低温诱导染色体加倍.ppt

探究低温诱导染色体加倍 低温和秋水仙素一样 处理植物分生组织细胞 能够抑制纺锤体的形成 导致分裂后期染色体不能移向两极 细胞加大而不分裂 着丝点分裂后的染色体仍在一个细胞中 故细胞中的染色体数目加倍 如果用低温处理根尖 则在根尖分生区内可以检测到大量染色体加倍的细胞 如 处理植物幼苗的芽 则可以得到染色体加倍的植株 二 实验原理 洋葱 实验课前的3 5d 把洋葱放在盛满水的广口瓶上 让它的底部接触瓶内的水面 蒜 实验课前的3 5d 取放在盛有少量水的培养皿中培养 三 实验材料 选材时注意选择进行分裂的分生组织细胞 不分裂的细胞染色体不复制 不会出现染色体加倍的情况 卡诺氏固定液的配制 取无水酒精和冰醋酸 按体积比3 1的比例混合 盐酸酒精解离液的配制 取95 酒精和15 盐酸 按体积比1 1的比例混合 质量浓度为10mg mL的龙胆紫溶液的配制 将100mL的体积分数为45 的醋酸溶液煮沸 加入1g龙胆紫后 搅匀再煮5min 待冷却后过滤 备用 实验试剂准备 注意 盐酸有刺激性和腐蚀性 应小心使用 避免与皮肤和眼睛接触 一 根尖的培养 方法1 实验课前的3 5d 把洋葱放在盛满水的广口瓶上 让它的底部接触瓶内的水面 方法2 实验课前的3 5d 取蒜瓣 放在盛有少量水的培养皿中培养 四 实验操作步骤 二 低温诱导 当根长到lcm时 放入冰箱内4 低温下培养 处理36h 三 固定根尖 剪取以上处理的根尖 每个根尖为0 5 1cm 分别放人卡诺氏固定液中固定30 60min 然后用体积分数95 酒精洗两次 卡诺是固定液作用固定根尖的形态 所观察的细胞被盐酸杀死了 最终在显微镜下观察到的是死细胞 四 制作装片及观察 取固定好的根尖 进行解离 漂洗 染色和制片4个步骤 具体操作方法与实验 观察植物细胞的有丝分裂 相同先用低倍镜寻找染色体形态较好的分裂相 再换上高倍镜并调节细准焦螺旋和反光镜 使物像清晰 仔细观察 辨认哪些细胞发生染色体数目变化 改良苯酚品红溶液和醋酸洋红溶液都可以是染色体着色