动物繁殖学授课教案

动物繁殖学授课教案第一章 动物的生殖器官（4-6学时）本章内容以动物生殖器官的解剖与功能为主，通过讲授使同学基本掌握雌雄性生殖系统各部分组织器官的解剖特点与生理功能，讲述主要以家畜、家禽及常见经济动物为主，搞清动物生殖器官的特点，为学好以后章节打下基础。（一）雄性的生殖器官1.睾丸：解剖特点、组织结构、生理功能。2.附睾：外形、组织构造、生理功能。3.输精管的构造与作用。4.副性腺：精囊腺、前列腺、尿道球腺的解剖特点、副性腺的生理功能。5.尿生殖道、阴茎。（二）雌性的生殖器官1.卵巢的形状、位置、组织结构、生理功能。2.输卵管和子宫的构造特点、类型与生理功能。3.阴道与外生殖器官的特点。重点难点：睾丸的组织结构与生理功能；卵巢的组织结构、生理功能。思考题：1.雌性、雄性动物生殖器官的结构特点与主要功能是什么？2.试比较马、牛、羊、猪生殖器官的异同点。3.精子为何能在附睾中存活比较长的时间？参考阅读：性腺的发生及性细胞的形成。建议教学方法：课堂讲授为主，辅助以多媒体、模型或标本等。第二章 生殖激素 （5-6学时）激素的作用贯穿于生殖过程的始末，没有生殖激素，生殖活动无法进行，所以学好本章内容，是学好繁殖学的关键。本章主要搞清各种生殖激素的产生、生理作用及其相互间的关系，要求在理解的基础上，加强记忆。（一）概述1.生殖激素的概念2.生殖激素与动物生殖机能的关系3.主要的生殖激素的种类和分泌器官4.生殖激素的作用历程和作用特点（二）神经激素1.促性腺素释放激素2.松果腺激素3.催产素（三）垂体激素1.促卵泡成熟素2.促黄体生成素3.促黄体分泌素（四）性腺激素1.雄性激素性质、功能与用途。2.雌性激素性质、功能与用途。3.孕激素的特点、功能与用途。4.松驰素的性质与功能（五）胎盘激素1胎盘促性腺激素：孕马血清促性腺激素（PMSG）的产生、分泌特点、功能及用途；人类绒毛膜促性腺激素（HCG）的产生、存在特点、功能及应用。2其他胎盘生殖激素：胎盘雌激素，胎盘孕激素，胎盘促乳素，胎盘松驰素。（六）前列腺素1.前列腺素生理功能、前列腺素类似物2.前列腺素在畜牧业中的具体应用（七）外源激素的应用FSH、LH、HCG、PMSG、雌激素、孕酮、PGS等来源、功能、用途、用法和用量。（八）生殖激素的测定方法重点难点：主要的生殖激素的种类、分泌器官及其作用特点。思考题：1.垂体后叶素生理作用有哪些？催产素的产生途径和能够促进分娩的原因是什么？2.说明LH、FSH的生理作用及在脑垂体中二者的含量和比例与发情特点的关系。3.促性腺激素的种类及其作用是什么？4.生殖激素产生的主要器官及其作用特点是什么？5.褪黑激素的生理作用与应用前景如何？6.性腺激素的生理作用有那些？参考阅读：1.其他内分泌素及调节因子对生殖系统的作用2.生殖激素在繁殖中的应用3.生殖激素的测定方法建议教学方法：以课堂讲授为主，辅助多媒体。第三章 性机能成熟与繁殖行为（一 ）初情期与性成熟 1.初情期2.初配年龄（二） 繁殖行为1.性行为2.母性行为和初生动物行为 建议教学方法：以课堂讲授为主，辅助多媒体。第四章 雄性动物生殖生理 （4-5学时）本章教学目的是让同学们了解雄性性机能发育阶段及影响性机能的各种因素，熟悉精子的发生机理与形态结构，精液生理特性及影响因素等，重点是通过学习，让同学们掌握精子、精液理化性质及外界因素的影响。（一）雄性动物的性机能初情期和性成熟，影响雄性动物性机能的因素，初配年龄和采精频率、雄性动物的射精特点，影响雄性动物性功能的外界因素，性机能的神经反射。