临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法PPT课件

1234567891011121314一定体积的痰1.5倍体积的USP溶液,震荡30-40s10-15ml蒸馏水，室温放置5-10min5000g室温离心10-15min，弃上清500ul无菌0.05%Tween80溶解或重悬20000g室温离心10-15min，弃上清加入5倍10%chelex-100，混匀，90温育40min20000g室温离心5min取5ul用于PCR扩增1550ul痰6000g离心10分钟，弃上清加入裂解液50ul，60温育30min90温育30min加入Tris-HCl中和以上反应混合物取5ul用于PCR检测16171819202122乳汁标本离心6000rpm，5min，弃上清脂质和沉淀用750ul裂解液重悬重悬液移入含100mg玻璃珠离心管搅拌煮沸5min，离心14000rpm，3min650ul上清转移到另一离心管中，等体积异丙醇沉淀70%乙醇洗涤沉淀，干燥50ul Tris-EDTA溶解沉淀即可用于PCR扩增232425262728293031323334353637383940414243444546474849505152535455谢谢！谢谢！565758596061626364