《两面针 第1部分 种子质量要求》（征求意见稿）(编制说明）

两面针 第 1 部分 种子质量要求（征求意见稿）编 制 说 明广西壮族自治区中医药研究院2017 年 11 月 12 日1一、 工作概况（一）任务来源与项目编号本标准是广西壮族自治区质量技术监督局下达的 2016 年第六批广西地方标准制定（修订）项目计划（桂质监函2016 324 号文） ，项目编号：201606013。（二）起草单位广西壮族自治区中医药研究院。（三）主要起草人员名单及职务或职称二、 编制标准意义两面针 Zanthoxylum nitidum (Roxb)DC为芸香科花椒属植物，是历版中国药典收载的常用中药，是广西大宗主产特产药材。由于两面针具有良好的行气止痛、活血化瘀、祛风通络作用，成为医药家首选常用之中药，广泛应用于中医处方、中成药及精细化工产品中。据统计，以两面针作为原料的中成药就有 70 余种之多，如三九胃泰、金鸡胶囊、正骨水、外感风痧冲剂等；应研 制人 员 姓名 职务/ 职称现从事专 业所在单位项 目负责人蒋珍藕 主任药师 中药学 广西中医药研究院赖茂祥 研究员 药用植物栽培 广西中医药研究院黄云峰 副研究员 中药资源 广西中医药研究院徐传贵 助理研究员 药用植物栽培 广西中医药研究院胡琦敏 助理研究员 组培学 广西中医药研究院主要参加人员胡仁传 助理研究员 中药资源 广西中医药研究院2用两面针的日用品有两面针中药牙膏、两面针香皂等；在民间和医院处方，两面针广泛用于牙痛、胃痛、腰骨疼痛、关节炎等疾病治疗。全国每年两面针的需求量高达 3000 吨以上。野生资源远不能满足市场需要，开展规范化种植是目前满足市场需求的主要手段，种子是开展规范化种植的重要前提和基础，因此，对两面针种子的质量检验显得尤为重要。目前两面针种子尚未有法定的标准规范（即还没有国家标准、行业标准和地方标准） ，随着种植面积的扩大，两面针种子交易量将不断增加，如无标准规范，易造成品种混杂，种子质量参差不齐，将严重影响两面针药材的生产。制定两面针种子的质量要求，规范两面针种子检验方法和规程，加强两面针种子的质量控制，从源头上把好药材种子种苗质量关，规范两面针药材生产，提高两面针产品质量，为两面针规范化栽培和产业化发展提供有力的保障。三、 标准编制起草及研究过程认真学习中华人民共和国标准法、标准化工作导则、标准制定和产品标准编写规定等相关文件资料，研究确定标准的编写原则和项目的实施方案。参照有关国家标准、中国药典与行业标准，并根据本产品的特点而制定标准。力求标准的各项指标均符合国家相关标准的规定，各项指标的试验方法引用国家相关标准中规定的方法，引用国家标准、中国药典与行业标准，并参照执行。（一）前期研究工作。标准起草小组成员先后承担国家科学技术部攻关课题“两面针种质资源及其评价研究”（项目编号：2004BA721A29）、广西科技厅攻关项目“两面针规范化种植研究与示范”（桂科攻0424008-1B）、广西科技厅攻关项目“两面针种质资源评价及繁育技术研究与示范”（桂科攻0537017-5）、国家中药材扶持资金项目“广西优势中药材两面针良种推广及GAP生产示范基地建设”（项目编号：24）、广西科学研究与技术开发重大专项计划项目“两面针良种选育及规范化种植技术优化研究与示范”（桂科重1598005-12）等课题研究，对两面针的生物学特性、种质资源、繁殖栽培技术、3病虫害防治及采收加工等方面进行了系统研究，掌握了两面针药材生产的关键技术。有十多年的两面针繁育种植实践，并在种苗繁殖技术方面，对两面针种子的生物学特性和发芽特性进行了较深入的研究，为制定两面针种子质量要求打下了良好的基础。（二）2016年3月，成立了以蒋珍藕为组长，赖茂祥、黄云峰、徐传贵、胡琦敏、胡仁传等为组员的标准起草工作小组，并向广西壮族自治区质量技术监督局递交了制定广西地方标准两面针 第1部分 种子质量要求的建议书和申请书，2016年8月获批准立项。（三）任务下达后，标准起草小组及时部署了标准编制的工作方案和小组成员调研、起草工作时间安排表。在标准起草前，研究了两面针的相关文献及种子质量研究方面的资料，并对前期课题研究成果进行了全面整理和总结讨论。在编制过程中，我们在种苗繁殖技术方面，对两面针种子的生物学特性和发芽特性进行了更深入的研究。对两面针的繁殖，我们开展过种子繁殖、扦插繁殖和组织培养快速繁殖的技术研究。起草小组成员还深入灵山县、邕宁县、马山县等两面针种植基地进行实地走访和调查，了解两面针种苗生产现状及药材种植情况。十多年的两面针繁育种植实践，结合对文献资料 1-6分析讨论，我们认为，在两面针的繁殖技术中，目前生产上最易于操作和推广的是种子繁殖和扦插繁殖，全区各地推广种植的主要是实生苗和扦插苗，因此，对两面针种子的研究很重要，对种子的质量控制是保证药材质量的关键环节。