（二）精子的发生和形态结构精子的发生，精子的产生速度，精子的形态与结构。（三）精液的生理生化特点精液的组成，同一次射精成分的差异，精液的理化特性。（四）精子的生理特性精子的代谢作用，精子的运动特点。（五）外界因素对精子影响：温度、渗透压、pH、稀释、光线、药物、气体，振动与离心的影响。重点难点：1.精子的发生和生理生化特性2.精液的生理生化特点及外界因素对精子的影响思考题：1.外界因素是如何对精子产生影响的？2.精子发生的激素调控机制是什么？3.精子的产生过程是什么？4.精子的结构与运动特点，精液的理化特性有哪些？参考阅读：精子发生过程中的分子调节机制。建议教学方法：课堂讲授辅助多媒体、并结合实验。第五章 雌性动物的发情 （6-8学时）本章主要内容：雌性性机能发育阶段与发情；发情周期中卵巢的变化；发情周期的特点与发情鉴定。重点理解发情周期变化与激素的关系。通过学习掌握各种雌性动物发情规律，能比较准确地判断发情。（一）雌性性机能发育阶段与发情1.发情的概念2.雌性性机能的发育阶段及发情周期的激素调节3.繁殖季节的类型（二）发情周期中的卵巢变化1.卵子的发生及卵子的结构2.卵泡的发育、排卵及黄体的形成（三）雌性动物发情周期的特点1.母牛、母马、母猪、母羊发情周期的特点2.动物的异常发情（四）发情鉴定1.发情鉴定的意义及方法2.发情时卵巢的正常变化重点难点：1.雌性动物发情周期的激素调节2.卵子的发生及结构3.各种动物发情周期的特点及发情鉴定的方法思考题：1.判断卵泡成熟的指标有哪些？2.为什么初情期母牛往往发情不明显？3.简述动物发情周期发生的机理，生殖激素是如何对动物发情周期进行调节的？4.动物为什么会出现异常发情的现象？5.试说明引起雌性动物发情的内分泌调控机制。6.母猪在泌乳期为什么不易出现发情？参考阅读：1.激素对生殖系统的反馈调节2.激素受体的调节与研究进展建议教学方法：结合多媒体进行课堂讲授，并配合电教录像。第六章 受精和妊娠 （4-5学时）受精生理主要阐述受精机理、受精过程及影响因素；妊娠生理是指妊娠过程，母体、胎儿与生殖系统的一系列变化，并据之判断妊娠与妊娠时间。受精和妊娠是雌性动物生殖生理中两个连续阶段。（一）受精生理配子的运行、配子在受精前的准备及受精过程。（二）妊娠与妊娠诊断1.母畜的妊娠2.妊娠诊断重点难点：1.配子在受精前的准备及受精过程2.受精时，精子和卵子发生的反应3.胎膜与胎盘的类型及其特点思考题：1.简述动物的受精过程。2.配子在受精前的准备工作有哪些？3.受精时，精子要发生的反应有哪些？卵子要发生的反应有哪些？4.胎膜与胎盘的类型及其特点是什么？5.怀孕期间母体对胎儿为什么不发生免疫排斥反应？6.异常受精的类型有哪些？双胎是怎么回事？参考阅读：妊娠诊断的方法与实践。建议教学方法：课堂讲授辅助多媒体、电视教学。第七章 分娩与助产（3-4学时）本章也属于雌性生殖生理的一部分。通过学习，主要掌握动物分娩机理与分娩全过程，了解一下助产方法。（一）分娩机理机械刺激、免疫学机理、激素作用引起的分娩、中枢神经对分娩的调控作用、胎儿本身因素对分娩的作用。（二）分娩预兆和分娩过程1.分娩预兆、决定分娩过程的要素2.分娩全过程（三）接产1.产前准备工作2.正常分娩的接产3.难产处理原则、假死胎儿的急救重点难点：分娩机理与分娩预兆，接产及难产的处理。思考题：1.激素与分娩的关系是什么？2.分娩的预兆和过程是什么？3.助产的原则有哪些？参考阅读：动物分娩的调控机制。建议教学方法：课堂讲授、结合电视教学。第八章 人工授精 （4-6学时）本章属于繁殖技术的内容，主要介绍人工授精操作全过程和各技术环节应注意事项和要领。