衣原体和支原体的检测实验课

衣原体和支原体的检测一、 衣原体抗原的检测衣原体抗原检测试剂盒（胶体金法）【检验原理】衣原体按其特性分为三类：沙眼衣原体（Chlamydia Trachomatis）、鹦鹉热衣原体(Chlamydia Psittas)和肺炎衣原体（Chlamydia Pneumoniae）。沙眼衣原体有15个已知的血清型，其中12个血清型与沙眼和生殖道的感染有关；另外3个则与性病性淋巴肉芽肿（Lymphor Ganuloma Venereun, LGV）的发生有关。沙眼衣原体抗原检测试剂盒（胶体金法）系用抗衣原体脂多糖单克隆抗体和羊抗鼠IgG多克隆抗体分别固定于固相硝酸纤维素膜，并和胶体金标记的另一抗衣原体脂多糖单克隆抗体及其他试剂和原料制成，应用胶体金免疫层析技术，采用双抗体夹心的形式建立的衣原体检测方法，用于女性宫颈和男性尿道中沙眼衣原体抗原的检测。在实验过程中，将所得到的临床样品放入含有溶液A的样品处理管中，2分钟后，加入等量的溶液B，充分混匀后滴2-3滴在检测试剂盒的加样孔中，然后等待结果出现。在检测试剂盒的硝酸纤维薄膜的检测线上固定有抗衣原体脂多糖单克隆抗体-；质控线上固定有羊抗鼠IgG的抗体。处理后的样品首先与结合了抗衣原体单克隆抗体-的胶体金颗粒混合，并靠毛细管作用使混合液向检测线移动。如果样品中含有沙眼衣原体抗原，则沙眼衣原体抗原会与胶体金复合物及检测线上的单克隆抗体结合形成双抗体夹心复合物，并聚集在检测线上显现出一条可见的红线，此即为阳性结果。无此红线则表示样品中无沙眼衣原体抗原存在，即为阴性结果。在试纸条上的质控区（C）包被有羊抗鼠IgG，以指示试剂盒反应系统工作是否正常。质控区（C）色带的出现表明：样品加入量充足 样品在纸条上运行正常。【主要组成成份】 沙眼衣原体抗原快速检测试剂卡：内含一条包被有抗衣原体脂多糖单克隆抗体-、抗衣原体脂多糖单克隆抗体-和羊抗鼠IgG试纸条。单人份铝箔袋包装。 溶液A 1瓶（含0.2M NaOH溶液，7.5ml）。 溶液B 1瓶（含0.2M HCl溶液，7.5ml）。 样品处理管。 其他如女性取样用消毒宫颈拭子、男性取样用男用消毒拭子及计时器未在包装中提供，请自备。【样本要求】 取样的质量对沙眼衣原体的检测极为重要。沙眼衣原体的检测质量有赖于准确的样品收集技术，应使样品中含有大量的细胞成分而不只是体液。 宫颈样品： 使用消毒宫颈拭子，或消毒的亚麻、涤纶拭子。在取样前用另外的拭子或棉球将宫颈口外区域的黏液抹去，将取样拭子插入宫颈管内通过鳞柱状上皮交界处，直到几乎拭子头已看不到。旋转拭子15-20秒钟取出，不要碰到宫颈外及阴道壁。这样能保证得到更多的柱状上皮细胞，而沙眼衣原体主要寄生在柱状上皮细胞中。 宫颈样品也可用细胞刷（未提供）收集（注意：孕妇不可用此方法）。清洁宫颈口外后，将细胞刷插入宫颈管，通过鳞柱状上皮细胞交界处，停留2-3秒钟，旋转细胞刷两圈后取出，注意不要碰到阴道壁。 如果检测可以即刻进行，将取样后的拭子放入样品处理管中。男性尿道样品： 尿道用拭子或细胞刷（未提供）可用于尿道取样。病人在取样前至少1小时内不要小便。将拭子或细胞刷插入尿道2-4厘米，旋转3-5秒钟后取出。如果检测可以即刻进行，将取样后的拭子放入样品处理管中。每个同学取无菌棉签在无菌生理盐水中湿润后取眼角分泌物后进行衣原体的筛查。【检验方法】A.处理样品和对照：宫颈拭子、尿道拭子的处理：将样品处理管放在工作台上，加入6滴溶液A。将采样拭子放入含有溶液A的样品处理管中，室温放置，在处理过程中不断旋转并在管壁挤压拭子，使液体不断被挤出，重复多次，处理2分钟。然后加入6滴溶液B，旋转并挤压拭子，尽量使液体流出，然后按感染物品的处理方法将拭子丢弃。处理后的样品如在60分钟内使用，并不影响试剂盒的检测结果。注意：用A、B液处理样本拭子滴加的溶液量应相等。