Agilent-GCMS培训(完整版330页).ppt

AgilentGCMS化学工作站操作培训 2020年2月20日 第一章气相色谱 质谱基础 3 主要内容 MS和GC检测器的对比MS的基本理论 4 5973MSD和6890GC 5975BMSD和6890GC 安捷伦GC MS产品线的演变 5975CMSD和7890GC 5 INTERFACE GC MSD 10 5Torr 2mL min 760Torr 0 5 15mL min 传输线 6 气相色谱和质谱的联用技术 传输线 传输线 涡轮泵 自动进样器 离子源 炉箱 7 色谱柱 流量控制器 稳压器 空气 氢气 载气 分子筛 脱水管 固定 进样口 检测器 电子部件 PC 限流器 典型的气相色谱 8 分子筛P N5060 9084 捕氧管P NIOT 2 HP 1 8 铜环P N5180 4196 勿泄露 气路连接 主供气开关法阀 二级减压阀 9 载气和检测器支持气 10 氧气捕集器微量的氧气会破坏色谱柱 特别是对毛细管柱 氧气也会降低ECD检测器的功能 氧气捕集器应连接在分子筛干燥器和仪器设备的进样口之间 分子筛干燥器 11 须使用GC专用铜管或不锈钢管 塑料管会渗透O2和其它污染物 还可能会释放其它可被检测到的干扰物 管子使用前先用溶剂冲洗 载气吹干 根据工厂的推荐更换过滤器 以防止发生气体的污染 每隔一定时间 应对所有外加接头进检漏 大约每隔4 6个月 管路和净化器 12 载气必须通过控制形成恒定的压力和恒定的流量 上下游控制器压差保持1公斤以上 减压阀和流量控制器 13 保留时间用于确定样品组分 即进行样品定性分析 峰面积用于测定样品的含量 即定量分析 典型色谱图 14 柱长 米 I D mm 5 10 2 4 5 100 530 5 100 1 25 填充柱 530系列柱 细孔径柱 填充柱 开管柱 毛细管柱 壁涂 开管柱 色谱柱类型 Agilent7890A前视图 15 检测器盖 检测器 进样口 阀 显示屏 键盘 电源开关 炉箱开关 Agilent7890A后视图 16 炉箱排气出口 进样口和检测器出口 气路连接口 电缆连接口 电源连接口 炉箱冷却风进口 Agilent7890A键盘介绍 17 运行按键 气相部件按键 数字按键 信息按键 方法存储和自动运行按键 维护按键 18 AgilentGC6890前视图 19 AgilentGC6890侧后视图 20 即时功能键功能键快捷键信息键数字键多功能键方法存贮与自动运行 AgilentGC6890键盘介绍 21 质谱基础 22 质谱常用术语 丰度质荷比 M Z 基峰分子离子碎片离子偶电子离子奇电子离子 23 常见元素同位素表 24 离子源 离子源 传输线 25 推斥极 电子电离 EI 26 电离技术简介 为了得到分子离子峰 采用了一些 软电离 技术 化学电离 CI 快原子轰击 FAB 场电离与场解析 FI FD 电喷雾电离 ESI 大气压化学电离 APCI 这些电离方式与EI方式不同 它们共同之处在于电离时所需的能量比较低 因而不容易导致分子离子继续断裂 27 四极杆 28 四级杆 检测器离子聚焦 高能打拿极 电子倍增器 电子 正离子 信号输出 高能打拿极和电子倍增器 29 0to 3000V IncomingIon X RayLens 0to218V SignalOut EMVoltage 电子倍增器 电压有使用上限 3000伏 电压的提高 可以提高检测器的信号 30 电子倍增器的寿命曲线 31 提供足够的平均自由程提供无碰撞的离子轨道减少离子 分子反应减少背景干扰延长灯丝寿命消除放电增加灵敏度 为什么MS需要真空 32 总离子流色谱 33 气质联用数据是三维的 34 仪器内部连接示意图 35 第二章ChemStation简介与开机关机的介绍 36 远程开机 系统硬件浏览 网络化的 LAN 集线器 LAN LAN 37 进入工作站仪器控制窗口 用于编辑和运行方法 序列 设定工作站控制级别等 界面切换通过功能键 视图 38 39 调谐和真空控制窗口 40 用于数据后处理 积分 本底扣除 谱库检索 定量分析等 数据分析窗口 41 ChemStation文件夹 42 放气阀须关好MSD连接到接地的电源上MSD的接口伸入柱温箱老化好的毛细柱接好两端99 999 的氦载气接到GC上 推荐使用净化器 开机前的准备 5975的放气阀位置 5973的放气阀位置 43 597XMSD开机顺序 打开计算机打开气相色谱及597X质谱电源 待气相色谱完成自检 597X质谱真空泵工作正常 如果机械泵声音不正常 检查侧门和放空阀是否关闭 进入工作站 44 系统开机 或者 45 系统放空 关机 46 系统放空 续 5973的放气阀位置 5975开盖装置 47 质谱的本地控制面板 诊断放空 抽真空调谐运行 停止 48 第三章调谐 49 主要内容 