补肾排毒合剂对瘦素神经内分泌轴的影响课件

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,补肾排毒合剂对瘦素神经内分泌轴的影响,31、园日涉以成趣，门虽设而常关。,32、鼓腹无所思。朝起暮归眠。,33、倾壶绝余沥，窥灶不见烟。,34、春秋满四泽，夏云多奇峰，秋月扬明辉，冬岭秀孤松。,35、丈夫志四海，我愿不知老。,补肾排毒合剂对瘦素神经内分泌轴的影响补肾排毒合剂对瘦素神经内分泌轴的影响31、园日涉以成趣，门虽设而常关。,32、鼓腹无所思。朝起暮归眠。,33、倾壶绝余沥，窥灶不见烟。,34、春秋满四泽，夏云多奇峰，秋月扬明辉，冬岭秀孤松。,35、丈夫志四海，我愿不知老。补肾排毒合剂对慢性肾衰竭大鼠 瘦素神经内分泌轴的影响青岛市中医医院 于俊生 研究的目的和意义 近年来,瘦素（Leptin）、瘦素受体及神经肽Y（NPY）与慢性肾功能衰竭营养不良的关系引起了国内外学者的普遍关注，本实验运用免疫组化方法，观察了补肾排毒合剂对慢性肾衰竭营养不良大鼠Leptin及NPY代谢的影响，旨在探讨补肾排毒合剂治疗慢性肾衰竭营养不良的机理。,实 验 药 品,补肾排毒合剂：由柴胡、黄芩、太子参、生地、大黄、六月雪等药物经水煎熬汁、浓缩而成。,生药含量为2.71,g/ml。,由青岛市中医医院制剂室提供。,实 验 动 物,Wistar,大鼠60只，雌雄各30只，体重240-280,g，,由青岛市动物研究所提供。于室温23，用标准大鼠饲料分笼喂养，自由饮水。,相同条件喂养1周后随机分为3组：正常对照组（组）15例、慢性肾功能衰竭组（组）22例、慢性肾功能衰竭灌胃组（组）23例。,建 立 动 物 模 型,正常对照组行假手术。,慢性肾衰组：采用两步部分肾切除法，首先梯形切去左肾两极，四周后行右肾全切。,慢性肾衰灌胃组：两步部分肾切除法同肾衰组，术后六周模型成熟开始予补肾排毒合剂灌胃，持续6周。,标 本 收 集 与 病 理 切 片,三组大鼠均于术后12周行脱颈椎处死，取头背部“丁”字型切开皮肤，去掉颅骨，取出整个脑组织，沿矢状面切开，保存。刨开腹腔，取出脂肪组织和左肾组织。,取出组织用10%甲醛固定；清水洗涤，逐级酒精脱水；然后浸蜡，石蜡包埋，制作3,m,厚的连续切片。,免 疫 组 化（,SABC,法）,58烤片过夜，梯度乙醇脱蜡至水。,滴加3%,H,2,O,2,，,湿盒内室温放置20,min,，单蒸水洗。,滴加复合消化液，37放置1小时，0.01,MPBS,洗。,滴加血清封闭液，置于湿盒内，室温放置20,min，,甩去多余液体。,滴加适当稀释的一抗，置于湿盒内，4过夜。0.01,MPBS,。,滴加生物素化羊抗兔,IgG，,置于湿盒中，37放置20,min,。,滴加试剂,SABC，37，20min，0.01MPBS,洗次。,DAB,显色，苏木素轻度复染。脱水，透明，封片。,结 果 判 定,每组切片随机选取5个区域，每个区域包含100个同类细胞，计量阳性细胞，取平均数作为每张切片的阳性细胞数。,统 计 学 方 法,计量资料结果表示为均数标准差,，,先采用方差齐性检验，再用两两,t,检验，用,Excel,统计软件处理，,p0.05,差异有统计学意义。,结 果,Leptin,在脂肪组织的表达,数目,镜下阳性细胞数,P,1,P,2,组,15,35.7314.89,组,20,61.7022.96,0.002,组,22,49.4513.60,0.028,0.080,P,1,：,与组比较，,P,2,：,组与组比较,Ob-R,在肾脏的表达,数目,镜下阳性细胞数,P,1,P,2,组,15,68.4023.38,组,20,35.4518.45,0.001,组,22,50.5919.26,0.039,0.047,P,1,：,与组比较，,P,2,：,组与组比较,Ob-R,在下丘脑的表达,数目,镜下阳性细胞数,P,1,P,2,组,15,14.737.55,组,20,33.6514.15,0.001,组,22,23.8611.20,0.029,0.048,P,1,：,与组比较，,P,2,：,组与组比较,NPY,在下丘脑的表达,数目,镜下阳性细胞数,P,1,P,2,组,15,29.3315.07,组,20,12.706.91,0.001,组,22,19.137.73,0.025,0.045,P,1,：,与组比较，,P,2,：,组与组比较,讨 论,瘦素与瘦素-神经内分泌轴,Leptin,主要在脂肪和胎盘组织合成，是由167个氨基酸组成的一种分泌型蛋白质。,Leptin,通过其受体作用于不同组织，发挥生物学效应，受体中作用明确而且最重要的是长型受体（,Rb）,和短型受体（,Ra）。,肾脏是清除,Leptin,的重要器官。,瘦素-神经内分泌轴：,Leptin,与,Ra,结合通过血脑屏障，在下丘脑与,Rb,结合，通过双向激活激酶（,JAK）,或信号传导和转录激活蛋白（,STAT）,途径进行信号传导，影响神经肽,Y(NPY),等多种神经内分泌激素的分泌，调节食欲及机体能量消耗，改变营养状态。,瘦素-神经内分泌轴与,CRF,营养不良,实验结果显示,CRF,大鼠,Leptin-,神经内分泌轴存在明显异常。,脂肪组织,Leptin,表达增高，肾脏,Ob-R,表达降低，使,Leptin,的排出减少，造成高瘦素血症。中枢,Ob-R,活性增强，,Leptin,通过血脑屏障向下丘脑转运的量增加。相对较多的,Leptin,进入下丘脑，通过表达增强的,Rb，,抑制了,NPY,的分泌。大鼠食物摄入减少，体重降低，进而逐渐出现营养不良。,补肾排毒合剂对瘦素-神经内分泌轴的影响,用药组,Leptin,在脂肪组织较肾衰组表达略有减少。肾组织中,Ob-R,表达较肾衰组增强。脑中,Ob-R,的表达强度较肾衰组减弱，,NPY,的表达增强。,补肾排毒合剂使肾脏对,leptin,的降解排出增多。同时调整机体细胞代谢，改善胃动力，饮食增加，反馈性抑制,leptin,受体活性。随着脑中,Ob-R,的表达强度减弱，进入脑组织,leptin,的量及其对,NPY,的抑制作用减轻，,NPY,的合成分泌增加，使食欲增强，蛋白、脂质合成增加，从而改善,CRF,大鼠的营养状态。,谢谢,66,、节制使快乐增加并使享受加强。,德谟克利特,67,、今天应做的事没有做，明天再早也是耽误了。,裴斯泰洛齐,68,、决定一个人的一生，以及整个命运的，只是一瞬之间。,歌德,69,、懒人无法享受休息之乐。,拉布克,70,、浪费时间是一桩大罪过。,卢梭,