B.检测步骤：请在操作前仔细阅读检测试剂盒说明书。将检测试剂盒从密封袋中取出，放置在洁净、干燥和水平的工作台上，标明样品编号或名称。如果检测试剂盒保存于低于室温处，须将检测试剂盒及试剂提前取出，放至室温后方可使用。将样品处理管中已处理的样品滴加23滴至检测试剂盒的加样孔中。等待结果的出现。加样10分钟时可判读结果。红线显示的时间根据拭子所采集沙眼衣原体含量的不同而变化，有些阳性样品可在60秒钟后出现结果。为了确保阴性结果，请勿在15分钟后判断结果。为保证检测结果的正确性，在检验前可使用生产厂家提供的阳性、阴性质控对照品检测。【检验结果的解释】阴性结果：仅质控线（C）有一条红线，检测线（T）无红线出现。阳性结果：除质控线外，另有一条红线出现在检测线（T）。无效结果：质控线不出现红线，则结果无效。应更换新的检测试剂盒重复实验。可用剩余的已处理的样品或重新取样。注意：当检测线很强时，质控线可能相对减弱，此属正常现象思考题1、衣原体的培养方法有那些种，举例怎样才能确诊衣原体感染？二、支原体的筛查（培养法） 几种主要支原体的生化特性种类葡萄糖精氨酸尿素肺炎支原体+-生殖支原体+-人型支原体-+-溶脲脲原体-+ 检测原理本试剂盒适用于解脲原体和人型支原原体的分离培养及药物敏感性试验。试剂盒主要由支原体培养基和检测卡组成，培养基中含有支原体基础肉汤、马血清、酵母提取液、酚红指示剂、混合抗生素、生长因子、尿素和精氨酸等物质，当Uu和Mh生长时，尿素和精氨酸分解生成的碱性物质引起pH上值上升，培养基由黄色变成红色。培养基内加有抑菌剂，可抑制生殖道中的细菌和真菌的生长。主要组成成份1、支原体培养基本功 20瓶2、检测卡 20条3、无菌矿物油 12ml*4瓶4、使用说明书 1份 标本的采集必需在用药前采集标本，支原体对细胞表面有很强的亲和力，应尽可能多收集细胞，标本采集后应尽快接种，不可在室温或普通冰箱久存，以免拭子干燥而使支原体活力降低甚至死亡。男性：用男性无菌拭子由前尿道12cm处取尿液分泌物，根据病情需要，也可取前列腺按摩液、精液。女性：采集宫颈分泌物，村本采集时应先擦去宫颈口多余粘液，再用另一支拭子在宫颈管内12cm处取宫颈分泌物。取材时要在宫颈内旋转并至少停留20秒，以便获得较多的细胞。如果必须用尿液做支原体培养，可留取清晨中段尿1020ml，高速离心后，取沉淀物接种，但尿液支原体培养的阳率明显低于尿道（或宫颈）分泌物。检测方法本试验应注意无菌操作，避免污染。1、用无菌吸头吸取培养基100l加入检测卡C-空白孔。2、将采集的标本拭子插入培养瓶，在靠近液面上方的瓶壁挤压旋转拭子数次，使拭子中样本渗入；若为精液、前列腺液标本，取200l加入培养基中；若为中段尿，经2000转/分离心10分钟，取沉渣100l加入培养基中。3、充分混匀接种标本中的培养基，取100l加入检测卡的各孔中（除C-孔）。4、各孔滴加1-2滴无菌矿物油，盖上检测卡盖，置3537孵箱培养，在24h和48h分别观察结果。检验结果解释1、阴阳性结果判定标准：黄色或橙黄色阴性（-）；清晰透明红色阳性（+）；混浊红色污染。2、C-孔（空白孔）应为阴性，若为阳性表示有污染，本次试验无效。3、C+孔（对照孔）阴性（48h），可报告无Uu和Mh生长。4、C+孔（对照孔）阳性，应观察和记录其余各孔的结果，按下判读：类型结果判定分离培养孔Uu孔（+）Uu104孔24h（+）检出解脲支原体阳性（Uu104cfu）Uu孔（+）Uu104孔24h（-）检出解脲支原体阳性（Uu104cfu）Mh孔（+）Mh104孔48h（+）检出人型支原体阳性（Uu104cfu）Mh孔（+）Mh104孔48h（-）检出人型支原体阳性（Mh104cfu）药敏孔每种药物设低（上孔）、高（下孔）两个浓度上孔（-）下孔（-）为敏感（S）上孔（+）下孔（-）为中度敏感（I）上孔（+）下孔（+）为耐药（R）注意事项1、请注意有效期，在有效期内使用，不同批号的试剂不要混用。