（浙江专用）高考生物二轮复习 专题八 现代生物科技专题 第1讲 基因工程和克隆技术课件.ppt

第1讲基因工程和克隆技术 专题八现代生物科技专题 2016高考导航 专题八现代生物科技专题 专题八现代生物科技专题 1 基因工程的工具 1 限制性核酸内切酶 来源 主要从原核生物中分离纯化出来 作用a b 结果 产生 特异性识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列 切割两个核苷酸之间的化学键 粘性末端 2 DNA连接酶作用 将具有 的两个DNA片段连接在一起 3 质粒 从存在位置看 在细菌中独立于拟核之外 从化学成分上看 为双链环状DNA分子 从功能上看 能自主复制 从结构上看 常含有抗生素抗性基因 相同粘性末端 基因文库 较小基因 逆转录酶 3 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化 Ca2 4 筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达 筛选 用含 的培养基培养受体细胞 选择含 的受体细胞 表达 目的基因在宿主细胞内表达产生人们需要的 抗生素 重组质粒 功能物质 3 几种重要的克隆技术分析 1 植物细胞培养 器官培养和原生质体培养的关系 愈伤组织 器官 单个细胞 除去细胞壁 机械消化或胰蛋白酶消化 原代 传代 细胞系 单个细胞 血清 滋养细胞 仙台病毒或聚乙二醇 5 动物的克隆繁殖 命题点1基因工程及转基因技术的安全性 目的基因的获取 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 农杆菌转化法 细胞质 染色体DNA T DNA片段 内部 植物组织培养 粘性 磷酸二酯键 1 目的基因应插入启动子与终止子之间的部位 2 将目的基因导入受体细胞没有碱基互补配对现象 3 原核生物作为受体细胞的优点 繁殖快 多为单细胞 遗传物质相对较少等 4 一般情况下 用同一种限制酶切割质粒和含有目的基因的片段 但有时可用两种限制酶分别切割质粒和目的基因 以避免质粒和质粒之间 目的基因和目的基因之间的连接 5 标记基因的作用 筛选 检测目的基因是否导入受体细胞 6 受体细胞常用植物受精卵或体细胞 经组织培养 动物受精卵 一般不用体细胞 微生物 大肠杆菌 酵母菌 等 7 启动子 DNA片段 起始密码子 RNA 终止子 DNA片段 终止密码子 RNA 限制酶 DNA连接酶 Ca2 感受 重组质粒和感受态细胞 脱分化 再分化 卡那霉素 显微注射 动物体细胞的全能性一般不能表现 性别鉴定 逆转录 限制酶 BamH 和Pst 经研究发现 如果将该凝乳酶的第20位和24位氨基酸变为半胱氨酸 则其催化能力将提高2倍 现已知通过蛋白质工程可生产高效凝乳酶 请写出有关制备步骤 找到相对应的脱氧核苷酸序列 定向改造凝乳酶基因 将改造后的凝乳酶基因导入受体细胞等 答案合理即可 命题点2克隆技术 流动性 获能 减数第二次分裂中期 促性腺激素 细胞壁 纤维素酶和果胶 离心 振动 电刺激 形成了新的细胞壁 植物组织培养 生长素 杂交瘤 特异性抗体 选择 3 1 答题时不能混用的两种细胞 重组细胞和杂交细胞 1 重组细胞 体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞之后形成的细胞叫重组细胞 2 杂交细胞 动物细胞融合形成的细胞常称为杂交细胞 2 明确单克隆抗体制备过程中的两次筛选第一次筛选 利用特定选择培养基筛选 获得杂交瘤细胞 即AB型细胞 A为效应B细胞 B为骨髓瘤细胞 不需要A B AA BB型细胞 第二次筛选 利用多孔板法和抗原 抗体杂交法筛选 获得产生特定抗体的杂交瘤细胞 植物组织培养 植物细胞的全能性 细胞分裂素 生长素 灭菌 愈伤组织 胚状体 农杆菌转化 灰 胚胎移植 冷冻 低温 液氮 内细胞团 体 乳腺 高度分化的动物细胞的细胞核具有全能性 药物生产 答案合理即可 优良种畜的培育与扩大 治疗性克隆 拯救濒危动物 答案合理 不与前一空答案重复即可 骨髓瘤细胞 抗原刺激过的B细胞 或效应B细胞 杂交瘤细胞 2 过程类似于植物组织培养技术中的 过程 与纤维母细胞相比 诱导干细胞的全能性较 过程的实质是 3 生产单克隆抗体一般不直接培养效应B细胞 主要原因是 脱分化 高 基因的选择性表达 效应B细胞高度分化 不能无限 或大量 增殖 4 处需要筛选 从而得到 细胞 且培养该细胞的气体环境为 能产生特异性抗体的杂交瘤 95 的空气 5 的CO2