药理论文(蒲公英).doc

药理实验报告姓名：欧小勤学号：2007154195班级：07级1班 2010年7月17日 蒲公英颗粒的抗炎作用研究1、 实验目的：1、学习用致炎剂使动物实验急性炎症的方法。2、观察蒲公英颗粒的抗炎作用。2、 实验原理： 二甲苯是一种有机溶剂，具有强烈的化学刺激性，涂擦于小鼠耳部皮肤，造成组织损伤，致炎物质释放，引起接触部位释放组织胺、缓激肽及纤维蛋白溶解酶等致炎物质，使局部毛细血管通透性增加、白细胞浸润，而致急性炎症反应。氢化可的松、伸筋草具有抗炎作用可抑制炎症反应。本实验选用二甲苯刺激小鼠耳部皮肤，制作出急性炎症的病理模型来观察药物对炎性水肿的抑制作用。 三、实验材料：动物：小鼠40只药品与试剂：二甲苯，蒲公英颗粒溶液，生理盐水，氢化可的松器材：钟罩3个，打孔器（直径9mm）,天平，注射器（1ml）6支，5号针头6支，粗剪刀，大塑料烧杯2个。四、实验方法：1.配置溶液 利用蒲公英颗粒分别配置成17.5、35、52.5三个浓度的溶液，然后再配置生理盐水，再配置0.5的氢化可的松。2.对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响：取小鼠40只，雌雄各半，随机分为5组。阴性对照组给予0.2 mL10g生理盐水，蒲公英提取物低、中、高剂量组都是给予蒲公英颗粒溶液0.2 mL10g，继续给药2天半，阳性对照组1次性皮下注射给予氢化可的松0.1 mL10g末次给药后1小时，将二甲苯涂于小鼠右耳廓两面致炎，左耳不涂为对照，15分钟后将小鼠麻醉处死，剪下双耳，用直径9mm的打孔器分别在同一部位打下圆耳片，称重，计算肿胀度(肿胀度=右耳片重一左耳片重)。 五、结果记录：表1：各试剂对小鼠耳肿胀度的影响（, xs, n=8）肿胀度阳性对照组39.1511.07*阴性对照组9.478.72#低剂量34.577.48#中剂量23.117.11* #&高剂量31.8813.39# 注：与阴性对照组比较*P0.01 与阳性对照组比较#P0.05;#P0.01 与低剂量组比较&P0.05六、讨论 在药店里蒲公英颗粒主要的功效是清热解毒，用于感冒等一般的小病，然后我们就采用了蒲公英颗粒配置成溶液连续给小鼠以灌胃的方式灌了三天，其过程中发现，小鼠也是承受不起高浓度的蒲公英，而三天后的结果也发现，蒲公英具有一定的抗炎作用，但是远远没有氢化可的松的抗炎作用强，在实际操作中，也会出现误差，比如灌胃的不同的人会有不同的熟练程度，灌得不好会影响给药的剂量；而在剪耳朵打洞的时候也会因为是不同的人用了不同的仪器也会出现误差，还有的人甚至可能会出现打出的耳朵不是完整的而严重影响结果。所以，分工是很重要的，应该每个人都是干单一的固定的活，比如说，专门一个人剪耳朵，一个人打耳朵，这样出现的误差会相对小些。 叶酸的镇痛作用研究模型一、热板法1、 实验目的：1、学习镇痛实验热板法及筛选镇痛药的实验方法。2、观察镇痛药的镇痛作用，并联系其临床应用。2、 实验原理： 人们已知叶酸是维持人体健康所必须的物质，国外研究人员发现，叶酸可引发癌细胞凋亡，对癌细胞的基因表达有一定影响，故属于一种天然抗癌维生素。经研究还发现叶酸可作为精神分裂症病人的辅助治疗剂，它对此病有显著的缓解作用。此外，叶酸还可用于治疗慢性萎缩性胃炎、抑制支气管鳞状转化以及防治因高同型半胱氨酸血症引起的冠状动脉硬化症、心肌损伤与心肌梗塞等，热板法是利用小鼠的足底无毛，皮肤裸露，利用水温板54+0.5摄氏度为热刺激，引起小鼠疼痛，表现为舔后足、踢后腿或跳跃等反应。以舔后足所需时间为疼痛指标，测出生理盐水组、对照组、给药组的痛阈值进行比较。三、实验材料：动物：雌性小白鼠40只药品与试剂：0.018、0.036、0.072叶酸溶液、生理盐水、阿司匹林1器材：智能热板仪，天平，注射器（1mL）6支，灌胃针头6个，钟罩3个，大塑料烧杯3个，镊子2个四、实验方法：1.预选动物：预选530s内有痛反应的小鼠。将小鼠置于热板仪内，温度540.5，测定小鼠的痛阈值，测1次，以小鼠舔后足作为观察指标。