2、月经期、先兆流产妇女禁用，阴道用药或灌洗后禁用。3、使用前应仔细阅读说明书，使用前发现培养浑浊、沉淀等不应使用。4、应正确采集标本，及时接种培养基和操作程序规范是提高阳性检出率和准确性的关键。5、培养基复溶后，在接种检测卡前必须充分摇匀，如果标本的浓度很低检测卡微孔可能不改变颜色或颜色改变不均匀。6、标本做药物敏感性实验，其中并没有考虑标本中支原体的浓度，实验中可能观察到接种浓度差异引起的菌株实际敏感性和检测卡测得的结果不同的情况。7、支原体生长培养基应保持透明清亮，遇杂菌污染引起浑浊变红不应报告支原体阳性（但部分含分泌物较多的样本，接种到培养基中可能引起培养基澄清度降低，请注意区别）。8、因为大部分标本是不均一的分泌物，或者标本中支原体浓度较低，可能导致检测卡微孔接种量不均一，药物敏感性试验结果不合理（高浓度孔有支原体生长，低浓度孔没有支原体生长）。这样的实验结果没有意义，请重做药物敏感性实验或弃用此药物。9、本产品仅用于体外诊断，供一次性使用，检测卡外包装如有破损，请勿使用。10、操作过程必须有必要的防护措施以防止操作人员感染，废弃物应作为传染源处理。 检验方法的局限性1、检测结果很大程度上依赖于标本的采集，所以一次的阴性结果并不能确定没有感染。2、阳性结果指示泌尿生殖道支原体的存在，但并不能作为充分的临床诊断依据，临床的诊断需与临床症状相结合。3、Uu的判读必须在24小时，而Mh的判读必须在48小时进行判读。思考题1、临床引起泌尿生殖道的支原体有那些，各引起那些疾病，怎样去诊断？下面是赠送的团队管理名言学习，不需要的朋友可以编辑删除！谢谢！1、沟通是管理的浓缩。2、管理被人们称之为是一门综合艺术-“综合”是因为管理涉及基本原理、自我认知、智慧和领导力；“艺术”是因为管理是实践和应用。3、管理得好的工厂，总是单调乏味，没有任何激动人心的事件发生。4、管理工作中最重要的是：人正确的事，而不是正确的做事。5、管理就是沟通、沟通再沟通。6、管理就是界定企业的使命，并激励和组织人力资源去实现这个使命。界定使命是企业家的任务，而激励与组织人力资源是领导力的范畴，二者的结合就是管理。7、管理是一种实践，其本质不在于“知”而在于“行”；其验证不在于逻辑，而在于成果；其唯一权威就是成就。8、管理者的最基本能力：有效沟通。9、合作是一切团队繁荣的根本。10、将合适的人请上车，不合适的人请下车。11、领导不是某个人坐在马上指挥他的部队，而是通过别人的成功来获得自己的成功。12、企业的成功靠团队，而不是靠个人。13、企业管理过去是沟通，现在是沟通，未来还是沟通。14、赏善而不罚恶，则乱。罚恶而不赏善，亦乱。15、赏识导致成功，抱怨导致失败。16、世界上没有两个人是完全相同的，但是我们期待每个人工作时，都拥有许多相同的特质。17、首先是管好自己，对自己言行的管理，对自己形象的管理，然后再去影响别人，用言行带动别人。18、首先要说的是，CEO要承担责任，而不是“权力”。你不能用工作所具有的权力来界定工作，而只能用你对这项工作所产生的结果来界定。CEO要对组织的使命和行动以及价值观和结果负责。19、团队精神是从生活和教育中不断地培养规范出来的。研究发现，从小没有培养好团队精神，长大以后即使天天培训，效果并不是很理想。因为人的思想是从小造就的，小时候如果没有注意到，长大以后再重新培养团队精神其实是很困难的。20、团队精神要从经理人自身做起，经理人更要带头遵守企业规定，让技术及素质较高的指导较差的，以团队的荣誉就是个人的骄傲启能启智，互利共生，互惠成长，不断地逐渐培养员工的团队意识和集体观念。21、一家企业如果真的像一个团队，从领导开始就要严格地遵守这家企业的规章。