《富硒铬酵母的研究》幻灯片课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,富硒铬酵母的研究幻灯片,本课件PPT仅供大家学习使用 学习完请自行删除，谢谢！ 本课件PPT仅供大家学习使用 学习完请自行删除，谢谢！ 本课件PPT仅供大家学习使用 学习完请自行删除，谢谢！ 本课件PPT仅供大家学习使用 学习完请自行删除，谢谢！,富硒铬酵母的研究幻灯片 本课件PPT仅供大家学习使,报告的主要内容,硒铬的研究进展,立项的目的,研究的主要内容,小结和展望,报告的主要内容硒铬的研究进展,硒铬的研究进展,硒的研究进展,铬的研究进展,富硒酵母和富铬酵母的研究进展,硒铬的研究进展硒的研究进展,硒的研究进展,硒的根本性质,硒是一种过渡元素，有多种价态形式。,硒在人体内含量在0.170.26mmol。不同地区的人体内硒含量是不同的，主要是与膳食中硒含量有关。,肾脏、肝脏、胰腺、垂体、毛发中的硒浓度较高，肌肉、骨骼和血液中那么含量相对较低，脂肪中含量最低,体内两个主要的硒室区：不受调控的硒蛋氨酸区和受到调控的硒半胱氨酸无机硒区,硒新陈代谢的核心主要发生在硒半胱氨酸区室内,硒的研究进展硒的根本性质,硒的研究进展,硒的生化功能酶,谷胱甘肽过氧化物酶系GPX,碘甲腺原氨酸脱碘酶 DI,硫氧化复原蛋白复原酶 TRR,血浆硒蛋白SELP,硒蛋白WSELW,其它 可能具有抗癌作用的硒磷酸盐合成酶-2,硒的研究进展硒的生化功能酶,硒的研究进展,硒的生理功能,抗氧化作用,调节甲状腺激素,维持正常的免疫功能,抗肿瘤,抗艾滋病,维持正常生育功能,延缓衰老,预防与硒缺乏的相关疾病,硒的研究进展硒的生理功能,硒的研究进展,硒的人体需要量,19821992年杨光圻等在四川低硒地区和湖北恩施地区进展了硒的需要量和平安量的研究，得到目前最据参考价值的人体需要量和平安量数据。,用防止克山病发生为指标，得到大约20g/d作为膳食硒最低需要量；,以硒的生物活性形式GPX在血浆中到达饱和作为正常的生理功能指标，得到40g/d得到膳食硒生理需要量；,以防止出现硒中毒病症为指标，将600g/d为个体最高平安摄入量，建议将400g/d作为膳食平安摄入量,硒的研究进展硒的人体需要量,硒的研究进展,硒的毒副作用,硒中毒或慢性硒中毒，最常见的是指趾甲构造改变或指趾甲、头发脱落。长期过多的摄入硒，出现包括皮肤和神经系统的损害、恶心、虚弱和腹泻、牙齿出现色斑。,每天摄入硒3 2006 700g就会出现上述中毒病症。平均每天摄入1 250g硒的人，也会出现指甲的轻度形态改变,硒的研究进展硒的毒副作用,铬的研究进展,铬的根本性质,铬是一种过渡元素，以多种价态存在，生物体内Cr3+是最稳定,肠道对Cr3+的吸收率较低，大约为0.52，通过铬与氨基酸和氨基酸衍生物螯合来增加铬的吸收率。维生素C也能增加铬的吸收。,人体内各个部位都存在铬，但是随着年龄的增长而逐渐减少,铬的研究进展铬的根本性质,铬的研究进展,铬的生理功能,加强胰岛素的作用,对葡聚糖耐量的影响,预防动脉粥状硬化,促进生长发育,对免疫反响的影响,对肥胖基因的表达影响,铬的研究进展铬的生理功能,铬的研究进展,铬缺乏主要使摄入缺乏和消耗过多，人体的铬主要来自食物，食物在精制过程中会失去，另外人体对铬的吸收率很低也是造成缺铬的原因。