生物安全柜及应用.ppt

生物安全柜biologicalsafetycabinets BSC 湛江市疾病预防控制中心艾滋病确证实验室 工作台的分类 超净工作台生物安全柜生物安全柜的基本防护功能保护操作人员保护样品保护环境 生物安全柜的定义 ClassII生物安全柜 防止操作处理过程中 含有危险性或未知性生物微粒气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置 生物安全柜的分类 根据处理样品的危害不同 分为三个等级 级 级 级BSC 级生物安全柜 BSC 级生物安全柜 BSC 级生物安全柜 级生物安全柜的分类 1 级A1型生物安全柜柜内空气70 循环 30 排出 窗口流速0 4 s2 级A2型生物安全柜柜内空气70 循环 30 排出 窗口流速0 5 s3 级B1型生物安全柜柜内空气30 循环 70 排出 窗口流速0 5 s 级B2型生物安全柜柜内空气100 排出 窗口流速0 5 s 级生物安全柜 1 美国对 级生物安全柜有新的分类方法2 欧洲产品无B2型 级生物安全柜 级生物安全柜 BSC 主要功能 用于低度危险性的微生物和病原体作业空间并未到达无菌洁净的条件保护操作人员及环境但不保护样品 级生物安全柜 BSC 主要结构 带有抽气装置的操作箱气体向操作箱内流动 保护操作者排出气体经HEPA过滤气流速度在0 4 s以上 排气量 进气面积 级生物安全柜 可开启前窗在负压下操作表面风速75 100fpm排出的气体经HEPA过滤保护操作人员和环境 HEPA 适用于样品不需保护的实验工作 级生物安全柜 BSC 主要功能 用于操作低 中度危险的微生物 病原体操作空间到达无菌的洁净条件 级生物安全柜 BSC 主要结构 具有前吸风口和排气口可防止内部污染气体流出避免外部气体进入箱內污染样品气体经HEPA过滤排出 级生物安全柜的分类 B1 TypeB B2 ClassII TypeA A1 A2 废气经烟罩排入实验室或室外 废气必须经排风系统排至室外 并带报警装置 安全柜的选择 选用A类还是B类生物安全柜 不是生物因素而是是否使用挥发性的有害物质或放射性物质 TypeB TypeA 级生物安全柜 满足生物安全等级1 2 3的要求 不涉及放射性物质 不涉及挥发性有害化学品 建议不应有明火 级生物安全柜 最小流速75fpm TypeA1有排风管路 TypeA1无排风管路 级A2型生物安全柜 B3型 前窗进风气流平均流速 0 5m s经HEPA的下送气流与操作口向内气流混合循环气流比例 70 经HEPA过滤器的空气 可以排回实验室或通过排风罩排入环境 无排风管 级A2型生物安全柜 最小表面风速0 5m s 有排风管 级A2生物安全柜 无排风管 满足生物安全等级1 2 3的要求 不涉及放射性物质 不涉及挥发性有害化学品 建议不应有明火 级A2型生物安全柜 有排风管 满足生物安全等级1 2 3的要求 适用于含痕量放射性物质的工作 适用于含少量挥发性有害化学品的工作 建议不应有明火 BSC A2型 正压污染区被负压区域包围 无外接风道 有外接风道 级B1型生物安全柜 前窗进风气流平均流速 0 5m s经HEPA过滤器的下送气流 大部分是未被污染的循环吸入气流循环气流比例为30 污染的下送气流经HEPA过滤后 大多数经过专门的排风管排入大气 级B1型生物安全柜 经HEPA过滤的下送气流 大部分未被污染 污染的下送气流经HEPA过滤后 大部分经排风管排入大气 级B1型生物安全柜 满足生物安全等级1 2 3的要求 工作区域的后部可使用少量的放射性物质 工作区域的后部可使用少量的挥发性有害化学品 建议不应有明火 BSC B1型 正压污染区被负压区域包围 级B2型生物安全柜 全排型 前窗进风气流平均流速 0 5m s循环气流比例为0 即柜中排出的气体不再循环所有污染的风道和压力排风系统均保持负压 级B2型生物安全柜 全排型 级B2型生物安全柜 全排型 满足生物安全等级 适用于放射性物质 适用于挥发性有害化学品 建议不应有明火 BSC II B2型 正压污染区被负压区域包围 BSC 型 保护实验人员 实验对象和环境密闭结构通过手套操作柜内负压不小于120Pa排风两道高效过滤器 一般无定型产品 需特殊定货若干 级生物安全柜连在一起使用 全部操作流程均在柜内完成 以确保安全 级生物安全柜 级生物安全柜 生物安全柜的操作理论 颗粒经HEPA过滤去除气流为层流气流有方向 生物安全柜的要求 生物安全柜的操作理论 HEPA滤膜马达 风扇强制气体流动马达转速的控制部分气体的吸入 平衡控制及管路系统 生物安全柜的主要部件 操作理论 层流 层流气流向下扫过工作区域 捕获气溶胶 经安全柜的内层至HEPA滤膜为实现真正的层流 各点的气流速率必须在平均流速的 20 以内 操作理论 有方向的气流 空气从柜前和周围吸入 使工作区域的气溶胶更难逃逸此气流通常以向内吸入的体积或平均流速计算 表示 操作理论 烟气分束 在工作区域的一个垂直平面内烟气被分束 