饲料中添加亚麻籽对蛋鸡蛋黄富集DHA和EPA的影响硕士毕业论文

分类号： 密 级： U D C： 导师邮箱：yanghuanmin2011届攻读硕士学位研究生学位（毕业）论文饲料中添加亚麻籽对蛋鸡蛋黄富集DHA和EPA的影响The Effect of Supplemental Linseed into Diet on DHA and EPA in Chickens学科、 专业： 基础兽医学研 究 方 向： 动物营养生理学研 究 生： 指 导 教 师： 完 成 日 期： 2011年4月中国 大庆42 独 创 性 声 明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得黑龙江八一农垦大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名： 时间： 年 月 日关于论文使用授权的说明本人完全了解黑龙江八一农垦大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意黑龙江八一农垦大学可以用不同方式在不同刊物上发表，传播学位论文的全部或部分内容。 (保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生签名： 时间： 年 月 日导师签名： 时间： 年 月 日摘 要本研究以550只海蓝粉蛋鸡为实验对象，探讨日粮中添加不同含量亚麻籽对蛋鸡生产性能及蛋黄内DHA和EPA含量的影响，并确定蛋鸡饲料中亚麻籽的最佳添加剂量。本试验采用单因素两水平试验设计，以海蓝粉蛋鸡为试验对象，随机选取550只的海蓝粉蛋鸡，分成3组。对照组饲喂基础日粮，试验组在基础日粮中添加6%亚麻籽，试验组在基础日粮中添加10%亚麻籽。预饲3天，正饲30天，以5天为1个试验期，共6个试验期。正饲开始后每隔5天，随机在每个处理组中取20枚鸡蛋，用做蛋黄中DHA、EPA变化过程的研究。另从5个不同鸡蛋销售点购买不同商品鸡蛋各10枚，与试验鸡场鸡蛋蛋黄中DHA、EPA含量进行对比检测。研究结果表明：全期饲养试验中，添加6%和10%亚麻籽功能性饲料可以显著提高蛋鸡蛋鸡的每天的平均总蛋重（P0.05）。6%亚麻籽添加组在不同试验期，可不同程度地提高蛋鸡的生产性能，效果较10%亚麻籽添加组好。在整个试验期间，饲喂普通饲料生产的鸡蛋蛋黄中DHA和EPA含量没有显著变化（P0.05）。饲喂含有6%亚麻籽的饲料可以提高蛋黄中DHA含量，降低EPA含量，且DHA沉积量呈现逐渐增加的趋势。饲喂含有10%亚麻籽饲料后蛋黄中DHA沉积量呈现迅速提高的趋势，随饲喂时间的延长对DHA的蓄积能力逐渐减弱；而EPA呈现先提高后降低的趋势。随着饲喂亚麻籽时间的延长，DHA与EPA总量呈现降低的趋势。与5个不同产地市售鸡蛋相比，试验鸡场鸡蛋蛋黄中DHA和EPA含量差异不显著，饲喂亚麻籽饲料有提高蛋黄中DHA含量，降低EPA含量的趋势，但总量没有显著差异（P0.05）。饲喂含有粉碎的亚麻籽的饲料可以提高蛋黄中DHA的含量，降低EPA的含量，但对两者总量无明显影响，6%亚麻籽组效果较10%亚麻籽组好。关键词：亚麻籽；蛋鸡；生产性能；DHA；EPAAbstract550 laying hens were divided in to 3 groups randomly, to study the effect of different dose of linseeds in diets on growth performance, DHA and EPA concentration in egg yolk, and to assure the best dose of linseeds in diet of laying hens.The control group were fed with basial diets, trial group were fed with basial diets plus 6% linseeds, trial group were fed with basial diets plus 10% linseeds. Prefeeding was 3 d, formal feeding was conducted till 30d, each trial was 5d, total of 6 trial terms were performed. 20 eggs were picked up in every 5 days from each group randomly, to study the changing process of DHA and EPA in egg yolk. As while, 10 eggs were bought from each of other 5 commercial store, to compare the concentration of DHA and EPA with trial eggs.The results showed: In the whole trial period, average total egg weight in trial groupand