缺铬另一个原因是人体消耗铬所致，如烧伤、感染、外伤和体力消耗过度，可使尿铬排出增加。,美国国家科学院最近发表的报告中提出了铬的适宜摄入量AI估计值。1950岁的男性AI为35g/d，同龄的女性为25g/d。对于其他年龄组根据年龄估算其能量摄入量，再乘以13.4g /1 000kcal，即可确定其AI值,铬的研究进展铬缺乏主要使摄入缺乏和消耗过,铬的研究进展,在一项持续几个月的研究中证明以氯化铬形式补充200g铬是平安的，由于氯化铬吸收比较差，需要口服大剂量才能到达中毒水平。人口服铬酸盐的致死量约为3g，服大剂量铬时可见胃粘膜出血、肝组织坏死、脑水肿，内脏器官出血。,按毒性分级，三价铬属低毒物质。,小鼠受孕后79天腹腔注射氯化铬，即可见到胎儿体重下降与畸形，而且呈剂量反响关系。现有充分流行病学资料证明，接触铬酸盐的工人发生肺癌的危险性比一班人高330倍,铬的研究进展在一项持续几个月的研究中,富硒酵母和富铬酵母的研究进展,90年代日本旭化工业股份的商品硒酵母硒含量为1000g/ml。,丹麦法尔诺公司生产的富硒酵母硒含量可以到达1600mg/kg，其中蛋氨酸硒的含量可以到总硒的55，有机硒到达99的水平，它以葡萄糖和麦芽汁作为唯一碳源。,李春明等人通过实验得到富硒酵母菌种的硒含量是800 mg/ kg。,王凤琴实验室富硒酵母菌种硒含量为604.5 mg/ kg。,范秀英等通过筛选、单倍体别离、诱变和原生质融合，从融合子中选育出一株高生物量富硒酵母菌株细胞中硒的含量到达2050 mg/ kg。,我们国家已经将硒酵母列为国家药品标准，硒含量要求在700mg/kg以上，有机硒不低于95。,富硒酵母和富铬酵母的研究进展90年代日本旭化工业股份,富硒酵母和富铬酵母的研究进展,黄贤祥等用金膜电极微分阳极溶出伏安法测定了富硒酵母在家兔体内的药物动力参数，结果说明富硒酵母较亚硒酸钠生物利用率高，持续时间长，峰浓度高的特点，是一种优于亚硒酸钠的补硒剂。,富硒酵母中硒人体吸收后12小时从体内根本消失，24小时完全消失，说明富硒酵母在低硒地区按推荐剂量补硒不会引起硒积蓄中毒。,富硒酵母和富铬酵母的研究进展黄贤祥等用金膜电极微分阳极溶出伏,富硒酵母和富铬酵母的研究进展,张安平选用多个正常或病理动物模型，观察了硒酵母在免疫调节，保肝抗溃疡及抗心肌缺血等方面的作用。说明富硒酵母可以上调迟发型变态反响小鼠低下的免疫细胞功能，并对四氯化碳引起的小鼠肝损伤与应激性小鼠胃出血均有一定的保护作用，对垂体后叶素引起的大鼠急性心肌缺血亦有一定的改善作用。,孙秋林等在用大鼠阻塞型黄疸模型经口灌胃富硒酵母，证明富硒酵母对黄疸阻塞引起的肝细胞损伤有保护作用。,杨林生观察了硒酵母在治疗地方性砷中毒14个月的排砷效果，结果说明富硒酵母能显著改善砷中毒的临床病症，能拮抗砷所致的毒副作用，并保护遗传物质免遭砷的损伤。,淡松年利用富硒酵母的抗氧化性，对早期的白内障进展临床治疗，效果显著。,富硒酵母和富铬酵母的研究进展张安平选用多个正常或病理动物模型,富硒酵母和富铬酵母的研究进展,早在1999年无锡轻工业大学研制出含铬量达0.2和0.26%的两种高铬酵母，到达了国内外的水平。,王盛良等选择在培养基中添加200mg/kg以下浓度的铬，发酵培养24小时，这样可以生产的富铬酵母铬含量到达229.6mg/kg，为普通酵母的9倍。