采用划线分离法或涂布分离法接种；对接种工具常采用灼烧灭菌处理。(2)醋化醋杆菌是嗜氧菌和嗜温菌，因此由果酒转变成果醋的制作时，需要改变的环境条件是通入氧气和温度控制在3035 。由果酒酿制成果醋过程的总反应式为：C2H5OHO2CH3COOHH2O。(3)果酒发酵旺盛时为无氧环境，而醋化醋杆菌是嗜氧菌，因此若在果汁中含有醋化醋杆菌，在果酒发酵旺盛时，醋化醋杆菌不能将果汁中的糖发酵为醋酸。(4)在用果汁制作果酒的过程中，酵母菌除了产生酒精外，还会产生二氧化碳，二氧化碳会与水反应生成弱酸，因此发酵瓶溶液中pH减小。(二)(1)基因工程的核心是基因表达载体的构建；将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法。(2)植物体细胞杂交技术中，诱导原生质体融合的化学方法一般是聚乙二醇(PEG)作为诱导剂来诱导细胞融合；动物细胞工程中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础；动物细胞工程的一项重要应用是单克隆抗体的制备，与普通抗体相比，单克隆抗体的最主要优点是特异性强、灵敏度高，并可大量制备。(3)若对囊胚进行胚胎分割，要注意将内细胞团均等进行分割，否则影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。5(一)(1)LB固体琼脂(2)划线分离(单)菌落超净台(3)B(二)(1)蚯蚓、苍蝇、细菌(微生物)物质循环利用(2)可以充分地利用垃圾中的物质(或对物质的良性循环和多途径利用)(3)B(4)畜牧业生态和经济6(1)含目的基因的DNA片段Ti质粒CaCl2(2)纤维素酶和果胶胰蛋白酶(3)血清(4)固体培养基容易形成固定的菌落，便于进行筛选细胞分裂素母液灭菌(5)淀粉指示剂溶液红解析(1)基因工程中，构建基因表达载体需要用同一种限制性核酸内切酶对目的基因(含目的基因的DNA片段)和载体(Ti质粒)进行切割，然后用DNA连接酶进行连接。将重组DNA转入农杆菌时，需要对大肠杆菌用氯化钙处理，使其成为感受态，便于导入。(2)植物体细胞杂交过程中，先用纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁去掉，获得原生质体；动物细胞培养过程中，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，将细胞分散开来。(3)早期胚胎培养的培养液成分有：无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。(4)固体培养基容易形成固定的菌落，便于进行筛选，所以分离细菌时通常用固体培养基；植物组织培养的培养基常需添加生长素和细胞分裂素，由于不同的过程两种激素的比例不同，所以这些植物激素一般需要事先单独配制成母液保存备用。使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢掉，以防止培养物的扩散。(5)淀粉水解后，用淀粉指示剂溶液测试，流出物呈红色，表明水解产物糊精生成。7(一)(1)有氧经过滤的空气(2)D(3)甘露醇7.0高压蒸汽灭菌琼脂(二)(1)胰岛逆转录(2)相同(3)细胞壁(4)D一套遗传密码(5)细胞克隆解析(一)(1)醋化醋杆菌是需氧型细菌，所以只有在有氧条件下才能将乙醇转化为醋酸，因此需要持续往发酵瓶中通入足量的经过滤的空气。(2)底物充足条件下，醋酸发酵液在有氧条件下不断产生醋酸，使pH值不断减小，但减小到一定程度之后，会导致醋化醋杆菌无法继续产生醋酸，所以最后稳定，综上所述，选D。(3)对醋化醋杆菌进行扩大培养所需的液体培养基(1 L)配方为：蛋白胨3 g、酵母提取物5 g、甘露醇25 g和蒸馏水，并调pH至7.0，再用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。若要分离细菌，必需用固体培养基，所以应在上述的培养基中加入适量的凝固剂琼脂。