通过学习让学生熟悉和掌握操作程序。（一）概述1.人工授精意义及发展概况2.人工授精发展前景与存在问题（二）器械消毒和精液处理1.器械消毒方法和注意问题2.精液品质检查项目与方法3.精液鉴定指标和受胎率的关系以及精液的稀释与保存（三）精液的冷冻1.精液冷冻保存的概念；精子存活与温度关系。2.各种动物的冷冻精液的制作工艺（四）马（驴）的人工授精采精的方法，精液的稀释与保存，输精技术。（五）牛的人工授精采精的方法，精液的稀释与保存，输精方法。（六）猪的人工授精采精的方法，精液的稀释与保存，输精方法。（七）羊的人工授精采精的方法，精液处理，输精技术。重点难点：精液处理方法与精液的冷冻保存技术。思考题：1.精液稀释液的主要成分、作用及制作方法是什么？2.动物输精的基本要求是什么？3.简述奶牛人工授精的操作程序和注意的有关事项。4.甘油抗冻作用的原因是什么？5.人工授精成功的关键是什么？6.影响精液品质的因素有哪些？7.冷冻精液制作的程序是什么？参考阅读：组织与细胞冷冻保存的原理。建议教学方法：课堂讲授，结合实验、实习和电教录像。第九章 繁殖控制技术（5-6学时）繁殖控制技术包括两部分内容：一部分属于在生产中已应用的一些技术；还有一部分是研究成功或正在进一步研究之中没有在畜牧业生产中推广应用的新技术。这就要求对前一部分详细了解，后一部分简单了解。如胚胎和配子的生物工程只作介绍。本章有个特点，即技术性比较强，需要学生想象力要丰富。（一）发情控制同期发情的依据、方法及各动物同期发情的处理，诱发发情处理和超数排卵的方法及超排技术。（二）诱导分娩（参考）诱导分娩的含义、诱导分娩的意义及机理。第十章 配子与胚胎工程技术（一）胚胎移植1.胚胎移植概述、胚胎移植的生理学基础和原则2.胚胎移植技术过程（二）胚子、胚胎生物工程胚胎切割技术、嵌合体与基因导入、体外受精技术、性别控制技术、胚胎干细胞技术、动物克隆等。重点难点：1.同期发情、诱导发情及超数排卵的处理方法2.胚胎移植的生理学基础和原则思考题：1.发情控制的关键是什么？2.试说明用于超数排卵的激素类型和所起到的作用。3.同期发情的方法及其优缺点。4.胚胎移植的操作步骤是什么？5.动物的性别控制的方法有哪些？6.动物克隆的意义是什么？7.胚胎干细胞的应用前景有哪些方面？8.体外受精的步骤是什么？9.动物转基因的方法有哪些？有何进展？参考阅读：1.胚胎冷冻的机制2.胚胎干细胞制作原理与方法建议教学方法：课堂讲授，并辅助于实验、实习、电教录像等教学方法。第十一章 动物的繁殖力（2学时）本章主要讲授动物繁殖力的考察方法及繁殖障碍的诊治，让学生掌握繁殖力的衡量方法和主要常见不孕症的治疗措施。（一）繁殖力动物的繁殖力，衡量动物的繁殖力的方法及提高繁殖力的措施。（二）动物的繁殖障碍雌性动物繁殖障碍、雄性动物繁殖障碍。重点难点：各种繁殖障碍与疾病的诊治。建议教学方法：以课堂讲授为主。三、考核方式和要求采用闭卷的方式考核学生掌握的知识情况。成绩评定包括考勤、课堂学习、结课考试（或包括其中考试）成绩。结课考试成绩一般占总成绩的6070%,平时成绩占1020%（主看是否有期中考试），还有2030%是实验成绩。要求学生比较全面掌握所学知识，在实践中能独立分析问题解决问题。第二部分：实验教学部分一、说明1、本门课程实验的性质、任务、目的与要求本课程是动物专业的专业基础课和主干课，繁殖技术是动物专业培养计划中六大技能之一。由于其技术性、实践性很强，因此又是动物专业的技术课。