MS调谐的基本原理化学工作站中的不同调谐 50 调谐做什么 设定离子源部件的电压 以得到良好的灵敏度设定amugain和amuoffset以得到正确峰宽设定massgain和massoffset以保证正确的质量分配设定EM电压 51 稳定可挥发碎片涵盖质量范围宽仅有C 13和N 15同位素无质量缺陷 全氟三丁胺 PFTBA 调谐标样 52 AMUgain offset 高能打拿极 电子倍增器 入口透镜 推斥极 离子化区域 样品入口 灯丝 灯丝 拉出极 离子聚焦 Massaxisgain offset 补偿 调谐参数EI 53 离子源结构 电离室 永久磁铁 灯丝 靶透镜 推斥极 拉出极 离子聚焦 入口透镜 GCMS5975C新型高温离子源 54 参数阶程 55 四极杆质谱 0 RF振幅 DC振幅 极性 RF频率 56 两对电极上的复合电压大小相等 直流电压极性相反 57 过滤高质量 0 负棒电位 负棒 M 58 M PositiveRod PositiveRod 正棒电位 过滤低质量 0 59 MathieuStabilityDiagram马绍方程图解 AMUGain及其偏移 60 AMUGain及其偏移 DC电压 扫描线选择 220 218 219 AMUOFFSET 斜率 AMUGAIN RF电压 61 AMUGAIN AMUOFFSET AMUGain渐增会 峰宽 受影响大的是 影响高质量和低质量区 AMUOffset渐增会 AMUGain及其偏移如何影响峰宽 峰宽 分辨本领 灵敏度 62 予期质量 观测质量 MassAxisGain 100200300400500 500400300200100 69 219 502 质量轴校正 MassAxisoffset 63 为什么做自动调谐 1 诊断2 编写系统性能变化表3 提高灵敏度 64 自动调谐流程图 65 例如 ThisisknownasAutoTuneontheHP5973MSD 上述丰度值不是精确值 只做演示用 DefaultValue mV amu M Z Ent Lens Offset 入口透镜电压 ENTR SettoMaximizeM Z69 M Z 69502 Ent Lens Offset EntranceLensVoltage ENTR mV amu 自动调谐与标准谱图调谐比较 69502 66 平滑对称的峰形 适当的EM电压 合适的丰度值 Lowwaterandair 正确的质量分配 典型的相对丰度 自动调谐报告 合适的同位素比例 峰的数目 67 质量数的峰宽 平滑对称的峰 合适的电子倍增器电压 适当的丰度值 低水峰及空气峰 正确的质量分配 合适的相对丰度 合适的同位素比例 标准谱图调谐报告 68 amugain和amuoffset EM电压及质量轴校正调整所有其它源参数不变调谐69 219 502三个质量数 快速调谐 69 目标调谐 70 BFB调谐的评价 71 DFTPP 十氟三苯磷 调谐评价基峰M Z 198 00可替换基峰M Z 442MassRel toM Z Low HighAlt Base51 00198 0030 080 0N68 0069 000 02 0N69 00198 000 0100 0N70 00198 000 02 0N127 00198 0025 075 0N197 00198 000 01 0N199 00198 005 09 0N275 00198 0010 030 0N365 00198 000 75100 0N441 00443 000 01100 0N442 00198 0040 0110 0Y443 00442 0015 024 0N 72 有权使用MS参数易于建立用户调谐文件诊断 手动调谐 73 影响质量轴 影响峰宽 分辨与灵敏度 离子源透镜参数影响灵敏度 传输效率 手动调谐 74 通过手动调谐检漏 75 调谐菜单 76 真空菜单 77 参数菜单 78 编辑调谐和显示参数菜单 79 归一化法的自动调谐 GainNormalizationAutotune 5975C新增功能 针对需要提高灵敏度的用户提供良好稳定的高灵敏度自动调谐更好的数据可比性 AppNote 5989 6050EN 80 第四章色谱进样技术 81 分流 不分流毛细管柱进样口分解图 插入件组件衬管绝缘层垫圈变径接头保温层垫圈柱螺母 进样垫固定螺母进样垫O形环分流出口管线分流 不分流进样口实体固定螺母分流平板保温套 82 衬管的作用 保护色谱柱 不挥发组分滞留在衬管内 但当污染物积攒到一定量时 会吸附样品造成峰拖尾 分裂或出现鬼峰衬管内少量经硅烷化处理的石英玻璃毛可防止注射器针尖的歧视 即针尖内的溶剂和易挥发组分首先汽化 加速样品汽化 避免固体物质进入并堵塞色谱柱等如果衬管太脏 可以用1N盐酸或硝酸浸泡8小时 清洗烘干后用硅烷化试剂配制成10 甲苯溶液 