经起草小组充分讨论并咨询了相关权威专家，确定了广西地方标准两面针 第1部分 种子质量要求的主要技术内容，形成了标准的基本构架。2017年8月，经过标准起草工作小组成员的多次的修改完善，形成了广西地方标准两面针 第1部分 种子质量要求（征求意见稿）。四、 标准编制原则、依据1、制定本标准的目的是规范广西区内的两面针种子质量，指导今后的两面针种子生产和种苗生产，为药材生产提供优质种子种苗，以促进两面针在广西适宜地区的推广种植。42、本标准的格式和编写方法执行 GB/T 1.1-2009 的规定。3、本标准的制定力求准确、系统，内容与当前两面针种子种苗生产实际紧密结合，可操作性强。五、 标准主要技术内容1、范围本标准规定了广西境内生产和销售的两面针 Zanthoxylum nitidum (Roxb)DC种子的质量要求、检验方法、检验规则、标志、包装、贮藏、运输。2、规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB20464 农作物种子标签通则GB1250 极限数值的表示方法和判定方法GB8170 数值修约规则GB/T 3543.2 农作物种子检验规程 扦样GB/T 3543.3 农作物种子检验规程 净度分析GB/T 3543.4 农作物种子检验规程 发芽试验GB/T 3543.5 农作物种子检验规程 真实性和品种纯度鉴定GB/T 3543.6 农作物种子检验规程 水分测定GB/T 3543.7 农作物种子检验规程 其他项目检验GB/T 7415 主要农作物种子贮藏国家技术监督局令（2005）第 75 号 定量包装商品计量监督管理办法3、主要技术内容及其说明（1）扦样根据广西区内两面针种子的生产、贮藏和销售情况，以及 GB/T 3543.2 的相关要求，提出了种子批的划分方法和扦样的方法，并根据该种子的生物学特性提出了其种子批最大重量，送验样品、试验样品最小重量及样品保存方法。5表 1 试验用各批次种子序号 样品编号 样品来源1 LMZ-1 广西南宁市高峰林场 2015 年收种，新鲜果实2 LMZ -2 广西隆安县屏山镇 2015 年收种，新鲜果实3 LMZ -3 广西大新县榄圩镇 2015 年收种，新鲜果实4 LMZ -4 广西钦州市那利镇 2015 年收种，新鲜果实5 LMZ -5 广西田林县八桂乡 2015 年收种，新鲜果实6 LMZ -6 广西扶绥县昌平镇 2015 年收种，新鲜果实7 LMZ -7 广西邕宁县百济镇 2015 年收种，新鲜果实8910LMZ -8LMZ -9LMZ -10广西灵山县旧州镇 2015 年收种，新鲜果实广西巴马县郊区林场 2015 年收种，新鲜果实广西龙州县响水镇 2015 年收种，新鲜果实种子批的划分方法：按同一来源，同一品种，同一采收期的质量基本一致，在规定数量之内划分种子批。扦样方法：初次样品的扦取、混合样品的配制、送验样品及试验样品的分取，按 GB/T 3543.2 执行。根据广西区内两面针种子的生产、贮藏和销售情况，初步将种子批的最大重量定为 50kg。按 GB/T 3543 的要求，为保证种子样具有代表性， 确定送验样品最小重量为 250g，其中净度分析样品重量为 50g。（2）净度分析按照 GB/T 3543.3（农作物种子检验规程）中净度分析法进行检验。研究了多来源多年份多批次两面针种子样品的组成，对其净种子、杂质、其他植物种子各成分做了分析和界定，其是净度95%的为一级种子、净度 9294.9%的为二级种子。6（3）发芽试验研究按照 GB/T 3543.4 的要求，从不同的发芽温度、光照、发芽床等发芽条件进行发芽试验的研究，并通过多条件多次重复试验的观察，获得两面针种子发芽试验的技术条件。 发芽温度：设 15、20、25、30、355 个恒温培养和 1525及 20 30 2 个变温培养。从实验结果看（表 2） ，25恒温培养在发芽率上表现最好，因此确定 25为其发芽温度。表 2 不同温度发芽率统计表发芽温度（）发芽率（%）露白时间（d）初次计数时间（d）末次计数时间（d）15 0 0 0 6020 12.6 16 30 6025 48.5 15 30 6030 37.2 15 30 6035 28.3 15 30 601525 10.1 16 30 602030 29.2 15 30 60发芽光照：分为光照、部分光照（12h 光照，12h 黑暗） 、黑暗、自然光四种条件，25恒温培养。试验结果表明（表 3） ，两面针在光照和黑暗条件下发芽结果差异不显著，但部分光照条件下发芽率较高；在实验室内检验时，不同季节自然光照不一，可能会对实验结果造成一定的影响。从标准化的角度出发，每天给予固定部分光照的条件更适合其发芽。