2.分组及给药：取预选合格的小鼠40只，随机分为5组每8只并称重。第一组:生理盐水0.2ml/10g体重（灌胃给药）；第二组:0.1%阿司匹林0.33ml/10g体重（灌胃给药）；第三组:0.018叶酸溶液0.2ml/10g体重（灌胃给药）；第四组: 0.036叶酸溶液0.2ml/10g体重（灌胃给药）；第五组:0.072叶酸溶液0.2ml/10g体重（灌胃给药）；并记录给药时间。五、结果记录：表1：各试剂对小鼠舔足潜伏期的影响（s , xs, n=8）给药后10min给药后30min给药后60min给药后100min阴性对照组35.9520.1647.4224.5261.6226.8580.8539.71阳性对照组50.5829.8188.1949.10134.72103.40*190.33154.89*0.018叶酸溶液46.9733.77102.8251.77242.07154.42143.8788.620.036叶酸溶液 60.5658.74 145.78107.21 248.47229.37 98.40111.860.072叶酸溶液 21.4822.16 60.9956.00 59.1926.61 46.2431.42#注：与阴性对照组做比较* P0.05 与阳性对照组做比较# P0.05模型二、化学刺激法1、 实验目的：1、观察叶酸的镇痛作用2、熟悉化学刺激法的操作方法2、 实验原理：许多化学物质如强酸、强碱、钾离子、缓激肽等，接触到完整的皮肤和粘膜时，即引起疼痛反应。因此，将某些化学物质给入动物体内可产生疼痛，造成疼痛模型，作为研究疼痛生理及筛选镇痛药物的方法。小白鼠扭体法是筛选镇痛药的常用方法之一，采用一些化学刺激物注入小鼠腹腔内，引起深部的、大面积而较持久的疼痛刺激，致使小白鼠产生“扭体”反应（腹部内凹、躯干与后腿伸张、臀部高起）。观察给予化学刺激药物15分钟内发生“扭体”反应的小白鼠或各小白鼠发生的“扭体”次数，将给药组与对照组相比，若使扭体反应发生率减少50%以上的，可认为有镇痛作用。常用致痛剂如：酒石酸蒂钾、醋酸等。化学刺激法是筛选非麻醉性镇痛药的常用方法。3、 实验材料：动物：小白鼠24只药品与试剂： 0.036叶酸溶液、1%醋酸溶液（制痛化学药物）、生理盐水、阿司匹林1器材：架盘天平、灌胃针、注射器（1mL）6支、镊子2个四、实验方法1.分组及给药：取小鼠24只，随机分为3组每组8只并称重。第一组：生理盐水0.2ml/10g体重（灌胃给药）；第二组：1%阿司匹林0.33ml/10g体重（灌胃给药）；第三组：0.036叶酸0.2ml/10g体重（灌胃给药）；并记录给药时间。2. 30min时每鼠再由腹腔注射1%醋酸溶液0.2ml/10g，观察15分钟内各组出现扭体反应的小白鼠数量。5、 实验结果 表2：各试剂对小鼠扭体次数的影响（xs, n=8）扭体次数阳性对照组27.883.87阴性对照组10.752.66*0.036叶酸16.381.06* # 注：与阴性对照组做比较* P0.01 与阳性对照组做比较#P0.01六、讨论 叶酸是一种维生素，一般使用在孕妇的围孕期，以防止神经管畸形胎儿的出现，同时还有预防贫血。但是美国癌症协会与世界癌症研究基金会研究统计发现摄取叶酸量高者得胰肝癌的机会降低，同时，FDA也强制食品业者在谷物中添加叶酸可能癌症业有保护的效果。所以我们根据以上的资料想要研究一下叶酸是否具有镇痛的作用，而从以上热板法的结果可显示：给予阿司匹林后痛阈值提高了，而且是一直在提高，给予叶酸的小鼠痛阈值也在提高，但是在60分钟后竟然又在降低,而且不同浓度的对应痛阈值是不一样的，我们的结果是0.036的叶酸痛阈值是比较高的，浓度再高或再低痛阈值都会降低。因此，我们用0.036的叶酸又做了化学刺激法的实验，结果也证明了，叶酸具有一定的镇痛作用，但是，效果不持久，药效大概只维持半个小时。而对于实验过程中，操作也会对结果又一定的影响，化学刺激法中，不要把小鼠放在冰凉的地面上，否则效果不明显。