实验5酪蛋白的制备.ppt

实验十酪蛋白的制备 一 目的要求学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和方法 二 原理牛奶含有半乳糖 蛋白质 脂肪成份 蛋白质中的酪蛋白通过等电点沉淀 再通过离心而获得 糖类小分子由于处于清液中而分离 沉淀物中所含的脂肪通过有机溶剂抽提而去除 最终得到纯白色 晶状酪蛋白 三 试剂与器材试剂 0 2mol LHAc Nabuffer 95 乙醇 乙醚器材 离心机 水浴锅 pH计 10mL牛奶预热调pH至4 7室温冷却离心得沉淀于离心管内悬浮离心得沉淀于离心管内去脂肪漏斗过滤滤干洗涤洗涤 脂肪完毕 带滤纸烘干称重计算 40 C 40 C预热的醋酸buffer10mL 边加边搅拌 5000r min5min 4mLH2O 5000r min5min 20mL乙醇 5min 20mL乙醇微搅动 20mL乙醇乙醚混合液 1 1 20mL乙醚 60 C 4h 四 操作方法 五 计算实际获得百分率 100 六 注意事项1 牛奶与缓冲液要预热2 缓冲液要缓加缓搅3 在滤纸上样品的脱脂过程要搅动 不得破滤纸4 实验环境要保持空气流通 门窗要开 酪蛋白质量 g 10mL牛奶 七 思考题1 在酪蛋白制备时为什么要用醋酸缓冲液调pH到4 8 2 乙醚 乙醇作用是什么