trial group were significantly increased compared with the control group (P0.05). In differ trial term, growth performances of laying hens fed with diets plus 6% linseeds were raised in differenct level, better than laying hens fed with diets plus 10% linseeds. In the whole trial period, concentration of DHA and EPA in egg yolk in control group was not changed notably (P0.05). DHA in egg yolk in group fed with 6% linseeds was increased gradually as long as the trial went, and were raised significantly in several trial terms comparable with the control group (P0.05).Generally, linseed could raise DHA concentration but reduce EPA concentration in egg yolk, and did not change the total concentration of DHA plus EPA. 6% linseed was better than 10% linseed to get a good result. Key words: Linseed, laying hen, growth performance, DHA, EPA 目 录摘 要IIAbstractIII符号说明VIII引 言1第一章 文献综述21.1 多不饱和脂肪酸的命名21.2 DHA和EPA的生物学功能21.3 DHA和EPA的来源61.4 DHA和EPA产品的开发61.5 亚麻籽的饲用价值91.6 研究目的与意义10第二章 亚麻籽中营养成份分析112.1 材料112.2 方法112.3 结果132.4 讨论13第三章 亚麻籽饲料对蛋鸡生产性能影响研究153.1 材料与方法153.2 结果和分析163.3 讨论20第四章 亚麻籽饲料对鸡蛋DHA和EPA含量影响研究224.1 材料与方法224.2 结果和分析234.3 讨论28第五章 结 论31参考文献32致 谢38附 录39作者简介42发表论文43ContentsChinese abstractIIEnglish abstractIIISymbolic descriptionVIIIIntroduction1Chapter one Literature summarize21.1 Denomination of polyunsaturated fatty acid21.2 Biological function of DHA and EPA21.3 Resource of DHA and EPA51.4 Product of DHA and EPA61.5 Feeding value of linseed81.6 Objective and purpose9 Chapter two Composition analysis of linseed nutriment112.1 Materials112.2 Methods112.3 Results132.4 Discussion13Chapter three Effect of linseed in diets on growth performance of laying hens153.1 Methodology153.2 Results163.3 Discussion20Chapter four Effect of linseed in diets on concentration of DHA and EPA224.1 Methodology224.2 Results234.3 Discussion28Chapter five Conclusion31Reference32Acknowledgment38Appendix39Author resume42Publication paper43符号说明缩略语英文中文BWBody weight体重BWGBody weight gain体增重DGDaily gain日增重F/GFeed:gain ratio料重比DFIDaily feed intake日采食量CPCrude protein粗蛋白EEEther extract粗脂肪EPA(C20:5-3)5,8,11,14,17-Eicosapentaenoic acid二十碳五稀酸DHA(C22:6-3)4,7,10,13,16,19-Docosahexaenoic acid二十二碳六稀酸PA (C16:0)Hexadecanoic acid 棕榈酸SA (C18:0)Octadecanoic acid硬脂酸LA (C18:2-6)Linolenic acid/9,12-Octadecaenoic亚油酸AA (C20:4-6)5,8,11,14-Eicosatetraenic花生四稀酸ALA(C18:3-3)-linoleniccid/9,12,15-Octadecatrienoic-亚麻酸OA (C18:1-9)Petroselinic acid油酸PUFAPolyunsaturated fatty acid多不饱和脂肪酸MUFAMonounsaturated fatty acid单不饱和脂肪酸SFASaturated fatty acid饱和脂肪酸EFAEssential fatty acid必需脂肪酸黑龙江八一农垦大学硕士学位论文 引言引 言1978年，在流行病调查中，Dyerberg发现，生活在格陵兰岛的爱斯基摩人的冠心病和心肌梗塞等心血管疾病机率比丹麦人低7倍1，2，而爱斯基摩人食物中的胆固醇含量却是丹麦人的3倍。原来在爱斯基摩人的食物中含有较多的-3多不饱和脂肪酸（-3不饱和脂肪酸），这些-3不饱和脂肪酸都来自北冰洋的海鱼、海狗和海豹等海产品中。因此，人们推断大量摄取-3不饱和脂肪酸能够降低心血管疾病的发病率。在日常生活中，大多数人不能象爱斯基摩人那样每日都能吃到深海鱼类，这极大地限制了人们从海类产品中摄取-3不饱和脂肪酸。靠海类产品不能满足人们对-3不饱和脂肪酸的需要，尤其像我国这样深海产品相对缺乏、同时心血管疾病高发的国家。因此，挖掘和开发新的-3不饱和脂肪酸资源就显得更为必要和迫切。在众多资源中，亚麻籽成为我国开发新的-3不饱和脂肪酸的重要资源。在我省，亚麻籽资源丰富且成本较低。亚麻籽中含有-亚麻酸，约占总脂肪酸的57%以上；-亚麻酸在体内可以转化成为更长链的多不饱和脂肪酸二十碳五烯酸（DHA）和二十二碳六烯酸（EPA）3，4，DHA和EPA俗称“脑黄金”。同时，亚麻籽中蛋白质含量和能量水平都较高，当与其它原料配合时，能明显提高饲料的整体营养水平。因此，亚麻籽可作为较好和较经济的资源以开发和生产富含DHA和EPA的产品。在我国，禽类产品比较常见，尤其是鸡蛋，可谓家常食品，且被认为是高品质的食品。随着人们生活水平的不断提高，人们越来越重视通过食补提高人体的健康水平，因此食物的需求已不是数量上的要求，而是在质量上有更多的要求。生产优质的鸡蛋已经成为蛋鸡产业中的一个热点问题。人的心脑血管疾病的发生率与膳食中DHA和EPA含量密切相关。当缺乏DHA和EPA时，心脑血管疾病的发生率就会明显提高。从降低心血管疾病的发病率方面，研究和开发富含DHA和EPA的营养保健鸡蛋具有重大的经济效益和社会效益。Cruikshank5指出，改变日粮脂肪酸的组成和含量可以影响鸡蛋中脂肪酸的组成，且日粮高水平的不饱和脂肪酸会影响蛋黄中脂肪酸的比例。本课题通过向饲料中添加亚麻籽，使DHA和EPA能够在禽蛋中富集，从而使鸡蛋成为继深海产品之后富含DHA和EPA的产品。因此，研究开发这种富含DHA和EPA的鸡蛋在我国具有非常广阔的市场前景。黑龙江八一农垦大学硕士学位论文 第一章 文献综述第一章 文献综述1.1 多不饱和脂肪酸的命名多不饱和脂肪酸（polyunsatursted fatty acid，PUFA），又称为多烯酸，是一类含有2个及以上双键（-C=C-），碳原子数为16-22的直链脂肪酸。PUFA主要包括了-3、-6和-9系列脂肪酸，其中-3和-6具有重要生物学意义。-亚麻酸（-LNA）和亚油酸（LA）分别是-3和-6系列脂肪酸的前体，在体内经过一系列的碳链延长与脱饱和作用后衍生为其它的多不饱和脂肪酸6。人体内不能合成多不饱和脂肪酸，必须从食物中摄入，或由膳食提供一些富含脂肪酸前体的物质，像深海鱼油、植物油等，以用于衍生为PUFA。-3，6，9是根据编号系统来命名的7，将脂肪酸碳链的远羧基端的甲基碳原子称为-1碳原子，则前面的碳原子依次称为-2、-3、-4碳原子。-3脂肪酸就是指第一个双键在甲基端的-3碳原子上，其余类推。-3脂肪酸有时也用n-3表示，这两种命名规则相同。脂肪酸通常用缩写符号来表示，即第一个数字表示酰基链的碳原子数，然后是一个冒号，其后的数字代表不饱和双键数，之后是一个或n，最后的数字表示从甲基端数起的第一个双键的位置。例如，18：3-3亚麻酸，指的是它有18个碳原子，有三个双键，靠近甲基端的第一个双键在-3的位置8,9（如图1-1所示）。-3系列脂肪酸在-3位有不饱和双键，包括亚麻酸及其衍生的二十二碳六烯酸（Docosaheiaenoic acid，DHA）和二十碳五烯酸（Eicosapentaenoic acid，EPA），DHA和EPA俗称“脑黄金”。图1-1-3脂肪酸结构图1.2 DHA和EPA的生物学功能自1978年Dyerberg发现爱斯基摩人摄入大量的深海鱼类可以大大降低他们得冠心病、血栓等心脑血管疾病机率之后，关于DHA和EPA的研究迅猛发展，研究者不断发现DHA和EPA更多的生物学功能。1.2.1 降低心脑血管疾病的发病率（1）抗血小板凝集血小板合成的血栓素TAX2具有极强的血小板凝集作用，可使血管收缩，血压升高；血管内皮产生的前列环素PGI2具有抑制血小板凝集、舒张血管和降低血压的作用。