(二)(1)由于胰岛素只能在胰岛细胞内表达，胰岛素基因才会转录出相应的mRNA。为了通过基因工程制取胰岛素，若采用逆转录法获得目的基因，必须先从人体胰岛细胞中获取控制人胰岛素合成的mRNA，然后在逆转录酶催化下合成人胰岛素基因。(2)构建重组DNA分子时，为了保证目的基因能与载体连接，通常需要相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体，然后用DNA连接酶使两者连接在一起。(3)为了增大大肠杆菌的细胞壁的通透性，通常使用氯化钙处理大肠杆菌。(4)如果目的基因在大肠杆菌中高效稳定表达，最简单有效的检测方法是检测培养基中胰岛素含量，所以选D。人胰岛素基因能在大肠杆菌中表达是因为人和大肠杆菌共用一套遗传密码。(5)胰岛素除了用于治疗糖尿病之外，还可以用来提高动物细胞克隆形成率。8(一)(1)涂布分离法D(2)高压蒸汽灭菌振荡(3)低噬菌体侵染炭疽杆菌，炭疽杆菌数量下降(二)(1)受精或受精作用胚胎移植(2)卵泡卵母细胞(或次级卵母细胞)(3)克隆培养法或细胞克隆A解析(一)(1)涂布分离法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。由图中四种菌落分布情况可知，A、B和C是采用涂布分离法得到的，而D是采用划线分离法得到的。(2)制备图甲中的液体培养基时应该用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，以杀死微生物及芽孢。接种可疑菌后，35 培养24小时，细菌大量繁殖，液体培养基变浑浊。(3)对照组试管中应加入等量生理盐水，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组低，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。此实验依据的原理是实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌，使细菌死亡，溶液变澄清。(二)(1)步骤甲为受精作用，步骤乙为胚胎移植。(2)卵巢经超数排卵处理后，要使用超声监视器确定卵泡的位置，插入穿刺针吸取其液体，取出卵母细胞(或次级卵母细胞)。(3)提取这个细胞进行单独培养，此种培养方法称为克隆培养法或细胞克隆。有限细胞系由于增殖能力有限(1050代)，转化细胞系具有较强的适应能力，容易克隆。题组特训二1(一)(1)琼脂(糖)(2)高压蒸汽孔径小，细菌不能滤过(3)A红色环氨(或NH3)(4)除去游离的脲酶(二)(1)果胶酶、纤维素酶(2)降低心形胚细胞分裂素D(3)原生质体融合PCR方法2(1)A灭菌涂布菌落(2)限制性核酸内切酶(3)乙醇无菌水(4)愈伤组织B(5)湿度扩增(6)花色解析(1)将目的基因导入微生物细胞需要利用钙离子处理使受体细胞变成感受态细胞。因此为了获得大量的目的基因，将其与含有抗生素抗性基因的质粒DNA形成重组DNA，再与经氯化钙处理的大肠杆菌液混合，使重组DNA进入大肠杆菌。用灭菌的玻璃刮刀将稀释后的大肠杆菌液涂布接种到含有抗生素的固体培养基上，经培养形成菌落，再进行鉴定和扩大培养。(2)基因工程的工具酶包括限制性核酸内切酶和DNA连接酶。(3)取田间矮牵牛的幼嫩叶片，经自来水冲洗，先用70%乙醇浸泡，再用5%次氯酸钠浸泡，最后用无菌水清洗，作为转基因的受体材料。(4)将消毒后的矮牵牛叶片剪成小片，在含有目的基因的农杆菌溶液中浸泡后，取出并转移至加有适当配比生长调节剂的MS培养基(含蔗糖、琼脂和抗生素，下同)上，使叶小片先脱分化形成愈伤组织。再将其转移至另一培养基诱导形成芽，芽切割后转移至MS培养基适宜浓度NAA上生根，形成完整植株。(5)取出试管苗，在适宜的光照、温度和80%以上的湿度等条件下进行炼苗。提取叶片组织的DNA，采用PCR技术扩增目的基因，鉴定目的基因是否成功导入。(6)为判断本研究是否达到预期目的，可比较转基因植株和非转基因植株的花色性状。