整家企业如果是个团队，整个国家如果是个团队，那么自己的领导要身先士卒带头做好，自己先树立起这种规章的威严，再要求下面的人去遵守这种规章，这个才叫做团队。22、已所不欲，勿施于人。23、卓有成效的管理者善于用人之长。24、做企业没有奇迹而言的，凡是创造奇迹的，一定会被超过。企业不能跳跃，就一定是（循着）一个规律，一步一个脚印地走。25、大成功靠团队，小成功靠个人。26、不善于倾听不同的声音，是管理者最大的疏忽。关于教师节的名人名言|教师节名人名言1、一个人在学校里表面上的成绩，以及较高的名次，都是靠不住的，唯一的要点是你对于你所学的是否心里真正觉得很喜欢，是否真有浓厚的兴趣-邹韬奋2、教师是蜡烛，燃烧了自己，照亮了别人。-佚名3、使学生对教师尊敬的惟一源泉在于教师的德和才。-爱因斯坦4、三人行必有我师焉；择其善者而从之，其不善者而改之。-孔子5、在我们的教育中，往往只是为着实用和实际的目的，过分强调单纯智育的态度，已经直接导致对伦理教育的损害。-爱因斯坦6、举世不师，故道益离。-柳宗元7、古之学者必严其师，师严然后道尊。-欧阳修8、教师要以父母般的感情对待学生。-昆体良9、机会对于不能利用它的人又有什么用呢？正如风只对于能利用它的人才是动力。-西蒙10、一日为师，终身为父。-关汉卿11、要尊重儿童，不要急于对他作出或好或坏的评判。-卢梭12、捧着一颗心来，不带半根草去。-陶行知13、君子藏器于身，待时而动。-佚名14、教师不仅是知识的传播者，而且是模范。-布鲁纳15、教师是人类灵魂的工程师。-斯大林16、学者必求师，从师不可不谨也。-程颐17、假定美德既知识，那么无可怀疑美德是由教育而来的。-苏格拉底18、好花盛开，就该尽先摘，慎莫待美景难再，否则一瞬间，它就要凋零萎谢，落在尘埃。-莎士比亚19、养体开智以外，又以德育为重。-康有为20、无贵无贱，无长无少，道之所存，师之所存也。-韩愈21、谁若是有一刹那的胆怯，也许就放走了幸运在这一刹那间对他伸出来的香饵。-大仲马22、学贵得师，亦贵得友。-唐甄23、故欲改革国家，必先改革个人；如何改革个人？唯一方法，厥为教育。-张伯苓24、为学莫重于尊师。-谭嗣同25、愚蠢的行动，能使人陷于贫困；投合时机的行动，却能令人致富。-克拉克26、凡是教师缺乏爱的地方，无论品格还是智慧都不能充分地或自由地发展。-罗素27、不愿向小孩学习的人，不配做小孩的先生。-陶行知28、少年进步则国进步。-梁启超29、弱者坐失良机，强者制造时机，没有时机，这是弱者最好的供词。-佚名有关刻苦学习的格言1、讷讷寡言者未必愚，喋喋利口者未必智。2、勤奋不是嘴上说说而已，而是要实际行动。3、灵感不过是“顽强的劳动而获得的奖赏”。4、天才就是百分之九十九的汗水加百分之一的灵感。5、勤奋和智慧是双胞胎，懒惰和愚蠢是亲兄弟。6、学问渊博的人，懂了还要问；学问浅薄的人，不懂也不问。7、人生在勤，不索何获。8、学问勤中得。学然后知不足。9、勤奋者废寝忘食，懒惰人总没有时间。10、勤奋的人是时间的主人，懒惰的人是时间的奴隶。11、山不厌高，水不厌深。骄傲是跌跤的前奏。12、艺术的大道上荆棘丛生，这也是好事，常人望而却步，只有意志坚强的人例外。13、成功艰苦劳动正确方法少说空话。14、骄傲来自浅薄，狂妄出于无知。骄傲是失败的开头，自满是智慧的尽头。15、不听指点，多绕弯弯。不懂装懂，永世饭桶。16、言过其实，终无大用。知识愈浅，自信愈深。17、智慧源于勤奋，伟大出自平凡。18、你想成为幸福的人吗？但愿你首先学会吃得起苦。19、自古以来学有建树的人，都离不开一个“苦”字。20、天才绝不应鄙视勤奋。21、试试并非受罪，问问并不吃亏。善于发问的人，知识丰富。22、智者千虑，必有一失；愚者千虑，必有一得。23、不要心平气和，不要容你自己昏睡！趁你还年轻，强壮、灵活，要永不疲倦地做好事。24、说大话的人像爆竹，响一声就完了。