血栓素TAX2和前列环素PGI2之间存在一定的平衡，随着年龄增长，前列环素PGI2合成能力降低，血栓素TAX2量增多，平衡受到破坏。血栓素和前列环素是以花生四烯酸为前体，通过磷酸化酶的作用从细胞膜磷酸甘油酯中释放出来。EPA是花生四烯酸的竞争性抑制剂，可竞争性抑制花生四烯酸向血栓素和前列环素转化而生成TXA3和PGI3，TXA3几乎没有生物活性，而PGI3与前列环素PGI2的生理功能和活性相似，因而减少了血小板凝集并增加了血管舒张作用，使血栓形成减少10。Woodman等通过人体实验发现，DHA和EPA可以减少血栓素的形成，且高纯化的DHA效果明显优于EPA。因此食用DHA和EPA有助于抑制血小板凝集，防止心肌梗死和脑梗塞的发生11。（2）降血脂，防动脉硬化动脉粥样硬化是中老年人的常见病和多发病，也是世界上死亡率最高的疾病之一。高血脂是导致动脉粥样硬化的重要致病因素。胆固醇以低密度脂蛋白（LDL）的形式存在于血液中时，容易沉积在血管壁上，而以高密度脂蛋白（HDL）形式存在于血液中时，则使血管疏通。因此，人体血清中HDL是心脑血管疾病的保护因子，而LDL则是导致动脉粥样硬化的原因之一。实验表明，DHA和EPA能增加胆固醇的排泄，抑制内源性胆固醇合成；提高血液中的HDL，降低血液中中性脂质、总胆固醇、LDL和极低密度脂蛋白（VLDL）含量；并改变脂蛋白中脂肪酸的组成，增加其流动性；降低血清中甘油三酯，抑制人单核细胞产生血小板活性因子（PAF）12。Balk等在对21个油脂实验评价后发现，不同的鱼油摄入量可改变总甘油三酯、HDL胆固醇和LDL胆固醇水平，但对鱼油中总胆固醇含量没有影响13。DHA和EPA可增加LDL的易氧化性，降低LDL凝血酶的产生14，可抑制氧化型LDL的表达以及与人体冠状内皮细胞相联的单核细胞，并有预防动脉粥样硬化的功效15。（3）预防冠心病胆固醇虽然是细胞膜的组成部分，在细胞生长发育过程中是必需的，但是血清中胆固醇含量过高，会堆积在冠状动脉血管壁上引起冠心病。DHA和EPA可以促进胆固醇代谢，防止胆固醇的堆积。当膳食中存在DHA和EPA时，胆固醇便与之结合形成胆固醇酯，促其形成胆酸而从肠道排出16,17。因此，在膳食中适当地摄入一定量的多不饱和脂肪酸，对促进人体胆固醇代谢，降低血清中总胆固醇含量，防止脂质在肝脏和动脉壁沉积，对预防心脑血管疾病（主要是冠心病）是有益的。1.2.2 维护大脑和视网膜功能 （1）促进婴幼儿大脑和视网膜的发育-3脂肪酸在大脑中主要存在于灰质部分，是人脑中神经细胞膜的主要脂质成分，也是大脑细胞优先吸收利用的脂肪酸成分。DHA是神经系统细胞生长及维持的一种主要元素，是大脑和视网膜的重要构成成分，在人体大脑皮层中含量高达20%，主要以磷脂的形式存在，在视网膜中所占比例最大，约占50%，人体不能合成DHA，因此人类依赖饮食中获得DHA以促进大脑的发育18。DHA在脑细胞形成过程中起重要作用，有利于脑细胞突起的延伸和重新产生。胎儿自身并不能合成DHA，必须通过胎盘从母体中获得。DHA是惟一可以通过胎盘的-3不饱和脂肪酸，可促进胎儿脑细胞分裂，健全胎儿脑组织。胎儿DHA补充不足，可导致其脑细胞生长发育不正常；严重缺乏DHA，可能导致胎儿无法正常进行由自身中枢神经系统控制的代谢19。在胎儿时期，从受精卵在母亲子宫内分裂开始就需要DHA，因此，妊娠妇女需外源补充DHA，以确保妊娠后期为胎儿大脑的快速发育提供充足的脂肪酸。妇女在怀孕期间，如果饮食中缺少DHA，会影响胎儿大脑及神经系统的正常发育，以及其后天的智商指数20。有研究显示，怀孕期间接受DHA补充的女性，怀孕期较长，婴儿出生体重较高。临床实验也证实，处于怀孕及哺乳期的妇女，如果提高DHA的摄取量，可降低产后抑郁症的发生21。研究表明，DHA有利于婴儿中枢神经系统的发育、视网膜的发育，智力、认知能力和解决问题能力的发育，脉管系统的发育和免疫系统发育22。如果DHA缺乏将会对迅速发育的中枢神经系统造成损害，会导致儿童（尤其是婴幼儿）的学习能力下降，同时患神经系统疾病（如神经官能症）的机率也较高。在早产儿的体内DHA的浓度偏低，需要特别补充DHA，才可使其体内DHA浓度回升到正常水平23。（2）延缓脑的衰老对成年人来讲，DHA也是维持大脑机能正常发挥不可缺少的物质，DHA对延缓脑衰老也起重要作用。对老年人来讲，DHA有防止老年痴呆的作用。因而，有人称DHA为“脑黄金”。如果缺乏DHA，已形成的脑突触会逐渐萎缩，脑细胞间信息的传递能力就会下降，同时还会使感观的功能衰退。DHA在一定程度上可以提高脑的柔软性，抑制脑的老化，对由于年龄增长而萎缩死亡的脑细胞有明显的修复作用12。另外，随着年龄的增加，体内各种自由基的数目不断增多，而谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）及超氧化物歧化酶（SOD）数量逐渐降低，活性逐渐减弱，因此自由基代谢产物丙二醛（MDA）的生成增多，使细胞受到损伤，组织器官功能下降。服用-亚麻酸后，GSH-Px及SOD活性增加，MDA的生成减少，揭示-亚麻酸代谢产物DHA与EPA有抗衰老作用。Bartsch（1999）在研究EPA对小鸡脑发育时发现，EPA能迅速在脑中转化成DHA并蓄积，这也说明EPA是通过DHA对脑发育起重要作用的物质24。