疟原虫检查sop

南方医科大学第三附属医院检验科SOP文件疟原虫检查文件编号：JYK-LJ-010打印册数：2编 写 者：马珊玲审 核 者：刘京平审核日期：2012-03-01页 码：4 共4页1 目的：检测有无疟原虫感染。2 取材：静脉穿刺抽取外周血，EDTA抗凝。3 操作：3.1.薄血片法3.1.1.取外周血1滴于载玻片上，以常法推制成薄涂片。3.1.2血膜完全干燥后即可染色。用瑞氏-姬姆萨复合染色或瑞氏染色法均可。干后镜检。3.2厚血片法3.2.1在洁净玻片上，滴患者血液2滴。3.2.2用推玻片将血液由内向外转涂成直径约1cm厚薄的血膜，在室温中自然干燥。3.2.3在干燥的血膜上滴加蒸馏水数滴，完全覆盖血膜，溶血约5min。脱去血红蛋白的血膜呈浅灰色，倾去溶血液。3.2.4不必待干，进行染色，染色法同薄片。3.2.5干后镜检（结果见附表和附图）4. 注意事项： 4.1采血时间 间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10h左右采血，此时，早期滋养体已发育成易于鉴别形态的晚期滋养体；恶性疟患者，应在发作后20h左右采血。4.2厚血片的溶血要及时，溶血不完全，会影响检验质量。厚血片的存放期限在夏季不超过48h，冬季不超过72h。4.3染色后，水洗时不要先倒去染液，应让流水把染液带走，使沉渣漂浮冲走。4.4油镜检查，薄片须至少检查100个视野，厚血片至少检查20个视野，才能报告“未检出疟原虫”。4.5疟原虫必须分类报告。找到环状体后，须再仔细寻找更为成熟的阶段，以便分类；如确实未找到更为成熟的疟疾原虫，可报告为“检出环状体疟原虫”。4.6有可能出现2种或3种疟原虫混合感染时，以间日疟与恶性疟原虫混合感染最为常见，须注意鉴别。4.7注意易与疟原虫混淆的其他杂物区别，特别是厚血片检查时，应在薄片上仔细寻找证实才能报告。除上述3种疟原虫外，在我国云南曾发现过少数卵形疟原虫引起的病例。卵形疟原虫的形态基本上与三日疟原虫相似，但虫体稍大，受感染的红细胞略胀大，且红细胞边缘是不整齐锯齿状，滋养体后期及裂殖体前期的原虫呈圆形或卵圆形。附表：薄血片上3种疟原虫形态特点：形态特点间日疟原虫三日疟原虫恶性疟原虫（ 环 状 体）早 期 滋 养 体虫体大小较大，约为红细胞的1/3较大，约为红细胞的1/3较小，约为红细胞的1/6细胞浆浅蓝色，呈较薄之环状浅蓝色，呈较厚之环状浅蓝色，环状较细，常位于细胞边缘，有时1个细胞内有2个环状体染色质可很大，甚至充满整个红细胞与间日疟原虫同红色小点，1个环状体具有1-2个-或更多晚 期 滋 养 体虫体大小可很大，甚至充满整个红细胞较小末梢血液中查不到细胞浆呈阿米巴状，变化很多呈坚实带状，变化不多疟色素棕黄色，呈微小短杆状，四散分布黄绿色，呈较粗颗粒状，四散分布斑点薛氏小点，鲜红细小，均匀分布齐氏小点，红色裂 殖 体虫体大小很大较小在末梢血液中查不到细胞浆松散，比较不规则坚实较圆裂殖子数目12-24个，平均16个6-12个裂殖子形态排列不规则排列不规则或呈花朵状配 子 母 体虫体大小圆形，约为红细胞1/2以上圆形，与红细胞等大或较小半月形，两端钝圆（雄），两端较尖（雌）细胞浆深蓝色深蓝色蓝色染色质结实，深红色，位于一边结实，深红色，位于一边结实，深红色，位于中央疟色素沿边分布沿边分布黑褐色，集于中央红细胞胀大，色较淡正常或缩小正常，偶然缩小，色深附图：镜下所见疟原虫形态：间日疟原虫三日疟原虫恶性疟原虫环状体滋养体裂殖体配子体