本课程为学生掌握动物专业的后续课程和将来从事畜牧业生产，特别是从事繁殖技术领域及相关技术研究与实践奠定良好基础。2、本门课程实验项目设置情况序号实 验 名 称学时必开选开实 验 类 型内 容 提 要验证基本操作综合设计应用创新1 实验器材的清洗与消毒2对实验所用的玻璃器械、金属器械、橡胶器械进行清洗和消毒。2公畜生殖器官的观察1认识生殖器官的形态、大小及特点，为采精打基础。3母畜生殖器官的观察1认识生殖器官的形态、大小及特点，为直肠检查、阴道检查等打基础4动物睾丸和卵巢及附性器官的组织学观察1通过对睾丸、附睾组织切片的观察，了解其组织结构及形态。通过对卵巢、子宫、输卵管组织切片的观察，了解其组织结构及形态。5PMSG或FSH的生物测定3测定PMSG（或FSH）的活性，掌握该激素的简易效价测定方法。6兔超排6掌握超排的方法。7卵子和胚胎形态的观察及评定3熟悉动物卵子的形态结构，区分正常和非正常的胚胎，练习掌握观察胚胎技术。8人工授精器械的认识及假阴道的准备2认识人工授精所用的器械，了解其构造、用途和使用方法，掌握假阴道安装方法。9动物的采精4了解采精的程序和操作要领，掌握动物的采精方法。10精液品质常规检查2掌握检查精子密度、活率的方法，熟悉肉眼检查精液品质的方法。11精子顶体完整率的测定3学习精液抹片染色方法。观察正常精子和异常精子顶体状态，计算顶体完整率。12精子蛋白酶的测定4掌握精子蛋白酶的测定方法。13人工输精2掌握输精的方法。14精液稀释液的配制和PH测定2掌握稀释液配制的基本方法和注意事项，掌握PH的测定方法。15精液的冷冻3了解精液冷冻保存技术的操作过程，基本掌握冷冻精液的制作技术。16阴道图片检查2掌握阴道图片检查鉴定发情的方法。17体外受精掌握体外受精的方法。3.实习项目1动物的发情鉴定3识别母牛、母羊和母猪发情时外部表现、阴道的变化，利用腹腔镜观察发育的卵巢情况，确定是否发情。2牛的人工输精4掌握直肠把握输精的方法。3牛、羊的胚胎移植6通过对牛羊超数排卵同期发情处理，及胚胎移植的学习，了解动物胚胎移植的程序，主要技术环节和操作要领。二、各实验项目教学要求。实验一 实验器材的清洗与消毒一.实验目的通过实验使同学们掌握器材清洗和消毒的方法：煮沸消毒、蒸气消毒、干热消毒、紫外线光消毒、酒精消毒和新吉尔灭浸泡消毒等。二.实验仪器试管、烧杯、三角烧瓶、锥形瓶、吸量管、滴定管、量杯、量筒、人工授精器材等。三.实验内容步骤1、常规实验器材的清洗（1）一般玻璃仪器 （2）量器 （3）金属器械的清洗2、器材的消毒（1）煮沸消毒，适用于一切器皿、生理盐水及稀释液。（2）蒸气消毒，适用一切器皿及稀释液。（3）干热消毒，适用于玻璃器材和金属器械。（4）紫外线光消毒，适用于橡胶、塑料、玻璃器材。 （5）橡胶、塑料等器材可用新吉尔灭浸泡消毒。（6）酒精消毒，适用橡胶、玻璃、金属等器材，一般用70%的酒精消毒。实验二 公畜生殖系统组成及解剖构造的观察一.实验目的要求学生总体上掌握雄性牛、羊、猪和马生殖系统的组成、器官位置、形态和解剖构造。 二.实验材料雄性牛、羊、猪和马生殖器官浸制标本，模型和幻灯片。三.实验内容步骤：1 、睾丸 2、精索 3、输精管4、副性腺5、阴茎 6、包皮实验三 母畜生殖系统组成及解剖构造的观察一.实验目的要求要求学生总体上掌握雌性牛、羊、猪和马生殖系统的组成、器官形态和解剖构造及相互关系。了解各种母畜卵巢的区别、输卵管组成以及子宫的形状特点。 二.实验仪器设备母畜生殖器官浸制标本、模型及幻灯片。三.实验内容步骤1卵巢2输卵管 3子宫 4阴道和外阴部 实验四 睾丸及卵巢的组织学观察1.