1.2.3 抗癌抗炎作用（1）抗癌作用DHA和EPA有抑制乳腺癌、胃癌、膀胱癌、子宫癌等的作用。临床及实验证据表明，-3不饱和脂肪酸对癌症有较好的抑制作用25。英国阿斯顿大学的一个研究小组发现EPA能使固态肿瘤缩小，还能改变一些肿瘤产生的类激素蛋白，并抑制其合成过程，表明EPA有抗癌的作用。刘艳（2004）对DHA和EPA的抗癌机制进行了专门论述，认为其抗癌机制涉及许多因素，如恶病因子、免疫功能、脂质过氧化等 26。赵丽等（2003）以昆明小鼠制作荷瘤鼠模型，研究了DHA对小鼠肝癌细胞、肉瘤细胞和艾氏腹水瘤细胞的抑制作用，并测定DHA对神经胶质瘤细胞、卵巢癌细胞及胃腺癌细胞的半数抑制浓度，结果显示DHA复合物在体内和体外对癌细胞均有抑制作用27。肿瘤在体内能产生某些促进分解代谢的因子，如脂肪动员因子和蛋白水解诱导因子，这是各类癌症病人晚期脂肪和骨骼肌肌肉组织大量分解，出现恶病质的主要原因。EPA能够下调脂肪动员因子的表达，并通过抑制脂肪细胞中cAMP的升高阻止蛋白水解诱导因子的作用，从而控制体重的下降，避免恶性循环，很好地改善了患者的生活质量。在许多肿瘤组织中，前列腺素的含量明显高于正常组织。前列腺素也能促进细胞外基质降解，产生血栓烷促进血小板聚集，有利于癌细胞的侵袭和转移。DHA和EPA能够抑制前列腺素的活性，从而发挥对肿瘤的抑制作用。（2）抗炎作用流行病学调查发现，以摄食鱼类为主的爱斯基摩人很少患气管炎、风湿性关节炎等慢性疾病。用DHA和EPA喂养小鼠，其实验性炎症的水肿程度降低28。临床试验表明，风湿性关节炎患者摄入含DHA和EPA的抗炎症饮食可减轻急慢性炎症反应程度，可使关节肿胀程度显著降低，体内T淋巴细胞增殖减少，而摄入普通饮食者则无此变化29,30。用DHA和EPA防治某些炎性疾病，如类风湿性关节炎，已取得良好的效果31。烷类及细胞活素是重要的炎症介质，许多抗炎药物有赖于DHA、EPA起到抑制烷类及细胞活素的生成32，故有应用EPA为抗炎药物的尝试。自20世纪80年代起，在治疗慢性炎症有效药物的研究工作中，DHA和EPA已逐渐得到重视。近年来医学工作者用DHA和EPA防治某些炎性疾病，如类风湿性关节炎、牛皮癣和哮喘病等，已取得良好的效果，此外DHA和EPA对红斑狼疮也有一定的治疗效果33。（3）免疫调节功能有研究表明34，富含DHA和EPA的鱼油可调节细胞免疫功能，增强患有免疫性疾病的动物模型抵抗内毒素的能力，并延长移植器官的存活时间。还有研究显示35,36，脂肪酸的摄入对自体免疫疾病动物模型的影响取决于动物模型和摄入脂肪酸的种类及数量。富含DHA和EPA的鱼油饮食可减轻自身抗体介导的疾病的严重程度，和提高动物生存能力；而富含-6型多不饱和脂肪酸的亚油酸食物则增加疾病的严重程度。先天性和后天性免疫均可被DHA和EPA所影响。在实验诱导的T细胞介导的自身免疫疾病中，补充DHA和EPA可加重疾病，补充-6型多不饱和脂肪酸则阻止或减轻疾病的严重化。DHA和EPA的某些免疫调节作用，一方面可通过调节烷类的量和种类而实现，同时又可诱发烷类的独立作用机制，而实现免疫调节效应，而它们的这些诱导效应可用于治疗某些免疫疾病37。长期坚持食用DHA或EPA，可抑制T细胞的自身激活或过度激活，也就是可以使炎性、免疫性疾病发生率下降，健康人群可以通过补充DHA和EPA来降低自体免疫性疾病的患病率36。DHA对控制人体变态反应有积极作用，补充鱼油对失调的免疫系统激活所致的急性、慢性疾病可能特别有利。还有些临床研究表明，DHA和EPA对牛皮癣、多发性硬化结节有疗效38。较长期适量的DHA和EPA可减慢甚至阻止IgA肾病的进展，鱼油对进展期IgA肾病有治疗效果39。1.3 DHA和EPA的来源深海鱼油是DHA和EPA的重要来源。大量流行病学、干预试验和基础性生物化学研究已经证实鱼油（DHA+EPA）有降低血浆中甘油三酯、减少血栓形成趋势、降低心血管发病危险的作用。但由于鱼油资源有限且价格高，同时鱼油中的-3不饱和脂肪酸的构成和含量随着鱼的种类、季节和地理位置等不同而变化40，利用海洋鱼油作为-3不饱和脂肪酸来源受到了很大的限制。另外，利用鱼油生产的DHA和EPA产品有无法去除的鱼腥味，大大的影响了产品的质量41。DHA的另一个重要来源是藻油。藻油中含DHA，但不含EPA。实际上很多深海鱼之所以拥有DHA，都是因为深海鱼吃了海藻后在体内残存的。相比较于鱼油DHA，藻油不含EPA，更适合婴幼儿服用42。日粮中添加海藻比鱼油更有利，首先能避免鱼油产生的鱼腥味，另外价格也优于鱼油，但不同种类的海藻DHA和EPA含量差别很大，即使同一种类的不同品系之间也存在很大差别。海洋鱼类和藻类都会受到海洋重金属等污染的影响。鱼油产品中的重金属残留，尤其是汞残留问题一直受到广泛关注。上世纪五十年代日本熊本县发生的“水俣病”，是由于海水鱼的甲基汞中毒引发的43。原来海水中的汞，被海藻类等浮游生物吸收后，转变成有机汞，海鱼采食海藻后，有机汞在鱼体内积累，人再食用了这些鱼类，人体内的汞毒性是原来的几十倍，对人体神经系统，尤其是对儿童产生破坏作用。另外，采用某些单细胞生物（例如藻类、真菌）为原料，经过选择性萃取方法可获得DHA和EPA。早期研究报道，利用脂微生物来合成多不饱和脂肪酸是开发新油源的良好途径44,45。