Nextseq500简易操作流程.doc

Nextseq500简易操作流程1、 开机 打开电源开关切换到I(on)的位置，按下试剂室上方的电源按钮后开机 2、 关机1.点击界面上的Manage Instrument按钮2.选择 System Power Options3.点击关机安全关机的方式应先关闭电脑软件再关闭电源，再次打开仪器时需等待至少60s注意：仪器放置后不要随便移动，移动机器可能会影响其光线的校准和破坏数据的完整性，如果需要重新移动仪器，需要联系Illumina公司相关技术人员。三、测序工作流程 变性和稀释文库将处理好的文库加到试剂盒10号样品孔里从软件界面,选择序列开始运行设置 步骤检查运行参数和自动检查的结果，确认后开始 测序完成后仪器维护清洗 数据分析处理 载入flow cell使用Illumina BaseSpace进行配置根据实验需要选择合适的试剂盒将试剂室清空，加入buffer和试剂盒 试剂盒准备取出保存在-20中的试剂盒，室温水浴60min后将试剂盒表面的水擦干，注 意水浴过程中不要浸没试剂盒；（或将试剂盒放在2-8融化过夜，至少需要18h融化，在2-8下，试剂能稳定使用一周）轻轻来回摇晃5次混匀试剂盒；检查29,30,31和32孔，确定试剂都已经融化完全；轻敲桌面排除气泡。注意：试剂盒中含有甲酰胺，具有一定的毒性，注意不要吸入、摄取、皮肤和眼睛接触到，实验时注意穿好防护措施，包括防护镜、手套和实验服，处理使用过的试剂时应严格按照政府规定的安全标准。Flow Cell准备取出保存在2-8的Flow Cell，在室温下放置30min后拆开铝箔包，打开透明塑料翻盖包后取出Flow Cell。 用沾有少量的低棉絮酒精棉轻轻擦拭Flow Cell,并用低棉絮擦干剩余酒精。注意：使用前确保Flow Cell未破损； 确保端口垫圈和白色塑料的帖子完好无损。 确保四个白色固定夹卡在黑色承板的边缘，如果发现承板在夹子下不 安全，轻轻一起按下黑色承板和白色框架直到板卡在夹子上。 确保4个金属弹簧夹平对黑色的承板。A. 端口垫圈B. 固定夹C. 弹簧夹D. 白色框架E. 承板 文库加载到试剂盒 用低棉絮酒精棉将试剂盒上的#10 labeled Load Library Here擦干净，并用 1ml移液枪冲洗金属箔片； 将文库加入到#10 labeled Load Library Here，分散文库时注意不要碰到 金属箔片。