免疫胶体金层析法-hcg.ppt

免疫胶体金层析法,金标记免疫法测HCG,原理,采用胶体金标记抗体，以硝酸纤维素膜为载体，使抗原抗体反应和洗涤在同一渗滤膜上，反应后根据在膜上的颜色判断结果。 以硝酸纤维素膜为载体，利用微孔膜毛细管作用，使膜一端的液体慢慢向另一端渗移，犹如层析, 鼠抗人HCG单抗, 胶体金颗粒, HCG分子,胶体金标记鼠抗人HCG单抗,羊抗鼠IgG,HCG 阳性标本,尿中HCG与金标记的鼠抗人HCG单抗结合形成免疫复合物,在检测线未结合的金标记鼠抗人HCG单抗(IgG)随着尿液上行,到达质控线与羊抗鼠IgG(二抗)结合而显色，作为质控对照。,随层析作用向上移动,至检测线与鼠抗人HCG抗体结合而聚集显色,MAX,HCG 阴性标本,尿中无HCG与金标记的鼠抗人HCG单抗结合形成免疫复合物,在检测线未结合的金标记鼠抗人HCG单抗(IgG)随着尿液上行,到达质控线与羊抗鼠IgG(二抗)结合而显色，作为质控对照。,随层析作用向上移动,至检测线与鼠抗人HCG抗体不结合而不显色,MAX,试纸条失效,金标鼠抗人IgG单抗随层析作用向上移动，到达质控线，无羊抗鼠IgG(二抗)或破坏失效，不结合而 不显色，作为质控对照。,MAX,大便隐血,注意事项,1. 将试条有标志线的下端浸入尿液标本中，深度不可超过标志线（若超过，可能会出现假阳性） 2. 约3秒后取出，平放，5分钟内观察结果(时间不能小于5分钟)：两条红线为(+)，提示尿中含HCG。一条红线为(一)，表示不含HCG。（时间过短，可能有假阴性）,方法学评价,该法为定性检测尿中HCG，不能确定其浓度 因为该法是用单抗来测定HCG，特异性较高， 黄疸、蛋白、血细胞和浑浊度对结果观察都无影响。、 晨尿中一般含有最高的HCG值，检出率较高。 检测时间：HCG一般在受精卵着床后几天才出现在尿液中，而且要达到一定的量才能被检出，因此，对于平时月经正常的妇女需在月经推迟后才可能在尿中检出，二月经周期长或排卵异常的妇女有可能在停经40-44天才能检出 尿液稀释：如果喝水过多使尿液稀释可能会导致假阴性结果。,