但这一途径也存在一些问题，在研究产脂微生物的菌种筛选和发酵过程中，检测油脂肪酸的工作量很大46，且微生物生产脂肪酸的含量有限。-亚麻酸是DHA和EPA的前体，在动物体内经脱饱和和碳链延长生成DHA和EPA，也是DHA和EPA的主要来源。而-亚麻酸主要来源于一些植物油，其中以亚麻籽油为代表，富含-亚麻酸高达57，其次是菜籽油、大豆油、小麦胚芽油等。亚麻籽也是-亚麻酸的重要来源，实际上目前应用较广的就是利用富含-亚麻酸的植物籽（油）生产多不饱和脂肪酸产品47。但是，现有-亚麻酸摄入量的不足影响到人体所需代谢转换为的DHA的含量，同时-亚麻酸的代谢转换率也直接影响了人体内DHA的含量。根据近些年国内外的医学研究和动物试验，证实青少年和婴幼儿体内缺乏“碳链加长酶”和“减饱和化酶”这些酶的帮助，不能把-亚麻酸转化成DHA。一般成人体内才有少量这些酶，帮助1%-5%的-亚麻酸转化成DHA，平均的转化率在3%左右48。因此，直接生产含有DHA和EPA，而不需要转化的产品，才能够完全解决DHA和EPA及相关-亚麻酸转化酶缺乏的问题。1.4 DHA和EPA产品的开发由于DHA和EPA的有益作用，及深海鱼价格昂贵和资源有限等原因，近年来，开发和研究深海鱼以外的富集DHA和EPA的产品日渐增多。其中以婴幼儿配方奶中添加DHA和EPA偏多，牛奶49、豆奶50及奶片51都有所研究。但考虑到我国日常饮食消费仍以肉和蛋为主，研发富集DHA和EPA的肉制品和蛋制品仍是研究热点和开发趋势。1.4.1 DHA和EPA肉产品的开发开发富含多不饱和脂肪酸的肉类产品多以鸡肉为主，在猪肉52和牛羊肉53上研究开发的较少。因为肉仔鸡脂肪中含饱和、不饱和与多不饱和脂肪酸分别为 33.5%、30.5%、32%，与牛肉多不饱和脂肪酸比例低、饱和脂肪酸比例高相比，鸡肉中脂肪酸的这种结构更适合人类消费。日粮对体脂的结构影响很大，其饱和、不饱和与多不饱和脂肪酸的结构近似于饲料中的，可能增加鸡肉中-3多不饱和脂肪酸的富集54。开发含DHA和EPA的鸡肉产品，国外在这方面做了很多研究。有研究标明，肉鸡日粮中添加5%步鱼油可提高肉鸡体组织中的-3多不饱和脂肪酸的总沉积量，但利用鱼油生产的DHA和EPA产品带有无法去除的鱼腥味，大大的影响了产品的质量。因此，人们开始寻找和开发新的富含-3多不饱和脂肪酸的资源。后有研究显示，给肉鸡饲喂亚麻籽后，鸡肉中-3多不饱和脂肪酸及亚油酸的水平都增高了，而油酸的水平降低了55，且多不饱和脂肪酸多以磷脂的形式沉积在肌肉中，而不沉积在脂肪组织中，因此长链多不饱和脂肪酸只储存在瘦肉中，另外脂肪酸沉积量与亚麻籽摄入量成正比，说明亚麻籽可以作为增加鸡肉中多不饱和脂肪酸富集的重要原料加以研究。在国内，有关富含多不饱和脂肪酸鸡肉的研究很少，近几年才有所关注。刘利晓等（2009）研究发现肉鸡日粮中使用亚麻籽油可增加肌肉中-3不饱和脂肪酸含量，降低n-6/n-3比值，生产出对人类健康有益的功能性鸡肉产品，且5%亚麻籽油添加量较3%添加量效果好56。黄玉兰等（2006）研究发现在肉仔鸡日粮中添加30g/kg的亚麻籽可使肉鸡胸肉-3不饱和脂肪酸沉积达39.42%，腿肉沉积达39.19%。由此认为，通过饲粮中添加不同脂肪酸组成的油脂可生产富含-3不饱和脂肪酸的鸡肉57。1.4.2 DHA和EPA鸡蛋的开发（1）-3脂肪酸鸡蛋的开发由于人们日常食用的植物油主要含有饱和脂肪酸和 -6 PUFA，使得 -3 PUFA摄入相对缺乏，进而影响机体脂类代谢、生物活性物质合成及免疫功能。Naber等（1979） 研究发现，尽管饲料途径不可以改变鸡蛋中的总蛋白和脂肪的含量，但可以改变鸡蛋的脂肪酸组成、矿物质和维生素的含量58。但由于人们担心鸡蛋的胆固醇水平过高，致使上世纪80年代以来鸡蛋的消费量一直呈下降趋势，还不到WHO推荐的最低需要量183枚/年人。后经研究表明，胆固醇并不产热，对于一个体重70kg的成年人来说，其体内约含140g胆固醇，且大部分存在于大脑中，而他每天胆固醇的需要量为1200mg，一个鸡蛋仅能提供200mg的胆固醇。将-3多不饱和脂肪酸导人鸡蛋中，不仅可以解决人类-3多不饱和脂肪酸摄人的不足，同时还可以降低胆固醇的增脂效应，成为有降低血脂作用的保健食品59。近年来的研究表明，蛋鸡日粮中添加富含-3不饱和脂肪酸的鱼油等，可使全蛋的营养特性改善，为消费者提供一种较为经济的富含-3不饱和脂肪酸食品，且鸡蛋中的 - 3PUFA表现出相当的稳定性。因此，生产和开发DHA和EPA鸡蛋多不饱和脂肪酸产品成近些年的研究热点。张欣欣和钱凯先（1998），以含鱼油1%- 8%的饲料饲喂商用蛋鸡9周，结果显示，在1-4周内，鸡蛋蛋黄中EPA 含量有明显下降，而DHA 含量则上升1-4倍，其中尤以添加8%的鱼油组最为显著；在5-9周内，蛋黄中EPA 含量在较低浓度范围内波动，而DHA 则仍呈上升趋势，说明鸡蛋中DHA富集随着鱼油添加量的增加，饲喂时间的延长，而正向上升60。麻丽坤等（2006）分别在蛋鸡日粮中添加菜油和鱼油，研究日粮不同水平-3不饱和脂肪酸在蛋黄中的富集效应及对蛋品质的影响，结果显示，各试验组-3不饱和脂肪酸在蛋黄中的沉积量随鱼油添加时间延长而显著提高，且鱼油效果较菜油效果好61。