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几种磷酸缓冲液的配制方法介绍本篇文章由专业 生化试剂供应商岚兴为您提供。磷酸缓冲液也叫做磷酸盐缓冲液,英文名为 Phosphate Buffer ,是生物化学研 究中使用最为广泛的一种缓冲液,磷酸缓冲液的配制我们一起来了解一下。首先, 按照下表所给定的体积,混合1 mol/L的磷酸二氢钠 仲碱)和1mol/L磷酸氢 二钠(双碱)贮液,获得所需pH的磷酸缓冲液。配制1 mol/L 的磷酸二氢钠(NaH2PO4?H2O)贮液:溶解138g于足量水中, 使终体积为1L;1mol/L 磷酸氢二钠(Na2HPO4)贮液:溶解142g于足量水中使 终体积为1L。1mol/L 磷酸二氢钠(ml) lmol/L 磷酸氢二钠(ml)最终pH值877 133 6.0850 150 6.1815 185 6.2775 225 6.3735 265 6.4 685 315 6.5625 375 6.6565 435 6.7510 490 6.8450 550 6.9 390 610 7.0 330 670 7.1280 720 7.20.1mol/L是在1L水中含有的磷酸盐物质的总摩尔。用磷酸氢二钠和磷酸二氢钠做缓冲液其浓度为:磷酸氢二钠20.7472g/L;磷酸二氢钠3.1167g/L。即若配制100mL,则在100ml水中加入2.0747g磷酸氢二钠和0.3117g磷酸二氢 钠。通常使用的磷酸钠缓冲液有磷酸钠缓冲液 (NaH2PO4&Na2HPO4) 和磷酸钾缓 冲液(K2HPO4&KH2PO4),由于它们有二级解离,缓冲的pH值范围很广。那 么,各种PH值的磷酸盐缓冲液如何配置?各种PH值的磷酸盐缓冲液的配制磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠38.0g,与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH2.0)甲液:取磷酸16.6ml,加水至1000ml,摇匀。乙液:取磷酸氢二钠71.63g,加 水使溶解成1000ml 0取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液(PH2.5)取磷酸二氢钾100g,加水800ml,用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。磷酸盐缓冲液(pH5.0)取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0,即得。磷酸盐缓冲液(pH5.8)取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH6.5)取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml,用水稀释至100ml, 即得。磷酸盐缓冲液(pH6.6)取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g,加水使溶解成400ml , 即得。磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8)取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8;另取胰酶10g,加水适量使溶解,将两液混合后,加水稀释至1000ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH6.8)取0.2mol/L 磷酸二氢钾溶液250ml,加0.2mol/L 氢氧化钠溶液118ml,用水稀释至1000ml,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.0)取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml,用水稀释至100ml, 即得。磷酸盐缓冲液(pH7.2)取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml,加新沸过的冷水稀释至200ml,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.3)取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml,调节pH 值至7.3,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.4)取磷酸二氢钾1.36g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml,用水稀释至200ml, 即得。磷酸盐缓冲液(pH7.6)取磷酸二氢钾27.22g,加水使溶解成1000ml,取50ml,力卩0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml,再加水稀释至200ml,即得。磷酸盐缓冲液(PH7.8)甲液:取磷酸氢二钠35.9g,加水溶解,并稀释至500ml 。乙液:取磷酸二氢钠2.76g,加水溶解,并稀释至100ml。取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.88.0)取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g,加水使溶解成1000ml,即得。上文就是对磷酸缓冲液的配制的介绍,磷酸缓冲液易配制各种浓度的缓冲液, 而 且适用的pH值范围宽,可配置各种pH值的缓冲液,同时pH受温度影响较小, 还具有较强的缓冲能力缓冲液被稀释后 pH变化小。
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