目的要求通过对雄性动物睾丸组织切片的观察，了解睾丸、附睾组织结构及其形态。了解精子的发生、发育过程及其形态。通过对雌性动物卵巢、子宫、输卵管组织切片的观察，了解卵巢、子宫、输卵管的组织结构及其形态。了解卵子的发生、卵泡的发育过程及其形态。2.实验材料显微镜，动物睾丸、卵巢、子宫、输卵管的组织切片，动物睾丸、卵巢、子宫、输卵管的组织图片（幻灯片）。3.实验内容（1）低倍镜观察被膜 、纵隔和中隔、小叶、附睾。被膜、皮质、髓质。（2）高倍镜观察从睾丸小叶中仔细观察精细管及间质细胞的结构和形态。精细管管壁的外向由结缔组织、基膜和复层的生殖上皮构成。生殖上皮又由生精细胞和支持细胞组成。仔细观察精子发生周期中主要阶段和支持细胞形态。主要观察卵巢皮质部不同发育阶段的卵泡，每个卵泡都由位于中央的卵母细胞和围绕在卵母细胞周围的卵泡细胞组成。作业：分别绘制低倍镜和高倍镜下观察到的动物睾丸和附睾的结构形态图。分别绘制低倍镜和高倍镜下观察到的动物卵巢和子宫的结构形态图。实验五 PMSG的生物测定法1实验目的与原理测定PMSG的活性，掌握该激素的简易效价测定方法。其原理是FSH作用于雌性小白鼠，可促进卵巢上的卵泡发育，分泌雌激素，又可促进子宫、卵巢及整个生殖器官的发育。PMSG因为也含有FSH，因此具有与FSH相同的生物学作用，也能促进性成熟前的小白鼠子宫发育增大。2.实验材料与方法实验动物：健康无伤残的18-23日龄、体重9-13g的同源雌性小白鼠。测定样品：PMSG、生理盐水。测定器具：注射器、剪刀、镊子、搪瓷盘、解剖板、鼠罐和青霉素瓶。测试方法：测试组的确定，小白鼠称重分组，注射，剖检，效价确定等。将各组子宫与对照组比较，每组5只小白鼠中有3只或3只以上子宫增大一倍以上，则定为阳性反应。根据各测试组中呈阳性反应的最低浓度组效价值，换算出被测样品中PMSG的小白鼠单位。作业：掌握PMSG的生物测定方法。实验六 兔超数排卵一.实验目的要求通过实验使同学们掌握超数排卵的原理、方法和实验步骤，了解PMSG和HCG的生物学作用、卵巢反应、排卵点、卵泡发育和胚胎发育状况。二实验仪器1. 实验动物选择品种相同、月龄和体重相似的健康成年未妊母兔25只。2. 药品：FSH、PMSG、HCG、2%盐酸普鲁卡因注射液、静松灵、冲卵液（PBS）、消毒药品。3. 器械：1ml、5ml注射器、5号针头、手术刀、直尖手术剪、剪毛剪、止血钳、创巾、纱布块、塑料细管或玻璃管（直径0.40.5cm）、平皿、缝合针、缝合线、实体显微镜。三实验内容步骤1. 将25只实验兔随机分为5组，按每公斤体重肌注不同的PMSG 0IU 30IU、40IU、50IU和60IU /kg。2. 发情配种，与第一次注射间隔4856小时，用公兔交配或耳静脉注射HCG90IU/kg。3. 配种后4852小时手术冲卵。4. 手术采卵5.冲卵后创口缝合实验七 卵子和胚胎形态的观察及评定一实验目的学习和掌握检卵过程，了解各发育阶段卵子形态结构和检查与评定卵子品质的技能。二实验仪器设备不同发育阶段的胚胎、 卵细胞展片、拔卵针、幻灯片、实体显微镜、检卵杯、平皿、吸卵管等。三实验内容步骤1. 学习在实体显微镜下，如何检卵并进行分类。2. 放大实体显微镜倍数观察卵子形态，绘图标出各部分名称，并认定其发育阶段。 3. 通过图片观察，了解卵子的发育阶段及质量并进行判定。4. 通过幻灯片观察与判断卵子的发育阶段，并评定质量及作好记录。5. 卵子和胚胎形态和结构见下图。实验八 人工授精器材的认识及假阴道的安装一.实验目的要求使学生熟悉家畜人工授精所用的各种器械，了解其用途、构造、原理和使用方法。