表 3 不同光照条件对发芽的影响光照条件 初次计数时间（d） 末次计数时间（d） 发芽率（% ）全光照 30 60 47.8部分光照 30 60 48.2黑暗 30 60 47.3自然光 30 60 49.17发芽床：设纸上（TP） 、纸间（BP） 、砂上（TS ） 、砂中（S ） ，25 恒温培养。从发芽率和观察的便利性上考察，以 TP 为宜。根 据 以 上 观 察 和 发 芽 率 统 计 结 果 ， 制 定 两 面 针 种 子 发 芽 试 验 技 术 条 件 （ 表 4） ，并 初 步 拟 定 其发芽率40.0%的为一级种子、发芽率 20.039.9%的为二级种子。表 4 两面针种子发芽试验技术条件发芽床 温度 / 初次计数时间/ d 末次计数时间/ d附加说明，包括破除休眠的建议纸上（TP）25 30 60种子硬实，透水透气性差，需破除休眠后用35浸种20h24 h可充分吸涨。破除硬实建议：砂纸打磨种子或浓硫酸腐蚀5 min。（4）种子真实性和品种纯度鉴定研究采用种子外观形态法，通过对种子形态、大小、颜色等表面特征的鉴定能够快速的检验种子的真实性。鉴别依据见表5。表 5 两面针种子形态特征类别 两面针颜色与种皮特质 种皮黑色，表面光滑，石质大小千粒重 39.145.2g，长 3.4 mm4.9 mm，宽 3.1 mm4.6 mm。种子形状 种子圆形；胚乳白色，2 片，呈椭圆形。果皮 颜色与果皮特质蓇葖果，红色或紫红色，球形，具疣状凸起的油点。两面针种子纯度鉴定按照 GB/T 3543.5 对种子纯度的鉴定方法和计算方法执行。（5）水分测定方法研究按 GB/T 3543.6 的相关要求，采用高温烘干法测定两面针种子含水量。表 6 两面针种子水分测定条件样品名 样品准备 样品大小 /g 温度/ 干燥时间/h两面针 粉碎 10 130133 18两面针种子传统的贮藏方式是湿沙贮藏，以使种子在足够水分的条件下完成胚后熟，在种子失水的情况下会中断后熟作用，使种子失去发芽能力，经实验观察，种子含水量小于 35.0%，种子生活力急剧下降，因此，把种子含水量定为35.0%。（6）重量测定方法研究从方便、快捷、实用的角度考虑，采用百粒法测定两面针种子的千粒重比较适宜，操作方法按 GB/T 3543.7 的规定执行,试验统计结果见表 7。表 7 两面针种子千粒重测定条件观测值指标粒数 (粒) 总重(g) 千粒重（g）100 4.228 42.28100 3.937 39.37100 4.157 41.57100 4.026 40.26100 4.301 43.01100 3.852 38.52100 4.182 41.82100 4.117 41.17100 4.125 41.25鲜重（g ）100 3.917 39.17样本数（N）平均值Mean方差Var标准差SD标准误SEM变异系数CV(%)最大值Max最小值Min偏度Skew峰度Kurt描述性统计分析结果10 40.94 2.31 1.52 0.48 3.74 43.01 38.52 -0.39 -1.26依据样本描述性统计分析，两面针种子千粒重（g）用 MeanSD 表示为40.941.52g，因此规定两面针一级种子千粒重指标为40.9g，规定两面针二级种子千粒重指标为 38.0 40.8。六、 与现行法律法规和标准关系本标准（征求意见稿）制定是在参照国内其他作物的相关标准等国家相关的法规和标准的基础上结合地方实际情况制定出来的，因此与现行法律、法规及强制性标准无冲突。七、 实施标准的要求和建议为保证中药材的质量稳定，应从源头上把好质量关，即从药材种苗繁育技9术的环节上进行控制，对两面针种子进行质量分级研究，保证药材种子种苗纯正、优质，这是实现两面针药材人工栽培需要首先解决的主要问题，本标准的制定将为解决这些问题提供技术指导，建议在两面针 第 1 部分：种子质量要求制定完成后尽快发布实施，使其在两面针药材栽培中发挥积极作用。八、 参考文献1 张振山. 两面针种子休眠特性的研究D. 广州中医药大学, 2015-06-01. 2 张振山，何瑞，詹若挺，等. 两面针种子萌发的物理抑制因素探讨J. 广州中医药大学学报，2016， （3）：411-415. 3 孙世荣，蒋水元，胡永志，等. 两面针繁殖技术研究J. 安徽农业科学， 2008， （16 ）： 6787-6789. 4 何瑞，陈培玲，仰铁锤，等. 两面针种子检验规程初步研究会. 第十届全国药用植物及植物药学术研讨会论文摘要集，2011-08-10. 5 时群，梁刚，蔡林，等. 两面针容器育苗技术J. 林业实用技术， 2012， （5）：32-33. 6 国家技术监督局令（2005）第 75 号 定量包装商品计量监督管理办法两面针 第 1 部分 种子质量要求编制小组2017 年 11 月 12 日