向前方和后方的气孔移动为最有效的防止烟气逃逸 物品应放在烟气分束以后的区域 操作也应在此进行 生物安全柜的使用 1 正确安装 确保安全柜与外部排风系统压力平衡 保证安全柜处于正常工作状态2 定期维护和检测 确保安全性 生物安全柜的使用 工作前认真理解操作步骤和所需设备尽量减少扰动准备好消毒剂 制定计划 生物安全柜的使用 关紫外灯 前窗开至适当高度 打开安全柜的灯和风扇检查出风口是否有障碍物 等待5min用消毒液彻底洗净手和手臂 穿长袖工作服和手套 带防护眼镜 开始 清洁 用70 的乙醇或适当的消毒剂擦拭工作区域内壁 生物安全柜的使用 只放入所需物品不能超载出风口不要有障碍物大物体间要保持一定距离前窗降至适当高度2 3min以吹扫污染物 上样 生物安全柜的使用 工作结束 继续开机10 15min 最后的吹扫 下样 与污染物接触的物品 取出之前必须经表面去污处理所有托盘或容器取出前必须加盖 生物安全柜的使用 用消毒剂清洁内壁 待其干燥定期抬起工作面清洁下面的区域 清洁 生物安全柜的使用 关闭灯 风机 关闭前窗开紫外灯 关机 生物安全柜的使用 所有物品离前窗至少2英寸 所有污染性的操作尽量远离工作区域的后部干净的与污染的物品分开放置 污染物品尽量放置在工作区域后部操作时物品和手臂不要穿过前窗 技巧 生物安全柜的使用 避免使用明火 用适当的灭菌措施避免使用干扰安全柜内层流的实验手段安全柜处于操作状态时 彻底消毒内壁 技巧 生物安全柜的使用 干净物品 理想的工作台摆放 污染区域 废弃物托盘 垃圾袋 生物安全柜内感染性材料溢洒的处理 发生少量溢洒 用吸收纸巾立即处理 并浸满消毒液的毛巾或纱布对生物安全柜及其内部的所有物品擦洗 消毒后更换手套 不论是摘下手套还是更换手套都要洗手 若发生大量溢洒 液体通过柜前面或后面的格栅流到下面 柜内所有物品都应进行表面消毒 并从柜中取出 关闭排水阀 将消毒液倒在工作台面上 使液体通过格栅流到排水盘上 所有接触溢出物品的材料都要进行消毒和 或高压灭菌处理 调整椅子高度 让肩膀放松双肘自然放于两侧 人体工程学方面的考虑 肘和肩膀 常见说法和错误认识 喷灯火焰将严重影响安全柜内的层流 可能造成气溶胶的扩散若喷灯的火苗很大 可能融化HEPA滤膜的粘结剂或烧滤膜若无人看守 喷灯可能熄灭 在A类或A B3类安全柜内 泄露的气体可能达到爆炸极限 可以在安全柜中使用喷灯 替代方法 如电热套或可抛的加热环 排风柜用于排出有害有毒的烟和气溶胶 应该用对多种化学试剂惰性的材料构成 可以把生物安全柜当排风柜使用 不能 常见说法和错误认识 常见说法和错误认识 错 只有在正确使用的情况下 才能保护操作人员 样品和环境 在生物安全柜中工作 什么时候都需无菌操作 如果在生物安全柜中工作 就不必很小心的操作 常见说法和错误认识 错 使用紫外灯可以减少安全柜不用时工作区域的污染 紫外线穿透力差 不能杀灭被灰尘或有机物保护的微生物 生物安全柜有紫外灯 就不必消毒清洁工作区域 常见说法和错误认识 不能 工作区域放置大物体将影响气流 降低安全柜的效率离心机 搅拌机等电器的风扇 可能破坏安全柜内的气流离心机内最好使用密封的安全杯 在安全柜内装样和下样 离心机可以放在生物安全柜内使用 常见说法和错误认识 不一定 对于远离挥发性有害化学品的侵害 对于远离生物有害气溶胶的侵害 则不是根据实际工作的要求和研究内容 确定使用B类或A类的生物安全柜 B类安全柜和A类相比能提供更好的保护 常见说法和错误认识 某些应用 如研究生物毒素药物的工作 为防止有害物质逃逸 建议连续使用连续使用将降低HEPA滤膜的寿命 所有的生物安全柜应连续工作 常见说法和错误认识 假若房间密闭 没有通风系统 没有什么活动 循环式的A类安全柜可能会把空气净度降至100级 不幸的是 一旦人员进入 将再次被污染 这样做将降低HEPA滤膜的寿命 如果让安全柜连续工作 室内空气洁净度将达到100级 常见说法和错误认识 不一定 HEPA滤膜应在压力差过大时更换 滤膜沾满颗粒 决定滤膜寿命的两大因素 房间内空气污染的程度安全柜工作的时间按时间表更换滤膜 而不考虑滤膜被污染的程度 可能造成不必要的浪费 应每年更换HEPA滤膜 常见说法和错误认识 错 I级安全柜适用于一级 二级和三级安全实验室 级和 级安全柜则适用于所有级别安全实验室 I级安全柜只适用于一级安全实验室 级安全柜只适用于二级安全实验室 级安全柜只适用于三级安全实验室 生物安全柜的选用 1 凡进行有害微生物和转基因操作 均应使用生物安全柜 不可用净化工作台代替2 根据工作性质和防护要求 选用适当级别和型号的生物安全柜3 产品质量4 售后服务 级生物安全柜的性能 1 微生物防护性能2 物理性能3 通过环境试验 基本性能 物理性能 物理性能 生物安全柜的现场检测 安装完毕 投入使用前被移动位置后检修后更换高效过滤器后一年一度常规检测 生物安全柜的必测项目 垂直气流平均速度工作窗口气流流向工作窗口气流平均速度工作区洁净度噪声照度 生物安全柜的必测项目 谢谢