浸泡8小时 再依次用甲苯 甲醇清洗 硅烷化处理可以选用DMDCS 二甲基二氯硅胺 如果使用ECD检测器或CI源 一定要选择不含卤素的硅烷化试剂 如 HMDS BSTFA BSA TSIM等 注意 高温下工作时 硅烷化的有效期只有几天 因此衬管需要及时清洗或更换 83 19251 60540 18740 60840 900uL 1000uL 1000uL 杀虫剂衬管工厂去活处理 普通型未去活 250uL 直接进样 分流 不分流 分流 不分流进样衬管 底部 84 分流平板的维护 在溶剂中超声处理烘干用非氯化剂去活化HMDSBSTFABSATSIM用溶剂清洗先惰性洗涤 甲苯再用醇类清洗 甲醇烘干 85 分流过滤装置 CartridgeAssembly CartridgeSplitVentTrapAssemblyP NG1544 60610 进样口系统 作用 使样品以一种可重复再现的方式契入到气相色谱柱中 被引入的样品应具有代表性 除特殊要求外样品引入过程不应发生任何化学反应 进样口类型气路控制 分流 不分流进样口EPC隔垫吹扫填充 柱 进样口EPC冷柱头进样口EPC程序升温汽化进样口EPC挥发进样口EPC 86 分流 不分流进样口 流路系统 87 7890A的隔垫吹扫 在7890A中 我们可以控制隔垫吹扫流量 并对其进行程序控制 这路流量由三个元件控制 一个比例阀 一个压力传感器 一个固定的限流器 隔垫吹扫气的主要作用是带走隔垫分解的污染物及消除二次进样现象 88 分流 不分流进样口 操作模式 89 分流流路示意图 进样前 90 分流流路示意图 进样时刻 91 分流流路示意图 样品的汽化 92 分流流路示意图 样品与载气的混合 93 分流模式的气路控制 94 95 分流进样需注意的问题 尽量减少分流歧视 分流比越大 越有可能造成分流歧视保证样品快速汽化 适当添加经硅烷化处理的玻璃毛 分流进样时 柱的初始温度尽可能高一些柱安装时注意柱与衬管同轴 不分流流路示意图 进样前 在上图中 隔垫吹扫气处于标准 Standard 模式 96 不分流流路示意图 进样时刻 在上图中 隔垫吹扫气处于标准 Standard 模式 97 不分流流路示意图 样品进入色谱柱 在上图中 隔垫吹扫气处于标准 Standard 模式 98 不分流流路示意图 打开分流出口 吹扫溶剂蒸气 在上图中 隔垫吹扫气处于标准 Standard 模式 99 100 不分流进样 柱初始温度尽可能低一些 最好低于溶剂的沸点10 20度 溶剂要与柱子固定相匹配 衬管尺寸尽量小 0 25 1ml 使样品在衬管内尽量少稀释 最好使用直通式衬管 对于比较脏的样品 要加经硅烷化处理的玻璃毛并注意经常更换根据样品 溶剂沸点 待测组分沸点 浓度等 优化开启分流阀的时间 一般在30 80秒之间 多用0 75分钟 可以保证95 以上的样品进入柱子 不分流进样过程中的溶剂效应 溶剂 101 不分流模式的气路控制 102 衬管过载 上图为不分流模式下 衬管过载的情况 103 溶剂膨胀体积的计算 溶剂膨胀体积 22 400 A B C IA 溶剂密度 溶剂分子量B 15 15 色谱柱头压 psi C 进样口温度 273 273I 液体进样体积 ul 104 操作模式 脉冲进样 加快样品进入色谱柱的速度 防止样品在进样口分解允许更大的样品进样量 105 操作模式 载气节省 在样品进入色谱柱后 减少分流出口的载气流量以节约载气 柱前压和柱流速仍保持不变 只有分流出口的流量减少 可用于分流和不分流方式 节省载气启动的时间应选在样品进入色谱柱后 106 107 手动进样应注意的问题 注射速度快 取样准确 重现 避免样品间互相干扰 选用合适的注射器 用10 L进样器进样量不要小于1 L 减少注射针尖歧视 每次进样速度尽量一致 玻璃毛放在衬管中间偏下位置 即针尖到达的位置 取样后可用滤纸拭去针尖外面的残留样品 但要注意不要吸去针内样品 108 冷柱上进样 冷柱上进样是将样品直接注入处于室温或更低温度下的色谱柱内 再逐步升高温度使样品各组分依次汽化 优点消除进样口对样品的歧视效应避免热分解容易利用溶剂效应准确度与精密度均高于分流 不分流进样缺点进样体积小操作复杂 对初始温度 溶剂种类 进样速度等要求较严格易污染毛细管适用于热不稳定化合物及痕量分析 109 冷柱头进样 注射器针 柱子 固定相 样品 110 其它进样口 程序升温汽化进样口使用PTV进样口大体积进样 LVI 用于较晚流出组分或不净样品的痕量分析 在冷的进样口进行大体积进样 然后进样口采用温度阶程进样升温 进样口使用 无隔垫顶盖 挥发进样口从一个外加设备如顶空 吹扫捕集或毒性气体进样器引入气体样品 111 CO2或液氮冷却无隔垫 不会造成隔垫污染无隔垫吹扫 不损失样品多次进样后无泄漏最优化的端口体积 适合于毛细管柱 PTVwithSeptumlessHeadAssembly