,金婵等以麦芽汁为培养基，啤酒酵母菌接种量为10，CrCl3的添加量为20.0ml/L，28培养48小时，所的高铬酵母中的总铬含量可到达260.02mg/kg。,薛冬华等采用糖蜜发酵培养富铬酵母的含量为738.8mg/kg。,李爱芬等通过摇瓶发酵，酵母含铬量到达800 mg/kg以上。,张博润在其专利01102201.9利用原生质融合的方法选育出高生物量和高铬含量的酵母菌株，在发酵培养基和优化培养条件下生产出高铬含量的富铬酵母，其中铬含量到达20004000mg/kg。,富硒酵母和富铬酵母的研究进展早在1999年无锡轻工业大学研制,富硒酵母和富铬酵母的研究进展,丁文军等用中子活化法测定了富铬酵母中生物活性物质、细胞壁以及细胞原生质体中的铬，铬通过细胞壁进入酵母细胞后，,80,的铬存在与细胞的,原生质体,内，并且主要以,生物活性物质,形式存在。,他们还测定酵母中DNA、RNA和蛋白质中铬含量，其中DNA中的铬占总铬的,48，,RNA中的铬占总铬的,34，,蛋白质中的铬占总铬的,6.4%,。,富硒酵母和富铬酵母的研究进展丁文军等用中子活化法测定了富铬酵,富硒酵母和富铬酵母的研究进展,吴一等在临床观察富铬酵母在治疗II型糖尿病的效果发现，治疗组的发铬明显提高，空腹和餐后血糖明显降低，血糖面积下降，显示提高糖尿病人体内铬含量有利于葡萄糖的利用。但治疗前后胰岛素的面积没有变化，符合铬提高胰岛素的生物效应，并不增加胰岛素的分泌。,富铬酵母改善对四氧嘧啶所致的糖尿病大鼠的试验中，富铬酵母组的血糖、总胆固醇TC、甘油三酯TG、LDL和胰岛素显著降低，而HDL那么升高，说明富铬酵母可以改善体内糖和酯的代谢，可以用来预防和治疗糖尿病。,富铬酵母还可以用来治疗和预防动脉粥状硬化,富硒酵母和富铬酵母的研究进展吴一等在临床观察富铬酵母在治疗,富硒酵母和富铬酵母的研究进展,富铬酵母对小鼠大鼠的神经系统无影响。,对麻醉犬呼吸、血压、心率和心电图无明显作用，说明富铬酵母对机体一般生理特征没有影响。,可以用于临床研究，并作为食品添加剂添加到食品中,富硒酵母和富铬酵母的研究进展富铬酵母对小鼠大鼠的神经系统无影,立 项 的 目的,很多研究证明硒和铬在糖尿病，高血压等疾病存在同时缺乏的现象。而且这两种微量元素的吸收不存在拮抗的作用。,研究富硒酵母和富铬酵母的根底，把两者的优势结合起来，研究开发出一种同时富含硒和铬的酵母。,可以同时补充硒铬，发挥两种的共同作用，起到更好的补充效果，,同时减少分别补充硒和铬量，降低经济消耗，同时确保更平安。,立 项 的 目的很多研究证,立 项 的 目的,研究证明酵母具有很强的富集硒和铬能力，而且我们已经研究出富硒酵母和富铬酵母，并有优良的菌种，利用科学的育种方法是可以选育出能同时富集硒和铬酵母菌株；,拥有比较成熟的酵母发酵技术和设备，对于研究富硒铬酵母的发酵条件比较便利。,立 项 的 目的研究证明酵母具有很强,研究的主要内容,菌种的选育,生产工艺的研究,平安性评价,功能型评价,研究的主要内容菌种的选育,菌种的选育,出发菌株：,富硒酵母菌株S1205,酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae,编号：CCTCC M 205125,富铬酵母菌株C9460,酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae,编号： CCTCC M 205126,菌种的选育出发菌株：,菌种的选育,单倍体菌株的获得,用蜗牛酶破除酵母子囊壁，得到子囊孢子悬液。