3(1)d胰蛋白酶(或“胰酶”)饲养层抑制分化，促进生长发育全能二倍体(2)脲红色环带NH3越强涂布分离法(3)植物生长调节剂(或“植物激素”)(4)A解析(1)进行动物细胞培养要选用液体培养基，因此应选择d培养基。在进行细胞培养时，首先，将动物体内的一部分组织取出，经过机械消化或胰蛋白酶(或“胰酶”)消化，使其分散成单个的细胞。如果是培养胚胎干细胞，则首先需要在培养皿底部制备一层胚胎成纤维细胞，称为饲养层，这层细胞具有抑制分化，促进生长发育的特点。胚胎干细胞是一种未分化细胞，具有全能性和二倍体核型。(2)分离以尿素为氮源的细菌应选用以尿素为唯一氮源的培养基，因此应选择培养基b。在含有脲酶的细菌菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的NH3使pH升高，酚红指示剂产生颜色变化，变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力越强。该实验用的分离方法是涂布分离法。(3)进行植物组织培养时，需要在培养基中加入植物生长调节剂(或“植物激素”)。(4)若要用于分离以尿素为氮源的微生物，培养基中应不含其他氮源，并且培养基应为加入琼脂糖的固体培养基，因此可选择标号b作基本培养基，加上封口膜后灭菌，待冷却后加入经过G6玻璃漏斗过滤(使之无菌)的尿素溶液，摇匀待用，A错误；培养皿应该选用高压蒸汽灭菌法，B正确；超净台应该用紫外灯照射来消毒，C正确；自然生长的茎段应该用70%乙醇和5%次氯酸钠进行消毒，D正确。4(一)(1)C碳(物质)(2)固体三角漏斗涂布分离(3)数量、活性(二)(1)重组DNA分子限制性核酸内切酶、DNA连接酶细胞壁(2)液体悬浮D(3)细胞液解析(一)(1)纤维素是植物多糖，它是植物细胞壁的组成成分，即植物细胞结构组成成分。该菌株能够水解纤维素为葡萄糖，因此在生态系统中能促进碳(物质)循环。(2)用固体培养基来鉴定和分离纤维素酶高产菌株，在将培养基转移到三角瓶或试管中时必须用三角漏斗，以防止培养基沾到三角瓶壁或试管壁上。为了测定纤维素酶高产菌株的数量可以用涂布分离法在培养基上进行测定。(3)刚果红与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛选到了几株有透明圈的菌落。透明圈的大小与纤维素酶的数量、活性有关。(二)(1)基因工程的核心步骤是构建重组DNA分子，该过程首先要用同种限制性核酸内切酶切割目的基因和外源DNA分子，其次需要用DNA连接酶将目的基因与载体连接形成重组DNA分子。本实验中常用CaCl2处理土壤农杆菌，其目的是增加其细胞壁的通透性，使之成为感受态细胞，便于重组质粒的导入。(2)在含目的基因的水稻细胞培育成植株过程中可以将含有愈伤组织的培养物放在摇床上，通过液体悬浮培养分散成单细胞。配制含有适当营养物质和植物生长调节剂的培养基，A错误；从消毒的根、茎或叶上切取一些小组织块，B错误；这种单细胞具有细胞质丰富、液泡小、细胞核大的特征，C错误；水稻体细胞比这种单细胞的全能性表达程度要小，D正确。(3)利用水稻细胞制备原生质体时，需在0.50.6 mol/L的甘露醇溶液中进行处理，该溶液浓度与水稻细胞中的细胞液浓度相当，这样可以维持一定的渗透压，保持原生质体的形态。5(一)(1)加热会分解G6玻璃砂漏斗D(2)无菌水(3)涂布法(或涂布分离法)(二)(1)相同限制性核酸内切酶相同的粘性末端(2)超数排卵获能(3)胚胎分割胚胎移植(4)B解析从土壤中分离目的微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。基因工程技术的基本步骤：目的基因的获取，方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；重组DNA分子的构建，是基因工程的核心步骤，重组DNA分子包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；将目的基因导入受体细胞，根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；目的基因的