SeptumlessSamplingHead 112 GC Detector Step1 注样 Step2 予柱升温 使溶剂与样品分离 Step4 目标化合物结束残留物从分流出口流出 Step3 溶剂分离结束 目标化合物进入柱子 溶剂 被分析物 基质 S A M 分流 不分流 高分流流量 Pre column 恒温 Pre column 程序升温 Pre column 程序升温烘烤 GCColumn GC Detector GCColumn GC Detector GCColumn GC Detector Split SplitlessConfiguration APEXProSepPrecolumnSeparationInlet 113 使用内径更小的柱子 GC MS要用0 25mm以下的柱子 减小固定相百分组成或固定相液膜厚度 减小进样量 选用更长的柱子 使用程序升温改善后流出组分峰形 好的进样技术可以保障高柱效 进样应该紧凑快速 以免峰展宽 如何提高柱效 114 恒温 程序升温 在整个分析过程中 色谱炉温保持恒定 用初始时间设定运行结束时间 升温速率设为 0 后流出的峰展宽 当组分有较宽的沸点范围 100 C 时使用 减少分析时间并使峰变窄 增加柱流失 引起基线漂移 可设多阶程序升温 HP6890 7890可设 快速变化速率 至120 C min 柱温操作 115 第五章样品采集技术 116 讨论主题 SCAN采集方式的适用性各种数据采集参数对数据的影响 Scan采集原理 117 总离子色谱 118 质量峰检测 119 影响扫描时间的因素 平均每0 1amu采集数据点的数目 samplingrate 扫描质量范围每个色谱峰通过5 10次扫描可以很好地定性 每个色谱峰通过10 20次扫描可以很好地定量 MASS TIME 程序时间 回扫时间 扫描时间 扫描循环时间 数字式扫描过程 120 用五个邻近的数据点平滑确定中心质量 质量峰最大 质量中心的水平应超过质量阈值数据文件同时储存质量和丰度 阈值 121 阈值过高 82 182 M Z 丰度 M Z 丰度 82 303 182 阈值设置适当 阈值对质谱图质量的影响 122 数据采集设置 123 方法 是为仪器和计算机设定的采集和处理数据的一个完整指示 数据采集 采集方式调谐文件MS质谱应用参数GC色谱应用参数 Methods在 MSDCHEM n Methods子目录下由 m 扩展名识别 数据文件在 MSDCHEM n DATA子目录下由 d 扩展名识别 n表示仪器编号 什么是方法 124 首先编辑GC的配置 GC7890界面 125 首次连接GC7890A 配置阀和其它参数 126 首次连接GC7890A 配置色谱柱 127 首次连接GC7890A 配置模块 128 首次连接GC7890A 配置自动进样器 129 编辑完整方法 130 方法信息 131 进样方式 选择样品来源 GC或其他 选择进样方式 手动 GC自动进样器或阀 如果是手动 选择进样口的位置如果用质谱采集数据选择 使用质谱 如果用GC检测器就不选 132 设置进样器 133 7890A独有样品重叠进样功能 抓瓶l 准备进样针和样品 进样分析 炉膛降温 数据分析 第二次运行 第三次运行 6890 第一次运行 第二次运行 第三次运行 第一次运行 7890A 134 设置样品盘 135 设置分流不分流进样口 136 设置色谱柱的流量 137 设置柱箱温度 138 输入GC检测器温度设定值 如果有GC检测器 检测器 139 保存GC检测器数据 如果有GC检测器 监控温度监视流量或压力 信号 140 输入辅助部件 MS接口 温度输入辅助部件压力 辅助部件 141 运行期间可自动运行25个时间表 运行时间表 142 设置反吹 GC7890A 143 设置诊断计数器 GC7890A 144 从仪器控制面板监视信号时观察GC检测器保留时间 如果有GC检测器 GC实时绘图 145 仪器控制 GC6890配MSD 所有的仪器控制界面都可以从这一界面看到当前的方法和序列可以在标题栏看到 146 选择方法的某部分进行编辑 方法 编辑完整方法 编辑方法 147 填入关于方法的说明选择 数据采集 和 数据分析 方法信息 148 进样方式 选择样品来源 GC或其他 选择进样方式 手动 GC自动进样器或阀 如果是手动 选择进样口的位置如果用质谱采集数据选择 使用质谱 如果用GC检测器就不选 149 自动进样器 进样体积及洗针次数按 配置 设定进样针体积按 更多 设定取样位置等 150 黏度 最后一次泵起至进样的时间 有效值0 7 样品深度 0 00表示针尖与标准瓶底距离3 6mm 有效值 2 30 0 进样前注射器在进样口停留时间 有效值0 00 1 00 进样后注射器在进样口停留时间 有效值0 00 1 00 进针速度 注射器控制 More 