二实验仪器设备电刺激采精器， 牛、猪、羊、马和兔的假阴道外壳、内胎、集精杯及其保护套、橡皮圈活塞阀、长柄钳子、玻璃棒、温度计、漏斗、镊子、毛巾、脸盆、瓷量杯、粗天平、酒精灯、灭菌凡士林、油、95%与75%酒精棉球、滑石粉等。三实验内容步骤1.各种家畜的采精器材及输精器材（1）猪、马、牛和羊等人工授精器材（2）马的人工授精器材（3）猪的人工授精器材2.采精前假阴道的准备（1）安装内胎及消毒：（2）注水：（3）涂润滑剂：4）调节压力：实验九 采 精一.实验目的要求要求同学们了解采精程序及操作要领，初步掌握各种家畜采精方法。二实验仪器设备公畜、台畜、采精台、假阴道、集精杯、手套、酒精棉球、生理盐水、灭菌纱布、保温瓶、温度计、贮精瓶等。三实验内容步骤1公猪的采精（1）手握采精（2）假阴道采精（3）整理与洗涤假阴道实验十 精液品质的检查一.实验目的要求了解精液品质检查的主要内容和项目，掌握评定精液品质的能力。在老师的指导下，要求学生自己动手完成实验。 二实验仪器设备显微镜及保温箱，载玻片及盖片，精液样本，小吸管，记数器，5%伊红水溶液，10%苯胺黑水溶液。三实验内容步骤1.表观检查（1）射精量（2）色泽：（3）气味：2.精子密度评定（1）估测法（2）血球计算板测定精子密度3.精子活力测定4.精子畸形率的测定实验十一 精子顶体完整率的测定一.实验目的要求要求学生掌握精子顶体完整率测定的原理和方法。二实验材料设备1.器材：载玻片、三角烧杯、玻璃漏斗、细玻璃棒、滴管、100ml容量瓶、25 ml量筒、5 ml、10ml刻度细管、生物显微镜（带油镜）、计数器、扭力天平、镊子、平皿、玻璃研皿、洗染架。2.药品：姬姆萨染料、甘油（A.R）、碳酸镁（A.R）、甲醇（G.R） 、NaH2P03 2H2O（A.R）、 NaHP03 H20（A.R）、氯化钠（A.R）、二甲苯、香柏油、蒸馏水、中性树脂等。三实验步骤1.载玻片的清洗2.涂片3.风干4.固定5.水洗6.染片7.洗片8.镜检实验十二 精子蛋白酶的测定一.实验目的要求要求学生掌握精子蛋白酶的测定方法。二实验仪器设备新鲜精液、明胶蛋白、保温箱、载玻片、盖片、100ml烧杯、滴管、显微镜。三实验内容步骤1. 5%明胶蛋白，放入100ml烧杯中，融化均匀。2. 用镊子夹紧载片的一端，垂直插入5%明胶蛋白的烧杯中，停留一秒钟后迅速提起，然后仍垂直放置，待明胶蛋白自然干燥后待用。3.取新鲜精液一小滴，滴在涂有5%明胶蛋白干后的载玻片上，用盖片进行涂片，将此片在37保温箱中放置 24 小时后观察其结果。若精子含有顶体蛋白酶，则在每一精子周围出现空圈。实验十三 人 工 输 精一实验目的要求了解输精过程，初步掌握各种家畜的输精方法。二实验仪器设备输精器械：阴道开膣器、酒精灯、电筒、润滑剂（ 液体石腊 ）、95% 酒精、75% 酒精、棉球、纱布、精液、稀释液。三实验内容步骤1. 母牛输精（1） 直肠把握子宫颈输精法（2） 阴道开膣器法输精2. 母猪的输精实验十四 精液稀释液的配制及其pH 值测定一.实验目的要求学会精液稀释液的一般配制方法和各种稀释剂的作用，掌握配制过程中消毒基本概念，了解pH值测定的操作方法。二实验仪器设备药品：葡萄糖、蔗糖、柠檬酸钠、抗菌素（青、链霉素）、双蒸水、鸡蛋、甘油等。玻璃器材及其他用品：10Gml量筒，100ml三角烧瓶，玻璃漏斗，1ml注射器，10ml注射器，滤纸，天平，消毒锅，酒精棉球，pH酸度计。三实验内容步骤1.各种成分的准备2.