,培养挑选单倍体菌落,鉴定,结果得到：,SS003a,和,CS008a。,菌种的选育单倍体菌株的获得,菌种的选育,营养缺陷型菌株的获得,以SS003a为诱变出发菌株，以甲基磺酸乙酯EMS 为诱变剂。,挑选在MM板上不生长而在CM生长的菌落，可以初步确定为营养缺陷型 。,选出能够在含硒150mg/kg培养基进展生长，并具有较强富硒能力的菌株 SS003a15，经营养生长谱确定为trp缺陷型：SS003a15trp-。,菌种的选育营养缺陷型菌株的获得,菌种的选育,呼吸缺陷型菌株的选育,吖啶黄可诱发酵母呼吸缺陷型突变,野生酵母菌落能复原三苯基四氮唑盐酸盐TTC而变红。呼吸缺陷型那么没有这个能力，菌落仍为白色。,选出能够在含铬150mg/kg培养基进展生长，并具有较强富铬能力的菌株CS008a-11。,菌种的选育呼吸缺陷型菌株的选育,菌种的选育,融合子的生成,通过原生质体的制备，融合，再生等步骤，在挑选融合子时，选择只能在含有Trp培养基和不能复原TTC的菌落，作为融合子进一步验证。,经过验证并在含有高硒(150mg/kg)和高铬(150mg/kg)培养基上生长的菌株SC018。,SC018在CCTCC保藏的编号是：编号：CCTCC M 205124,菌种的选育融合子的生成,生产工艺的研究,斜面小三角瓶培养大三角瓶培养发酵罐,发酵用的碳源一般为糖蜜，磷源为磷酸氢二氨，氮源为尿素，硒源为亚硒酸钠，铬源为三氯化铬，适当添加酵母抽提物。,主要研究时间，温度，pH值，硒浓度，铬浓度，碳源，金属离子等对富硒铬酵母富集硒和铬能力以及生长的影响,生产工艺的研究斜面小三角瓶培养大,生产工艺的研究,不同培养时间对富硒铬酵母生长及富集硒铬能力的影响,取SC018菌种按“斜面小三角瓶培养大三角瓶培养发酵罐工艺发酵试验，在30,pH值5.0下培养。,培养基中硒浓度150mg/L,铬浓度150mg/L。,按一般酵母生长发酵规律，碳源、氮源和磷源于采用流加方式，连续发酵，于不同培养时取发酵液测量酵母生长量和含硒、铬的量。,生产工艺的研究不同培养,生产工艺的研究,不同培养时间对富硒铬酵母生长及富集硒铬能力的影响,生产工艺的研究不同培养,生产工艺的研究,发酵温度对富硒铬酵母生长及富集硒、铬能力的影响,取SC018菌种按“斜面小三角瓶培养大三角瓶培养发酵罐工艺发酵试验，分别在26、28、38、32、34、36,pH值5.0下培养32hr。,培养基中硒浓度150mg/L,铬浓度150mg/。,按一般酵母生长发酵规律，碳源、氮源和磷源于采用流加方式，连续发酵，发酵完毕后别离收集菌体，测量酵母生长量和含硒、铬的量。,生产工艺的研究发酵温度,生产工艺的研究,发酵温度对富硒铬酵母生长及富集硒、铬能力的影响,生产工艺的研究发酵温度,生产工艺的研究,发酵pH值对对富硒铬酵母生长及富集硒、铬能力的影响,取SC018菌种按“斜面小三角瓶培养大三角瓶培养发酵罐工艺发酵试验，分别在pH值3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0，温度3031下培养28hr。