右归胶囊改善慢性肾衰竭大鼠肾功能的实验研究.doc

右归胶囊改善慢性肾衰竭大鼠肾功能的实验研究邱模炎1，姜岳2，孙慧1（中国中医科学院望京医院，北京 100102）摘要：目的观察右归对实验性慢性肾衰竭大鼠肾功能的影响。方法采用“单肾切除加腺嘌呤灌胃法”建立大鼠慢性肾衰竭模型。治疗组予右归灌胃，对照组予尿毒清溶液灌胃。每周测24h尿蛋白定量1次，给药4周后处死取血测SCr、BUN、血钙、血磷、红细胞计数、血红蛋白含量，并测大鼠单侧肾重、单侧肾重/体重103。结果右归组在24h尿蛋白量、SCr、BUN、血磷、血钙、血红蛋白等方面的作用与模型组对比，P 0.05。右归胶囊能够改善大鼠整体状况、降低24h尿蛋白量、改善肾功能、缓解肾性贫血。结论右归胶囊对单侧肾切除后腺嘌呤性慢性衰竭大鼠的肾功能具有一定的改善作用。关键词：右归胶囊 慢性肾衰竭 大鼠目前对中药研究越来越多，中药治疗效果以其使用安全而受到广泛关注。在慢性肾衰竭的治疗上，中医中药的运用被广泛使用。右归胶囊是可以防止免疫过强和炎症反应，抑制细胞和机体脂质过氧化，从而能够抑制肾病的发生；同时还可抗凝、抗血栓、改善血液流变学，从而可以预防肾病进展，改善慢性肾功能不全的症状。1实验材料1.1实验动物Wistar雄性健康大鼠65只，6周龄，清洁级，体重20020g，由中国医学科学院实验动物研究所提供（合格证号：SCXR京：20050013）。1.2实验药物1.2.1造模药物：腺嘌呤，购自北京化学试剂公司，用前将其加入蒸馏水中配制成20mg/ml的混悬液。1.2.2治疗药物：右归胶囊，江西银涛药业有限公司生产，批号20100305。根据文献2的方法，取正常人60kg体重用药剂量的7倍为大鼠剂量，人用剂量为10g/60kg，则每100g大鼠每日剂量为：0.17g。1.2.3阳性对照药物：尿毒清颗粒由广州康臣药业有限公司生产，批号：20100207。根据文献3，大鼠使用尿毒清的剂量为3.75g/kg。将尿毒清颗粒以蒸馏水配制成含药量为375mg/ml的溶液。2实验方法2.1模型制作方法：采用“单肾切除加腺嘌呤灌胃法”建立大鼠慢性肾衰竭模型4。大鼠行左肾切除术1周后，每天以200mgkg1d1剂量的腺嘌呤混悬液灌胃造模，连续28天。2.2随机分组方法：55只大鼠根据体重按随机数字表法随机抽取10只作为正常组，10只作为假手术组，35只行左肾全切术。术中及术后1周死亡大鼠5只，术后1周，将存活的30只大鼠根据体重按随机数字表法随机分为模型组、右归组、尿毒清组各10只。2.3给药方法：正常组、假手术组、模型组：于分组当天开始每天灌胃2ml蒸馏水，直至第28天。治疗各组于术后分组当天开始，每天灌胃直至第28天。尿毒清组按3.75gkg1d1的剂量给尿毒清溶液，右归组按1.7gkg1d1的剂量给右归胶囊溶液。2.4观察指标2.4.1一般情况：体重、大便、体毛、毛泽、精神状态、活动状况、摄食量、饮水量。2.4.2 24h尿量及24h尿蛋白定量：实验分组后每隔7天将大鼠分置于代谢笼内留取24h尿液，记录24h尿量，并用考马斯亮蓝法测24h尿蛋白定量。2.4.3血常规和血生化：给药4周后，从股动脉抽取血样测红细胞、血红蛋白；血肌酐、尿素氮、血钙、血磷。3结果3.1一般情况右归胶囊组：体重亦有下降，于造模给药第12天左右开始出现多饮少食，精神萎靡,反应迟钝，畏寒喜静，蜷缩好卧，拱背，毛色干枯发黄出现脱落，耳廓和口唇眼鼻粘膜苍白，其症状表现均较模型组为轻，但不如正常组、假手术组大鼠健康。3.2 24h尿蛋白定量变化情况治疗后第2周，模型组、尿毒清组大鼠的24h尿蛋白量比正常组显著增加，P0.05；而各治疗组大鼠的24h尿蛋白量较模型组显著减少，P0.05；右归组大鼠的24h尿蛋白较尿毒清组显著减少，P0.05。治疗后第3周，模型组、尿毒清组大鼠的24h尿蛋白量比正常组显著增加，P0.05；而各治疗组大鼠的24h尿蛋白量较模型组显著减少，P0.05；右归组大鼠的24h尿蛋白较尿毒清组显著减少，P0.05。治疗后第4周，模型组和各治疗组大鼠的24h尿蛋白量比正常组显著增加，P0.05；而各治疗组大鼠的24h尿蛋白量较模型组显著减少，P0.05。