红掌课题总结(上交篇).doc

2010年课题总结红掌组织培养的研究 生物技术 金铃红掌的组织培养总结金 铃一、课题概述（一）课题研究的背景红掌（anthurium andraeanum）别名火鹤花、安祖花，是天南星科花烛属多年生附生性常绿草本植物。叶片革质，心形，颜色青翠，佛焰苞片直立开展，革质，除红色外，还有粉、白等色，色彩鲜艳，花苞亮丽，这种色彩从花期开始可维持三个多月，目前，红掌世界科研已处于较为深入的阶段，其中欧洲水平较高，亚洲次之，非洲较差。荷兰是世界上最大的红掌组培苗生产及贸易基地，每年能生产3000万枝红掌，主要销往欧洲国家。近年来，我国对高档花卉的需求迅速增加，从而加大了对红掌的需求，但由于我国花卉产业与世界先进国家相比，在生产技术、生产方式落后产业结构等许多方面都还有很大差距，我国所需要的红掌种苗大部分为进口，价格十分昂贵，少部分为国产组培生产的种苗，由于技术原因，组培苗的质量与进口组培苗相比，还有一定的差距，主要表现为种苗不整齐，花型不一致，繁殖系数低等问题。（二）相关研究的概述随着国内花卉业对红掌的不断需求，从事红掌的研究也在不断深入的研究当中，如：陶仕珍等以5种不同栽培基质培育红掌, 还对培育的红掌采用不同的施肥方案,发现施用国产复合肥和进口专用复合肥红掌幼苗生长肥效相当；朱宝琴等对红掌进行了无土盆试验，结果表明,红掌对温度极为敏感,最适生长温度为 2125,湿度保持在 80% 90%之间最好,忌强光照射，以薄肥代水浇根管理,生长好。（三）研究的现实意义随着经济水平的提高，红掌作为一种高档花卉的应用前景良好。红掌的花朵独特，佛焰苞明艳华丽，色彩丰富，极富变化，且花期长，近年来，盆栽红掌一跃成为市场较热点的高档盆花之一，国内红掌需求增长很快，但远没有达到饱和。近年来红掌的销售地区在不断扩大，特别是北方地区增长很快。因此，红掌的市场潜力很大，经济效益十分客观。（四）概念的界定我国的红掌组织培养技术及产业化生产与国际水平相差甚远，植物组织培养的愈伤组织诱导形成缓慢和组培苗褐化现象等一系列问题是阻止我国红掌的产业化发展，通过改变传统技术找出适宜红掌的更好的生产技术，从而提高组培苗的优质、优化，加速繁殖速度进行工厂化生产是红掌组织快繁培养的重要目标。二、目标与内容（一）目标对红掌不同时期培养基和培养条件进行筛选，从而提高组培苗优质优化效益。加快诱导愈伤组织形成，减少褐变现象的发生。课题结果：提供结题报告1份，发表论文1篇。（二）内容本项目课题通过对红掌的组织培养技术中的关键技术问题进行深入研究，通过组织培养在短期内获得大量幼小植株和经济有效的快速繁殖方法，这也是工厂化育苗的重要途径之一。三、课题研究的方法、过程与具体措施（你是怎样研究的课题，2000字）（一）研究的方法 选择红掌生长健壮、无病虫害植株幼嫩的叶片和饱满的叶柄作为外植体。 选择不同的消毒试剂，如用0.1%升汞溶液或用2%次氯酸钠消毒，然后用无菌水消毒4-5次，从中摸索出消毒的最佳时间和方法。 选择诱导培养基不同的配比和培养条件，比较不同的基本培养基及细胞生长激素（NAA）和细胞分裂激素（6-BA、KT）和2，4-D的配比度对红掌组培苗更强烈的刺激愈伤组织诱导形成。 诱导培养后将形成的诱导愈伤组织转入到不同处理的培养基上，筛选出对愈伤组织芽诱导的影响的最佳培养基配方，对比观察不同来源原球茎分化率是否相同。 增殖培养基的选择要调整激素的配比和比例，选用不同激素配比组合对不定芽增殖的影响。 选择分化后的小苗作为培养物，移栽到生根培养基中，基本培养基采用1/2 MS、MS，设定不同的激素配比。 （二）课题研究的具体措施与做法切取红掌的不完全展开叶片或刚展开的幼嫩叶，用流水冲洗1-2 h, 将叶柄、叶片置于75%酒精中浸没，摸索不同的消毒时间，用无菌水冲洗3-5次后,置于无菌滤纸上吸干表面水分。将嫩叶叶柄切成510 mm的切段,叶片切成1 cm1 cm的小块,接种于培养基中，每个组合接种10瓶,（叶柄、叶片个五瓶）每瓶3个相同的外植体,蔗糖30g/L,琼脂7g/L, pH调至5. 6,接种后先置于弱光下培养,等到形成愈伤组织时转置光下培养,培养温度(242),光强1500 Lx,光照时间12 h/d,定期观察外植体, 50 d后调查愈伤组织的诱导率.表一 酒精灭菌不同时间对叶片成活率的影响处理灭菌时间接种个数污染个数成活个数污染率%成活率%叶片长势120s120804066.733.3正常230s120301052587.5正常350s12030462538.3干边表二 不同激素配比组合对愈伤组织形成的影响处理激素配比mg/L接种个数愈伤组织形成个数愈伤组织发生率%1MS+6-BA1.0mg/L+2，4-D0.02mg/L309302MS+6-BA1.0mg/L +2，4-D0.05mg/L3016533MS+6-BA1.0mg/L +2，4-D0.15mg/L3019634MS +6-BA1.0mg/L +2，4-D0.20mg/L302377表三 不同激素配比组合对愈伤组织芽诱导的影响。处理激素配比mg/L接种个数出芽时间d出芽个数出芽率%植株长势1MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D0.2mg/L30302170弱2MS+6-BA2.0mg/L+NAA 0.2mg/L30351963弱3MS+6-BA 3.0mg/L+NAA0.2mg/L30301653弱4MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L3045826壮5MS+6-BA 1.5mg/L+KT 1.0mg/L3072790壮四、课题研究的结果与结论（一）酒精灭菌不同时间对叶片成活率的影响 表一试验结果表明，灭菌时间为30s的处理，成活率高达87.5%，污染率仅为25%，明显优于其他处理，而且接种后愈伤组织形成快，长势好。因此，红掌叶片75%酒精灭菌时间以浸泡30s为最佳。（二）不同激素配比组合对愈伤组织形成的影响 表二试验结果表明，在6-BA浓度一定的情况下，随2，4-D浓度的增加，愈伤组织也有增加的趋势。处理1形成的愈伤组织分散，浅黄色，成活率低；处理2产生的愈伤组织很少，形成的愈伤组织个体过于紧密；处理3和处理4愈伤组织形成得较早，数量多，个体大，呈颗粒状，但以处理4即6-BA1.0mg/L+2，4-D 0.2mg/L诱导效果最好，诱导率可达到77%。（三）不同激素配比组合对愈伤组织芽诱导的影响。 表三的试验结果表明，处理5产生不定芽较早，7d左右可产生芽点，出芽率可达90%，且形成的幼苗颜色绿，生长健壮；其他处理形成不定芽较晚，需3045d，出芽率低，幼苗细弱，长势差。因此，愈伤组织芽诱导以处理5即6-BA1.5mg/L+KT1.0mg/L为最佳。五、问题与讨论在此之前进行的摸索试验中3次失败，分析原因其一，灭菌工作没有准备充分，致使外植体没有灭菌成功，而使外植体在培养基中长到3-5天时出现菌群，使外植体染菌而死,导致试验失败;其二，由于培养基在灭菌中失败，而培养基本身带菌，致使接种后的外植体感染菌群而使试验失败；其三，在人为的转接外植体过程中而操作疏忽致使的外植体带菌而使试验失败等。