,培养基中硒浓度150mg/L,铬浓度150mg/L。,按一般酵母生长发酵规律，碳源、氮源和磷源于采用流加方式，连续发酵，发酵完毕后别离收集菌体，测量酵母生长量和含硒、铬的量。,生产工艺的研究发酵pH,生产工艺的研究,发酵pH值对对富硒铬酵母生长及富集硒、铬能力的影响,生产工艺的研究发酵pH,生产工艺的研究,培养基中不同硒浓度对富硒铬酵母生长及富集硒、铬能力的影响,取SC018菌种按“斜面小三角瓶培养大三角瓶培养发酵罐工艺发酵试验，分别在pH值5.0，温度3031下培养28hr。,培养基中硒浓度10、20、50、80、100、150、200、250、300mg/L,铬浓度150mg/L。,按一般酵母生长发酵规律，碳源、氮源和磷源于采用流加方式，连续发酵，发酵完毕后别离收集菌体，测量酵母生长量和含硒、铬的量。,生产工艺的研究培养基中不,生产工艺的研究,培养基中不同硒浓度对富硒铬酵母生长及富集硒、铬能力的影响,生产工艺的研究培养基中,生产工艺的研究,培养基中不同铬浓度对富硒铬酵母生长及富集硒、铬能力的影响,取SC018菌种按“斜面小三角瓶培养大三角瓶培养发酵罐工艺发酵试验，分别在pH值5.0，温度3031下培养28hr。,培养基中铬浓度10、20、50、80、100、150、200、250、300mg/L, 硒浓度150mg/L。,按一般酵母生长发酵规律，碳源、氮源和磷源于采用流加方式，连续发酵，发酵完毕后别离收集菌体，测量酵母生长量和含硒、铬的量。,生产工艺的研究培养基中,生产工艺的研究,培养基中不同铬浓度对富硒铬酵母生长及富集硒、铬能力的影响,生产工艺的研究培养基中不,生产工艺的研究,不同碳源对对富硒铬酵母生长及富集硒、铬能力的影响,取SC018菌种按上述工艺发酵试验，分别在pH值5.0，温度3031下培养28hr，培养基中铬浓度150mg/L, 硒浓度150mg/L。,按一般酵母生长发酵规律，分别取马铃薯汁+0.3%尿素、3%淀粉水解液+0.1%MgSO4、0.1%K2HPO4、5%麦芽汁、3%饴糖+0.1%MgSO4、0.1%K2HPO4、5%麦芽汁、根底培养基和糖蜜+0.3%尿素作为碳源。,碳源、氮源和磷源于采用流加方式，连续发酵，发酵完毕后别离收集菌体，测量酵母生长量和含硒、铬的量。,生产工艺的研究不同碳源,生产工艺的研究,不同碳源对对富硒铬酵母生长及富集硒、铬能力的影响,生产工艺的研究不同碳源,生产工艺的研究,培养基中主要的金属离子对酵母生长及富集硒、铬能力的影响,取SC018菌种按“斜面小三角瓶培养大三角瓶培养发酵罐工艺发酵试验，分别在pH值5.0，温度3031下培养28hr。,培养基中硒浓度150mg/L, 铬浓度150mg/L，分别研究不同钠、钾、钙、镁浓度对富硒铬酵母生长和富集硒、铬能力的影响。,按一般酵母生长发酵规律，碳源、氮源和磷源于采用流加方式，连续发酵，发酵完毕后别离收集菌体，测量酵母生长量和含硒、铬的量。