151 阀进样 必须先配置阀 如果安装了 用运行时间对话框 控制阀的运行事件 152 分流模式 选择分流输入所有的设置 153 不分流模式 选择 不分流 输入所有的设置 154 脉冲不分流模式 选择 脉冲不分流 输入所有设置 155 脉冲分流模式 选择 脉冲分流 输入所有设置 156 色谱柱 设定流量模式 连接方式等参数 157 安装色谱柱 158 159 添加 更换柱子 使用其他厂家柱子 从目录中选择柱子在目录中增加柱子从目录中删除柱子 160 校正柱长 步骤1 首先用1微升空气进样 记录其保留时间 点击change calibrate 步骤2 161 输入空气峰的真实保留时间 步骤2 步骤3 步骤4 输入空气峰的真实保留时间 162 输入炉温设定值 炉温 163 输入GC检测器温度设定值 如果有GC检测器 检测器 164 保存GC检测器数据 如果有GC检测器 监控温度监视流量或压力 信号 165 输入辅助部件 MS接口 温度输入辅助部件压力 辅助部件 166 运行期间可自动运行25个时间表 运行时间表 167 为方法定义压力单位锁住HP6890键盘GC检测器柱补偿 如果有GC检测器 选项 168 选择用于MS采集的调谐文件 MS调谐文件 169 MS采集参数 SCAN 170 MS采集参数 续 171 MS采集参数 时间和扫描范围 172 MS扫描参数 阈值和采样率 为每一组定义阈值和采样率 173 MS扫描参数 绘图 定义要绘图的量和范围激活由SIM Scan参数面板的 实时绘图 控制的区域 174 定时事件 检测器on off时间程序倍增电压随时间变化程序阀时间程序 175 用于监视MS源压力 阀和MS温度范围 MS监控 176 适用于远距离控制 监控警告器 177 采集数据 178 179 讨论主题 选择离子检测 SIM 与扫描的区别SIM采集参数如何影响数据SIM方式如何进行数据采集 选择离子检测的原则 180 SIM是什么 只监视所选择信息的质荷比它如何做 控制质量分析器 仅仅对感兴趣的质量进行分析为什么做 提高灵敏度改善峰形改善精确度应用痕量分析复杂基质常规定量 选择离子检测 181 SIM数据采集 Dwell time SIM mass1 SIM mass2 SIM循环时间 四极杆 电压 amu TIME SIM mass3 空中时间 扫描数据采集 扫描时间 扫描循环时间 空中时间 四极杆 电压 amu TIME SIM与SCAN比较 182 选择 离子 组数目每个离子驻留时间以便获得良好的数据采集所需的循环 峰数目目标 每个峰通过15 25次循环每个离子驻留时间相同运用时间规划 SIMGroups 使采集 循环离子数目最少 设置SIM采集 183 RF电压 选择 LOW 可增加灵敏度低分辨方式不适合于质量差别 3amu的化合物测定 如 同位素标记内标 低或高质量分辨 184 质谱SIM方式 选择SIM采集方式编辑SIM参数 185 SIM方式 参数 添加或删除组添加 修改或删除每组离子 186 输入新方法名称 保存方法 187 TraceIonDetection TID 5975新增功能 降低噪音提高S N改善峰型改善质谱图提高谱库检索匹配 Usewithcare 188 KahunaSupportIntroduction Page188 时间区域 3维 过滤 跟踪离子检测 独有特性 这是什么 峰检测和过滤时的改良算法 189 Page189 跟踪离子检测 优势 通过减少噪音来提高检测 信噪比 改进峰形 获得更好的峰面积和保留时间的重现性 有助于大量样品的检测 不足 信号 峰 轻微扩展并且峰高降低 造成更低的色谱分辨率建议 运用HiSense U 色谱峰的数据点大于4时可以选用此功能 190 什么条件下使用 1 噪音抑制 过滤器是否去除了足够的噪音以便定位更低水平的信号 也就是TID 2 信号水平损失 看一下任意一个真峰 是否信号高度的衰减非常明显 也看看峰面积 3 一个峰内数据点的数目 随着峰内数据点的减少 信号衰减会增大 下面是近似结果 a 每个峰大于10个数据点时信号高度上没有明显变化 b 每个峰大约7个点时大约10 的信号高度损失 对峰面积的影响未知 c 每个峰大约4个数据点时大约35 的信号高度损失 对峰面积的影响未知 d 每个峰少于4个数据点时建议关闭此功能 191 新型离子源温度可达350 C 优点改善后洗脱化合物的分析情况对比较 脏 的样品具有较高的可操作性针对分析快速调节分析器缺点离子源部分寿命缩短可能引起高的背景 扫描 可能会由于高温引起谱图改变 192 多环芳烃 PAHs 分析的提高 193 有机氯杀虫剂分析的改善 Endosulfansulfate p p DDT Methoxychlor 194 使用高温离子源注意事项 只有具备适当配置的离子源才能进行高离子源温度操作 