以往研究多数以添加鱼油增加鸡蛋中多不饱和脂肪酸的富集。但鱼油价格昂贵且在鸡蛋中产生不可去除的鱼腥味，因此利用其他资源生产多不饱和脂肪酸鸡蛋势在必行。（2）-3脂肪酸鸡蛋代替海产品的优越性鸡蛋作为海鱼的代用品为人们提供DHA和EPA有着重大的意义。首先，虽然海鱼油富含-3不饱和脂肪酸，但由于海鱼油资源有限，只有较大的海鱼才能用来提取鱼油，这样造成了鱼油的价格很高，限制了它作为人类健康食品添加剂的使用。其次，鱼油本身即可作为药品和保健品直接供人使用，再经过饲料一鸡蛋一人体这一循环便失去实用价值。第三，鱼油需贮存于-20条件下，添加鱼油的饲料需现配现用；而鱼油的制备还需经蒸馏加热，在热处理前需加入抗氧化剂，以防止-3不饱和脂肪酸的氧化。即使如此，喂给添加鱼油饲料后的鸡蛋中的过氧化物含量仍显著高于对照组。-3不饱和脂肪酸含有多个不饱和键，很容易被氧化，产生过氧化物。过氧化物一旦进入人机体后，会氧化细胞膜中的脂质，破坏细胞的正常结构，进一步诱发心血疾病并加速机体的衰老过程58。即使在冷冻期间，海鱼所含的-3不饱和脂肪酸仍发生氧化，氧化物的生成量与贮藏时间成正比，在-18冷冻条件下过氧化物的生成量高于-40条件下的生成量。而且烹调过程也会导致海鱼中过氧化物的生成量增加。因此，当海鱼的贮藏加工条件控制不当时，不仅会导致-3不饱和脂肪酸损失，所产生的过氧化物还会对人体有害。Peter（2002）研究表明，每枚富营养鸡蛋中-3脂肪酸的含量与冷水鱼中的含量相当，说明鸡蛋可以替代海鱼供给DHA和EPA。而且鸡蛋中-3不饱和脂肪酸表现出较高的稳定性62。在蛋鸡饲料中添加的步鱼油，得到的富含-3不饱和脂肪酸的鸡蛋在冷藏1-4周内，其过氧化物的含量保持恒定，表明-3不饱和脂肪酸没有发生过氧化反应。关于鸡蛋内-3不饱和脂肪酸之所以稳定的机理有多种解释。1）蛋黄中的卵黄高磷蛋白可鳌合蛋黄中的铁离子，从而防止铁离子作为电子传递介质促进-3不饱和脂肪酸的氧化。2）在蛋黄低密度脂蛋白的分子外部，蛋白质和磷脂构成交织结构，使得氧分子不能进入低密度脂蛋白分子内部，保护低密度脂蛋白分子内部的多不饱和脂肪酸免遭氧化破坏。3）蛋黄中过氧化物的生成速度和分解速度相等，从而可保持蛋黄中过氧化物含量恒定。由于鱼油存在的一些弊端，采用非鱼油添加到饲料中生产富含DHA和EPA鸡蛋就显得十分必要。亚麻籽是首选材料。亚麻籽中含有DHA和EPA的前体-亚麻酸，可以通过蛋鸡采食后，在鸡体内-亚麻酸酶作用下生成DHA和EPA，并沉积在蛋黄中。因此，利用亚麻籽添加于蛋鸡饲料中，来生产富含DHA和EPA的鸡蛋，对改善鸡蛋品质，提高人类健康，具有一定的实际意义。1.5 亚麻籽的饲用价值亚麻亦称胡麻，为一年生草本植物，是世界十大油料作物之一，居世界油料总产量的第7位，也是我国重要的油料及纤维作物，主产于我国的山西、内蒙古、宁夏、东北等地，居我国油料总产量的第4位。无论油用亚麻还是纤用亚麻都富含油脂和蛋白，油脂含量很高，一般在30%-45%，比大豆含油率高一倍多，因而其能量含量也很高，家禽代谢能为3.75 MJ/kg，猪消化能为4.60 MJ/kg63。亚麻籽（linseed）为亚麻的种子，呈扁卵形，前端稍尖锐，表面平滑有光泽，一般为褐色，有坚硬的外壳，亚麻籽粗蛋白含量约为22%，主要由白蛋白和球蛋白组成，是饲料中优质植物蛋白的来源64。亚麻籽中必需氨基酸组成合理，含较多的天门冬氨酸、谷氨酸、精氨酸等。亚麻籽含丰富的矿物质，钾含量最高，与维持动物体内正常血压有关；锌含量也较多，钙较少，磷较多，一部分以植酸磷的形式存在。亚麻籽中B族维生素和维生素E较高，维生素E以生育酚的形式存在，是天然抗氧化剂，但维生素A、D缺乏。脱粒后的碎果皮（亚麻糠）每千克含有20克消化蛋白，也是养猪的好饲料。过去，只是对亚麻籽榨油后的副产品亚麻仁饼和亚麻仁粕做为一种植物性蛋白补充饲料进行利用。近十几年来，饲料产业以亚麻籽做为配合饲料，看重的不是它的蛋白质，而是它的脂肪性质，亚麻籽含丰富的油脂，油脂以不饱和脂肪酸居多，约占92%，其中以-亚麻酸（ALA）为代表的-3系列多不饱和脂肪酸约占83%65，-6多不饱和亚油酸含量较低，饱和脂肪酸（SFA）含量也低，这是大豆、棉籽、玉米和葵花籽做添加饲料所无法取代的性质。由于大多数人缺少一些必需脂肪酸而影响人类健康，这类脂肪酸目前是由深海鱼油、海狗油来满足的，其主要成分是DHA和EPA。近三十年来，欧美科学家研究证明，油用亚麻种子中富含亚麻酸（十八碳三烯酸），而亚麻酸在人体或动物体中虽不能自然生成，但人体或动物体分泌的一些酶类，却可以将其转化成DHA和EPA。因此，目前开发亚麻籽作饲料原料的理由，主要是为了提高蛋、乳和肉等畜产品中-3多不饱和脂肪酸含量，提高食品的营养价值；其次是提高动物自身的健康水平。研究发现，亚麻籽中还含有多种活性成分，如木酚素、亚麻胶等，其中多种成分被证实有抗癌活性，现在许多国家将亚麻籽直接加入保健食品或加入动物饲料中，提高动物产品价值。另外，亚麻籽中约含亚麻胶7%-9%，可通过酶技术和变温等高新技术工艺提取为高级食品添加剂；由于具有黏性，利于动物饲料制粒。所以，亚麻籽在人类食品和动物饲料中的应用有很大的发展前景。