具体配制方法举例3.PH计测定实验十五 精液的冷冻保存一、实验目的要求精子具有受温度变化直接影响本身活动力和代谢能力力的生物学特性。利用这一特性，将精液特殊处理后，保存在超低温下，精子代谢活动完全受到抑制，停止能量消耗，处于生命静止状态，长期保存下来。一旦升温精子又能复苏并维持其原来的受精能力。要求同学们了解精液冷冻保存的技术操作过程和精液冷冻保存原理，初步学会冷冻保存方法。二实验材料和仪器精液、2.9%的柠檬酸钠溶液、50100ml烧杯、滴管、10 ml试管、低温温度计、2080目纱网、漏勺、灭菌纱布袋、液氮罐、液氮、载玻片、盖玻片、显微镜、保温箱。三实验内容步骤1.精液稀释2.降温平衡3.初冻4.冷冻5.解冻 实验十六 阴道涂片检查一.实验目的要求初步掌握小鼠阴道涂片操作方法，学会通过涂片的细胞学形态的观察，推测卵巢机能和发情周期性的变化。二实验仪器设备性成熟雌性小白鼠若干只、脱脂棉、载玻片、甲醇、姬姆萨染液、生理盐水、染色缸、火柴杆、显微镜。三实验内容步骤（1） 取样（2） 涂片（3） 固定（4）染色（5） 在显微镜下观察实验十七 牛体外受精（IVF）一.实验目的要求通过实验使学生掌握卵巢收集、采卵、检卵、卵子体外成熟、精子获能、体外受精和胚胎培养的全部操作过程，加深体外受精理论的认识和理解。要求学生全面掌握室内无菌操作的规程，作到不污染，能够在老师的指导下独立操作。二实验仪器设备无菌室、离心机、CO2培养箱、酸度计、蒸馏仪、纯水仪、灭菌干燥箱、超净工作台、解剖显微镜、相差显微镜、电子天平、微量移液器、冰箱、冰柜。三实验内容步骤1体外受精所需试液的制备2卵母细胞获得 3体外受精4体外培养5胚胎发育检查 实习一 牛的发情鉴定一实习目的通过实习，使学生掌握牛发情的行为，并判定其在发情周期所处的时间，了解卵巢的变化，为人工输精和胚胎移植作准备，巩固课堂所学理论课内容。二实习内容1外部观察2直肠检查法实习二 牛的人工输精一实习目的人工输精是家畜人工授精的最后一个环节，使将一定量的合格精液，适时而准确地输入到发情母畜的生殖道内适当部位，以达到妊娠为目的的操作技术。通过实习使同学们掌握输精技术，在输精操作过程中严格遵守家畜人工授精技术规程，增强无菌观念，积极采取各种措施，提高家畜人工授精的受胎率。二实习内容1输精器材的准备2精液的准备3母畜的准备 4实习学生的准备 5直肠把握输精法 实习三 牛的胚胎移植一实习目的通过实习使同学们了解胚胎移植的供受体准备、超数排卵、供体母畜的配种、胚胎收集、胚胎的检查、胚胎的保存和培养、胚胎的移植和供体和受体的移植后观察。主要掌握胚胎移植最后一个环节。二实习内容1受体和共体的准备 2供体牛超数排卵 3供体牛的配种4非手术法收集胚胎5胚胎的检查6牛的非手术法胚胎移植7供体和受体的术后观察三、考核方式和成绩评定要求实验过程中以学生的动手操作能力和思考解决问题的能力考核所掌握的技术。实验成绩以平时实验为主，主要以实验操作情况、考勤、实验报告等。实验操作以考核学生的掌握技能情况和熟练程度为主，实验成绩占该课程总成绩的2030%。第三部分：建议使用的教材和参考书目一、使用教材动物繁殖学杨利国主编，中国农业出版社。二、参考书目1家畜繁殖学第二版，北京农业大学主编，中国农业出版社。2 家畜繁殖学第三版，中国农业大学主编，中国农业出版社。3 家畜繁殖原理谢成铁著，江苏科技出版社。4 农畜繁殖学哈佛大学主编（美国）。5 动物繁殖生物技术桑润滋主编，中国农业出版社。6 动物生殖调控王建辰、章孝荣主编，安徽科学技术出版社。7 动物发育生物学李云龙、刘春巧主编，山东科学技术出版社。8 受精生物学陈大元主编，科学出版社。