5975CMSD离子源已经具有这种配置EI和CI源都必须有允许超过300 运行的特殊部件组成 在所需最低离子源温度下进行操作 所需 的意思是温度取决于所需要的应用要求 离子源部件长期连续在高温下运行会导致离子源寿命缩短 这是不可避免的事实 离子源温度在250 或更高时运行时必须格外小心这意味着要特别小心地避免漏气 因为漏气最少会 激活 离子源 甚至可能导致离子源或质量分析器永久的损坏 大多数漏气发生在GC MSD的传输线 现在的硅钛合金金属密封圈较难使用 但对接口温度升降温循环变化或升温过程中可能出现的漏气现象具有很好防范密封作用 这种硅钛合金金属密封圈将用于MSD和GC的高温操作中 195 350 离子源使用注意事项 定位研究化合物反应 不要将离子源始终置于350 四极杆置于150 离子源 300 四极杆 150 并且质量 800u 禁止 在较高温度下 调谐化合物谱图会发生 扭曲 196 KahunaSupportIntroduction Page196 电子倍增器节能 电子倍增器节能只在SIM采集时才会被用到 用户为一个质量数选择总的强度限制 防止倍增器因为大的离子电流而 烧伤 电子倍增器烧伤会导致信号响应下降 使用 用于扩展的线性SIM研究 高浓度下的SIM 优势 在使用高浓度的样品或标准品时 能够得到更连续一致的响应 不足 会损失一些离子比率重现性 197 Page197 电子倍增器节能 打开或关闭 在方法菜单栏中 默认状态为关闭的 默认并推荐的总和限值为108 198 第六章定性分析 199 本章将学到 数据分析主菜单的特征数据浏览工具熟练处理数据的性能积分参数利用反检索 PBM 进行定性分析自动谱库检索及报告参数恢复如何自建库 定性分析 200 数据分析窗口 调用数据放大缩小图获得质谱图背景扣除峰纯度谱库检索 201 数据分析中鼠标的功能及按相对丰度显示质谱图 202 数据分析界面的鼠标右键功能 可以通过点击工具栏快捷键 切换是否启动右键功能右键在导航界面 总离子流图和质谱图的内容不同 203 下拉菜单 文件 F 204 本底扣除 205 SIM Scan同步数据 可以选择要调用的数据通常都是同时显示 如图所示 206 方法下拉菜单 207 重新处理菜单 208 色谱图下拉菜单 209 提取离子色谱 210 提取离子色谱 211 简易EICs 在EIC图上同时点击左右键 212 不纯 峰纯度 纯 不纯 213 绘制关联色谱图 绘制与当前质谱图相关联的所有扫描的离子流图 214 用于设置化学工作站积分参数用于保存当前化学工作站积分参数用于加载 修复 保存化学工作站积分参数 化学工作站积分参数 保存为方法的一部分 215 各种积分事件 216 用于设置RTE积分参数用于保存当前RTE积分参数用于加载 修复 保存RTE积分参数 RTE积分参数 峰起点与终点高度差与峰高相比 基线位置 分离相邻两峰的最少扫描次数 基线下落或切线 峰位置 顶点或峰重心 最小峰面积 最多峰数目 保存为方法的一部分RTE积分文件扩展名为 P 217 将检索结果标注在色谱图上 将PBM检索的第一个匹配结果 连同匹配度 标注在峰上 218 谱图下拉菜单 219 PBM库检索的概念 220 选择所要检索的谱库从质谱菜单 选择谱库 谱库检索 选择谱库 221 PBM检索结果 222 PBM检索结果文本文件 223 检索统计表 224 将检索报告作为方法的一部分 自动谱库检索 选择 Method EditMethod 选择 LibSearchReport 设定期望的报告风格及打印目的地 225 自动谱库检索摘要报告 226 建立自建库 227 添加和编辑信息将用户当前数据文件中的一张质谱图放入自建库 228 参数检索 229 参数反向检索结果 230 选用分子结构数据库步骤 231 在molstruc处双击左键 点击确认 232 工具下拉菜单 233 自动化工具 运行扫描 234 信噪比测定 235 信噪比测定 续 236 编写及运行宏程序 237 分析多个数据文件 通过同时显示来自多数据文件的总离子流图和提取离子色谱图比较数据 238 分析多个数据文件窗口 239 分析多个质谱图 通过谱图比较 重叠 差减的方式对照两张质谱图 240 多谱图查看窗口 241 第七章定量基础 242 校正 定量 校正即是利用某个峰的峰高或峰面积来确定其对应组分的浓度或含量当检测器灵敏度针对不同的组分而变化 及检测器对同一组分不同含量响应值发生变化时需做校正校正方法 面积百分比法AREA 峰高百分比法HEIGHT 归一化法NORM 外标法ESTD内标法ISTD 不是校正方法 243 面积百分比法AREA AREA pk AREA x100 AREA pk 假定检测器响应都相同所有组分都流出所有组分都被检测到优点缺点无需做校正以上所有的假定简单 快速的定量过程需测量所有的组分进样量不要求严格所有的面积都必须准确 