亚麻籽脱脂后的副产品亚麻籽饼（粕）亦是营养丰富的牲畜饲料66，含干物质89.0-91.1%，总能16.9-18.4MJ/kg，粗蛋白质35.9-36.2%，粗纤维8.9-9.2%，钙0.39%，磷0.87%；赖氨酸1.10%、色氨酸0.47%、半胱氨酸0.56%、蛋氨酸0.47%；胡萝卜素0.3mg/kg、硫胺素2.6mg/kg、核黄素4.1 mg/kg、烟酸39.4 mg/kg、泛酸16.5 mg/kg、胆碱1672mg/kg。但是未完全成熟的亚麻种子及其所制成的麻籽饼粕中，含有抗营养因子，如亚麻籽胶、植酸、变应原、生氰糖苷、胰蛋白酶抑制因子、抗维生素B6因子等，特别是其中生氰糖苷的毒性，在动物饲料中受到关注。生氰糖苷存在于亚麻籽的壳和仁中，绿色的茎叶中也含少许。亚麻籽及其榨油后的饼粕中含有生氰糖甙，主要是亚麻苦甙和少量百脉根甙。生氰糖甙本身不呈现毒性，但被动物采食后，在pH2-8、40-50条件下，生氰糖甙经过水解酶作用，水解产生氢氰酸（HCN），容易引起动物中毒。所以，不能过多或长期饲喂亚麻籽。亚麻籽中亚麻苦甙的含量因亚麻的品种、种子成熟程度及种子含油量的不同而有差异。据报道，完全成熟的种子极少或完全不含亚麻苦甙；油用亚麻是用成熟种子作油料，其种子中亚麻苦甙含量较少；纤维用亚麻品种由于其收获较早，所以其种子中亚麻苦甙较多。从种子含油量来看，含油量越低，其亚麻苦甙含量越高，含油量越高，则亚麻苦甙含量越低。一般采用水浸泡，加热蒸煮的方法，去除生氰糖甙，磨碎或发酵对去除氢氰酸也有一定效果。饲喂亚麻籽对改变动物产品脂肪酸组成的效果已得到证实，但是这方面仍然具有很大潜力，如生产功能性肉、蛋、奶，为了更好地认识亚麻籽在动物日粮中的应用，还需要进行大量的研究。1.6 研究目的与意义亚麻资源的利用过去多集中在其饼粕上，而对亚麻籽的应用研究较少，这方面的开发潜力很大，有许多研究工作有待完成。主要问题包括：（1）至今为止，给动物饲喂亚麻籽的研究很多，但形成产品推广的的应用研究很少，应加强其产品附加值，研究具有实际应用价值的动物产品；（2）亚麻籽的加工方法会影响-3脂肪酸在畜产品中的沉积效果，选择适宜的加工方法也是要研究的一个问题；（3）由于亚麻籽中有毒物质的存在，添加过多会影响动物的健康，所以确定不同动物日粮中的适宜添加量也是要解决的一个问题。我国亚麻资源丰富，但亚麻籽主要作榨油用，经济价值有限，未能引起足够的重视。随着亚麻籽活性成分的深入研究，人们认识的进一步深化和生活水平的提高，国内功能食品和保健品的消费群体将逐步增大，亚麻籽保健功能食品商机无限。若把亚麻籽中的这些生理活性物质在药品、保健品、食品及食品添加剂、饲料等方面开发利用，从中得到经济价值、营养价值、药用价值较高的保健品和药用功能性产品，其经济附加值可大大提高，也会产生巨大的经济效益和社会效益。我国是亚麻生产大国，大力发展以亚麻籽为原料的深加工系列生产，提高产品附加值，有着重要的意义。本研究的主要目的为：（1）在蛋鸡饲料中添加不同比例的亚麻籽，探讨不同含量亚麻籽对蛋鸡生产性能的影响；（2）对鸡蛋蛋黄内二十二碳六烯酸DHA和二十碳五烯酸EPA含量进行测定，研究不同剂量亚麻籽对蛋黄中不饱和脂肪酸含量的影响，并确定蛋鸡饲料中亚麻籽的最佳添加剂量。黑龙江八一农垦大学硕士学位论文 第二章 亚麻籽营养成分分析第二章 亚麻籽中营养成份分析2.1 材料亚麻籽，购自哈尔滨市呼兰区。脂肪酸甲脂化试剂，购自Sigma公司。2.2 方法2.2.1 亚麻籽基本营养成份的测定(1)水分及干物质（DM）含量的测定将折好的空滤纸包放入干净铝盒中，置于烘箱中1052烘2h，取出，在干燥器中冷却30min，取出称重，准确至0.0002g；再置于烘箱中1052烘30-60min，在干燥器中冷却30min，称重，直至两次称重之差小于0.0005，为恒重。用已恒重的铝盒中的纸包称取试样2g左右，准确至0.0002g，不盖盖，在1052烘箱中烘8h后取出，在干燥器中冷却30min，称重。遗失的重量即为水分含量。做平行分析，取平均值。W1 - W2W1- W0水分（%）= 100式中: W1105烘干前试样及铝盒重量（g）W2105烘干后试样及铝盒重量（g）W0已恒重的铝盒重量（g）(2)粗脂肪（EE）测定：称取试样1g左右，准确至0.0002g，用滤纸包好，放在在1052烘箱中烘干2h，干燥器中冷却30min，称重。再同样烘干30min，冷却称重，两次称重之差小于0.0005g为恒重。将恒重后的样品放入索氏抽提瓶中，加无水乙醚，淹没滤纸包上1-2cm处，浸泡12h，60-75的水浴加热，使乙醚回流，抽提6-8h结束，至从抽提管回流的乙醚无色。将抽提后的滤纸包取出，置干燥通风处挥发乙醚过夜，放回到原来的铝盒中，1052烘干8h，至恒重，铝盒与滤纸包的前后总重量之差即为粗脂肪的含量。W1 - W2WEE（%）= 100 W 风干试样重量（g）W1已恒重的测完水分的铝盒滤纸包总重量（g） W2已恒重的抽提完脂肪的铝盒滤纸包总重量（g） (3)粗蛋白测定（CP）：采用凯氏定氮法测定样品中粗蛋白的含量，具体操作为：取试样0.2g左右（准确至0.0002 g），倒入消化管底部，加入一勺催化剂（硫酸铜与硫酸钾以1：15比例混合），加浓硫酸6mL，尽量使消化管壁无样品残留。同时用蔗糖代替试样做空白。浓硫酸浸泡试样过夜，然后在消煮炉上消化至透彻透明呈亮绿色。消化后样品中含氮物质生成硫酸铵成为消化液