表43 24h尿蛋白定量变化表（单位：24hmg）组别第1周第2周第3周第4周n24h尿蛋白n24h尿蛋白n24h尿蛋白n24h尿蛋白正常组1073.8822.291057.0228.481058.623.771060.8318.87假手术组1069.2021.321053.5711.941056.9417.931053.984.53模型组1088.4733.8810112.3720.35*10100.1639.29*9134.3715.79*尿毒清组1077.4723.831090.2027.02*1080.1023.60*784.8813.41*右归组1070.2419.961064.0421.361059.2719.05778.2511.19*注：与正常组比较，*P0.05；与模型组比较，P0.05；与尿毒清组比较，P0.05。以下各表同注。3.3血清肌酐、尿素氮、钙、磷的情况治疗各组SCr较模型组显著降低，P0.05，无统计学意义；尿毒清组、右归组BUN比模型组显著降低，P0.05，无统计学意义；模型组血钙较正常组显著降低，P0.05，右归组血钙比模型组升高，P0.05；模型组血磷较正常组显著升高，P0.05，治疗各组血磷较模型组显著降低，P0.05，无统计学意义。见表4-4表4-4血液生化检查比较表组别NSCr（mol/L）BUN(mmol/L)Ca2+(mmol/L)P3+(m mol/L)正常组1065.9811.026.710.42.350.121.340.14假手术组1066.9511.397.641.212.460.301.320.13模型组6251.3342.78*35.5812.9*2.160.03*1.540.11*尿毒清组6208.2838.70*26.194.69*2.250.011.390.08右归组7210.9920.98*25.884.88*2.450.071.380.103.4红细胞计数、血红蛋白含量情况血液红细胞计数、血红蛋白含量结果显示：模型组的红细胞计数比正常组明显降低，P0.05；尿毒清组、右组红细胞计数比模型组显著升高，P0.05，无统计学意义；模型组及治疗各组血红蛋白含量比正常组显著降低，P0.05，治疗各组血红蛋白含量比模型组显著升高，P0.05，无统计学意义。见表4-5表4-5红细胞计数、血红蛋白含量比较表组别nRBC计数(109/L)HGB（g/L）正常组106.190.32142.2014.70假手术组106.090.19149.405.23模型组65.530.31*93.175.85*尿毒清组66.150.23109.334.08*右归组76.070.30112.144.22*4讨论本实验研究发现右归有改善大鼠一般状况的作用，还有减少24h尿蛋白量、降低BUN和SCr水平、升高血钙、降低血磷、改善贫血状态等作用。胡秀芳通过实验证实大、中剂量右归的利尿作用强于氢氯噻嗪，且作用时间较后者持久；还发现右归可提高Wistar大鼠的肾小球滤过率5。Yokozawa等人研究发现右归可以显著降低5/6肾切除大鼠的BUN、SCr和尿蛋白，促进SCr的清除，从而延缓残留肾向肾衰竭发展的进程。并且还发现右归可以抑制甲基胍的产生，从而防止尿毒症的发生。右归因为可以防止免疫过强和炎症反应，抑制细胞和机体脂质过氧化，从而能够抑制肾病的发生；同时右归还可抗凝、抗血栓、改善血液流变学，从而可以预防肾病进展，改善慢性肾功能不全的症状6。在临床研究中，观察到慢性肾衰竭患者用右归治疗后，SOD活性明显升高，血尿素氮和血肌酐均有降低，肾功能得到明显改善7。Manabu等1研究表明右归可改善慢性肾衰竭的症状。可见右归可减缓腺嘌呤所致CRF大鼠肾功能恶化，从而起到预防、延缓慢性肾衰竭的发展和肾脏保护作用。右归在防治早期慢性肾衰竭方面具有广泛的运用前景，对其防治慢性肾衰竭的机制还需要进一步研究。参 考 文 献1 Manabu N, Nobuyuki A, Mujo K.Fragrance J, 1997，25（4）：41.2贲长恩主编.医学科研基本思路方法与科研程序.北京：科学出版社，2003：161.3邓虹珠，陈志良，石兴华，等.中药尿毒清冲剂治疗大鼠慢性肾衰的实验观察.第一军医大学学报，1993，13（1）：611.4杨贤强.右归丸妙用.，1996，22（3）：42.5胡秀芳.右归丸对肾病的药效及其机理研究：博士论文.杭州：浙江大学，2001.6晏双利，杨贤强.右归丸的临床运用，2005，26（1）：70.7郑颜萍，陈裕盛，陈文，等.右归丸对慢性肾功能不全抗脂质过氧化损伤.中华肾脏病杂志，1999，15（4）：256257.