244 响应因子 绝对响应因子RF 含量 面积校正检测器响应与组分的含量及其它组分的存在无关 含量100100200面积300025004000 245 归一化法 NORM RF pk xAREA pk NORM x100 RF pk xAREA pk 假定所有组分都流出所有组分都被检测到优点缺点简单 快速的定量过程所有组分峰都要流出进样量不要求严格需测量所有的组分必须校正所有的峰 246 外标法 ESTD 含量 面积 pk xRF pk 优点校正检测器的响应只对欲分析的组分峰做校正无需所有峰都能被检测到缺点进样量必须准确仪器必须有良好的稳定性需定期做再校正 247 定量分析 248 单级校正对每一峰只做一次校正单级校正中做了如下假设 响应因子不会因为某峰对应物质的含量变化而发生变化响应曲线须通过原点 249 多级校正对每一峰需做至少两次校正可以补偿检测器对不同含量的样品组分而给出非线性响应 响应曲线可以不通过原点 250 多级校正过程首先准备一个混合标样 其浓度应高于欲分析物的浓度将浓标样等梯度稀释 其中最低浓度低于待测物的浓度运行每一级稀释好的标样在每一级上进行校正运行待测样品并使用校正表分析它需要时进行再校正 251 252 内标法 ISTD 253 选择内标物的标准样品中不存在化学性质与样品相似与样品有相同的浓度范围不会与样品发生反应在感兴趣组分附近流出 可得到分离良好的 干净利落的峰色谱性质稳定可迅速容易得到 254 本章将学到 如何设置并调试定量数据如何编辑定量结果如何产生定量报告 定量数据分析 255 步骤3 查找限定离子 步骤2 保留时间窗口内查找目标离子 步骤1 在信号窗口内查找峰积分 化学工作站定量概念 256 分析标准物 分析未知物 建立标准曲线 由曲线计算含量 定量过程 257 连同校正表下载方法文件 下载第一个标准数据文件选择校正 设置定量 设置定量数据资料 258 选择校正 设置定量 定量数据资料表 参考峰窗口 仅用于内标非参考缝窗口 用于其它化合物相关窗口 允许目标离子与限定离子的保留时间之差默认值 峰起点与终点须在此范围内 是否用RTE积分 259 260 单击 插入上方 输入化合物 261 输入化合物 续 262 内标指令 263 用于 增加新级别级别再校正删除级别 更新校正表 内标物浓度 264 编辑化合物信息表 鉴定 265 266 编辑化合物信息表 校正 267 编辑化合物信息表 用户定义 268 编辑化合物信息表 高级的 269 编辑化合物信息表 报告中 270 用于 增加新级别级别再校正删除级别 更新校正表 1701DA版 内标物浓度 271 化合物信息 第1页 272 273 化合物信息 第2页 274 化合物信息 第3页 校正曲线 275 校正曲线 276 调用未知化合物的数据使用定量 计算 277 1 选择方法 编辑方法 2 选定 定量报告 3 选定报告格式和目的地4 保存方法 自动生成定量报告 278 定量报告选项 279 使用定量编辑定量结果手动再积分 280 使用下列工具 跟踪模式定量查找化合物 查找全部化合物快捷定性 如果峰 限定离子找不到 检查 1 积分2 数据文件中的质量数3 时间范围4 信号相关窗口如果出现奇怪的校准曲线 检查 1 数量2 积分事件3 响应 定量数据库故障排除 281 修正保留时间校正离子比率设置信号萃取窗口 快捷定性 282 第八章用户报告和资料库 283 本章将学到 如何建立模板及产生报告如何建立资料库及其更新 用户报告和资料库 284 形象的运行时间程序一旦安装 直接建立 hpchem custrpt添加CustRpt菜单用户报告模板文件为 crt用户报告资料库文件为 crd 用户报告和资料库 285 建立新报告模板编辑用户报告模板指定新报告模板 用户报告 286 从右边表中选择报告内容 从左侧所列的报告选项中选择项目 击Add键 重复至选项添加完毕 击OK 用户报告 完善报告 287 用户报告 拖放式 288 选择文件 保存或文件 另存为输入文件名并击OK 选择它 为方法建立一个作为报告模板的文件 选择它 运行方法时打印用户报告将报告与每个文件一起保存或覆盖 用户报告 保存模板 289 加载一个定量数据文件 选择 定量 打印报告 打印用户报告 交互式 290 第九章序列 291 在本节将学到 怎样通过样品 序列 自动进行分析如何建立 运行和修改序列 序列 292 序列 293 编辑样品明细表 建立序列 D 02 00后增加了更多的鼠标右键选项 294 配置序列格式 295 停止或暂停一个序列 运行序列 296 各别命名系统为文件名赋值Swapped系统为文件名赋值用户定义命名依据 所有文件名由系统自动加扩展名 D 为文件名赋值 297 序列的附加选项 将另一个序列内容加入本序列为第一个文件命名第一个样品瓶号更改方法 298 模拟序列 299 