鉴难明，始能照物；衡唯平，始能权物。25、贵有恒何必三更眠五更起，最无益只怕一日曝十日寒。26、刀钝石上磨，人笨人前学。以人为师能进步。27、宽阔的河平静，博学的人谦虚。秀才不怕衣衫破，就怕肚子没有货。下面是电话销售开场白，不需要的下载后可以编辑删除！电话销售人员所能利用的资源非常有限，仅仅只能通过一部电话在有限的时间内来解决所有问题，不像面对面销售，业务人员可以调动很多工具达到销售的目的。在电话被接通后约30秒内，这时候的开场白是否成功将直接关系到谈话能否继续，如果罗罗嗦嗦不着边际，最后被“扫地出门”也就在情理之中了。因此，“在30秒内抓住对方注意力”成为每一名电话销售人员的一项基本修炼，那如何做到这一点呢？下面提供一些有效的电话销售开场白供销售人员参考：1、电话销售人员：您好，李经理，我是，公司的，有件事情想麻烦一下您！或有件事想请您帮忙！请求帮忙法2、电话销售人员：您好，是李经理吗？我是的朋友，我叫，是他介绍我认识您的，前几天我们刚通了一个电话，在电话中他说您是一个非常和蔼可亲的人，他一直非常敬佩您的才能。在打电话给您之前，他务必叮嘱我要向您问好。第三者介绍法3、电话销售人员：您好，王先生，我是公司的，我们是专业从事电话销售培训的，我打电话给您的原因是因为目前国内的很多IT公司如戴尔、用友、金蝶等都是采用电话销售的方式来销售自己的产品的，我想请教一下贵公司在销售产品的时候有没有用到电话销售呢？牛群效应法4、电话销售人员：您好，李经理，这里是四川航空公司客户服务部，我叫冰冰，今天给您打电话最主要是感谢您对我们川航一直以来的支持，谢谢您！客户：这没什么！电话销售人员：为答谢老顾客对我们公司一直以来的支持，公司特赠送一份礼品表示感谢，这礼品是一张优惠卡，它可以使您在以后的旅行中不管是住酒店还是坐飞机都有机会享受优惠折扣，这张卡是川航和G公司共同推出的，由G公司统一发行，在此，请问李经理您的详细地址是？我们会尽快给您邮寄过来的。巧借“东风”法5、电话销售人员：王总您好，我是G旅行公司的小舒，您曾经在半年前使用过我们的会员卡预订酒店，今天是特意打电话过来感谢您对我们工作的一贯支持，另外有件事情想麻烦一下王总，根据我们系统显示您最近三个月都没有使用它，我想请问一下，是卡丢失了，还是我们的服务有哪些方面做的不到位？老客户回访其他优秀的电话销售开场白：一、以金钱为主题的开场白几乎所有的人都对钱感兴趣，省钱和赚钱的方法很容易引起客户的兴趣。如：“张经理，我是来告诉你贵公司节省一半电费的方法。”“王厂长，我们的机器比你目前的机器速度快、耗电少、更精确，能降低你的生产成本。”“陈厂长，你愿意每年在毛巾生产上节约5万元吗” 要有多勇敢，才敢念念不忘我带著怎样的心情看完了结局，又带著怎样的心情默默离场。这场最后的离别，我们只能各自转身，各奔天涯也许，失去比起拥有会让人更安心，因为不再害怕失去。你说的最伤人的话不是我不爱你了，而是我从没爱过你。别来爱我，我没太多把握，别来爱我，无法给你什么你是谁的谁，又为谁流眼泪，她是谁的谁，心疼又为了谁幸福需要你和我，爱情需要你和我我和我最后的倔强， 握紧双手绝对不放。我的天真早已碎成遍地的忐忑，努力拼凑着却再也无法完整流星雨又来临，似乎在诉说我们的秘密。我已经选择把你埋藏在我心里最深处，你如愿了把。不是路到了尽头，只需转个弯，继续往前走。放荡的背后是一颗破碎的心。再华丽的语言，也诉说不出我内心最爱你的人是我，你怎么舍得我难过。请别消失在我的生活，我会没有快乐的理由把你放在我左胸口的位置，让我听见你最清晰的心跳也曾经让你哭，陪你流泪 转眼间你用爱，把我包围我就是因为太爱你，我就是因为太想你一句亲爱让心停止节奏，一句哈尼让眼泪断了线没有你的天空，没有云朵，没有你的世界，没有光明只是想说，我想他情不自禁，只是想说，我念她不由自已有我，再黑也别怕 有你，再黑都不怕