第十章仪器维护及日常保养 300 这一章将学到 GC和MS预防性维护 301 日常维护 GC 分流 不分流进样口的日常维护 302 定期更换进样垫定期更换和清洗干净的衬管定期更换O形环定期用溶剂清洗分流平板定期用溶剂清洗进样口定期更换分流捕集肼 隔垫吹扫分流 不分流进样口 303 GC6890锣纹款进样口需要先定位再拧 分流 不分流进样口的维护 隔垫 304 1 逆时针滑开锁扣 让隔垫组件离开进样口 防止隔垫更换时碎屑掉入进样口 2 拧开螺帽3 用镊子摘下旧的隔垫4 用钢丝球和镊子把旧隔垫的残余部分刮去5 用压缩空气将隔垫组件吹干净 6 将隔垫组件对准豁口放回进样口组件 7 装上新的隔垫 如果你使用的是Merlin隔垫 请将金属面向下8 拧上螺帽直至C形环突出1mm9 重置隔垫使用次数 305 衬管的维护 不挥发的基体将会停留在衬管当中 吸附以后注入的样品 造成峰的拖尾 鬼峰或峰的丢失 分流 不分流进样口的维护 衬管 306 1 逆时针滑开锁扣 让隔垫组件离开进样口 以免碰碎衬管 2 用镊子拨松O形环 3 用镊子将衬管取出 4 检查分流平板是否有污染 如果有污染 更换 清洁进样口 将新的O形环放在衬管上 将衬管放回进样口 推入衬管 直至衬管接触到分流平板 装上隔垫组件 用载气吹扫进样口15分钟 老化进样口 重置衬管使用次数 分流 不分流进样口的维护 分流平板 307 移开保温套 移开色谱柱接头 松开螺母 分流平板 垫片 螺母 在溶剂中超声处理烘干用非氯化剂去活化HMDSBSTFABSATSIM用溶剂清洗先惰性洗涤 甲苯再用醇类清洗 甲醇烘干 308 分流 不分流进样口的维护 更换分流捕集阱 1拧松固定夹螺丝 拧松两颗定位螺丝 2 使用扳手将分流捕集阱拧下 3 更换分流捕集阱及两个O形环 309 常见柱流失离子碎片 310 普通维护建议 了解待测样品的含量 尽量减少进样量 如果全部未知 最好先摸色谱条件 避免用大孔径柱避免用厚液膜柱用检测性能的标样检查系统性能定期进行预防性保养 减少维修次数保留仪器维护档案 色谱柱的维护 避免色谱柱断裂 311 不要让色谱柱接触尖锐的边角避免太紧缠绕或弯曲色谱柱 色谱柱的维护 避免色谱柱热损坏 312 不要超过指定的柱温上限 等温上限 柱子能够无限期承受的温度程序升温上限 最高柱温 色谱柱只能在此温度下工作5 10分钟将GC最高柱箱温度设定为色谱柱的温度上限 若柱箱中有两根色谱柱 则确保将最高柱箱温度设定为柱温上限最低的色谱柱的温度上限值 老化柱子 程序升温 分段升温 反复升温 充足载气 色谱柱的维护 避免色谱柱氧化损坏 313 通过以下措施保持系统无氧气和泄漏 进行定期的检漏工作定期更换隔垫采用高质量载气安装并维护氧气捕集阱在气瓶完全空之前就更换 色谱柱的维护 避免色谱柱化学损坏 314 进行样品制备 从样品中去掉无机酸碱安装保护柱并定期截去柱头的一段若必须使用酸碱 则选择一种有机替代物或盐酸或氨水 色谱柱的保存 315 1 将色谱柱堵头插在柱两端以防止碎片进入柱内 2 重新安装色谱柱的时候需要从柱头截去2 4厘米以确保隔垫碎屑不会堵塞在柱子内 色谱柱的堵头出厂时配有 请妥善保管 保存色谱柱的时候装上堵头 316 日常维护 MSD 317 真空系统维护 检查前级泵油 每周 检查校准样品瓶 每6个月 气震前级泵 对于使用氨气反应气的MSD应每日执行 更换前级泵油 每6个月 对于使用氨气反应气的CIMSD应每3个月更换一次 拧紧前级泵油箱上的螺丝 安装后第一次换油时 更换扩散泵油 一年一次 如果不按计划执行这些任务将导致仪器性能的降低 而且还可能损坏仪器 318 注油口 质谱前级泵 机械泵维护 上面是油位观察窗下面是放油口 319 检查 添加和放空前级泵油 泵油水平线 泵油过滤器 注油孔塞 排油孔塞 320 更换扩散泵泵油 风扇 液面水平窗 321 取下EI离子源 322 离子源分解图和部件 毛细管柱插口 离子源壳体 离子源加热组件 推斥极 推斥极绝缘环 推斥极绝缘环 灯丝 离子聚焦 拉出极柱体 拉出极平板 透镜绝缘体 入口透镜 源垫圈 固定螺丝 垫圈 推斥极螺母 不要过紧 323 清洗离子源 避免接触溶剂 324 清洗离子源的步骤 1 325 清洗离子源的步骤 2 水甲醇丙酮己烷 注意 清洗CI源时不可用含氯溶剂 326 垫圈 螺母 To MSD 柱从接口伸出1mm 进样口 4 6mm 毛细柱直接安装 327 重新安装程序 重新安装色谱柱抽真空检查漏气升温 328 烘烤质量分析器 烘烤质量分析器可以降低水分背景来改善调谐和数据采集性能 要求调谐参数可以使用更高的离子源温度 设置到高温上限 离子源300 C 四极杆200 C 329 Page329 350 C离子源 分析器烘烤的宏程序 手动在调谐界面 选择烘干MSD在命令行输入 Bake 在一个序列当中自动运行 330 重新填充EI校正液 校正瓶 瓶颈