,生产工艺的研究培养基中,生产工艺的研究,培养基中主要的金属离子对酵母生长及富集硒、铬能力的影响,生产工艺的研究培养基中,生产工艺的研究,培养基中主要的金属离子对酵母生长及富集硒、铬能力的影响,生产工艺的研究培养基中,生产工艺的研究,培养基中主要的金属离子对酵母生长及富集硒、铬能力的影响,生产工艺的研究培养基中,生产工艺的研究,培养基中主要的金属离子对酵母生长及富集硒、铬能力的影响,生产工艺的研究培养基中,生产工艺的研究,富硒铬酵母有机硒铬的测定,富硒铬酵母经过5次洗涤后硒铬的含量根本保持稳定，硒的有机化率到达98.80，铬的有机化率到达98.94。说明富硒铬酵母中的硒和铬绝大局部是酵母中的物质结合的，而不是简单的被酵母吸附。这也是富硒铬酵母食用比较平安，生物利用度比较高的原因。由于检测方法问题，目前酵母中的硒和铬测的都是总硒和总铬，所以富硒铬酵母的硒和铬具体的以何种形式存在，以及亚硒酸钠和三氯化铬的残留等还有待进一步的研究。,生产工艺的研究,富硒铬酵母毒理学评价,受试物 富硒铬酵母粉，蛋白质含量为48，硒含量为2100ppm，铬含量为1880ppm。,实验动物：昆明种小鼠，清洁级，华中科技大学同济医学院实验动物中心提供鄂医动字第19052号。SD大鼠：清洁级离乳大鼠，上海西普尔必凯实验动物沪动合格证152号，体重5060g。,富硒铬酵母毒理学评价受试物 富硒铬酵母粉，蛋白质含量,富硒铬酵母毒理学评价,小鼠急性毒性试验：雌雄小鼠各25只，体重1821g，按体重随机分为5组，每组5雌5雄，剂量依次为0.464、1.00、2.15、4.64、10.0g/kg.bw。各组动物经停食16hr后，分两次经口给予受试动物每次灌胃容量均为0.20ml/10g.bw，间隔时间4hr，连续观察7天，记录各组动物的中毒反响和死亡只数，以确定该受试物对小鼠的半数致死量LD50,富硒铬酵母毒理学评价小鼠急性毒性试验：雌雄小鼠各2,富硒铬酵母毒理学评价,观察期间，各组动物均未发现有明显的中毒反响，也无一例死亡，说明富硒铬酵母对雌、雄性小鼠的半数致死量均为LD5010.00 g/kg.bw.。按急性毒性分级富硒铬酵母属实际无毒物质。,富硒铬酵母毒理学评价观察期间，各组动物均未发现有明,富硒铬酵母毒理学评价,遗传毒性实验,Ames试验平皿掺入法,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,小鼠精子畸形试验,富硒铬酵母毒理学评价遗传毒性实验,富硒铬酵母毒理学评价,Ames试验,富硒铬酵母在两次重复检测中，各浓度加与不加S9活化系统，各平皿内回变菌落数均在正常值范围内，也没有超过自发回变的2倍，说明富硒铬酵母Ames试验结果为阴性，无致突变性。,富硒铬酵母毒理学评价Ames试验,富硒铬酵母毒理学评价,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,三剂量组和阴性对照组PCE/NCE均在正常值范围之内，稍高于阳性对照组。,经X2检验，三剂量组微核率与同组别的阳性对照组相比，均有极显著差异P10.0g/kg.bw，属实际无毒物质，Ames试验，小鼠微核试验与精子畸形试验结果均为阴性。大鼠30天喂养试验中测定结果显示各项生理、生化指标均在正常值范围内波动，病理切片中也没有发现有与富硒铬酵母有关的毒性问题，因此可以判定富硒铬酵母通过食品平安性毒理学第一、二阶段的检验。,富硒铬酵母毒理学评价 富硒铬酵母急性毒性试验结,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力,受试物：富硒铬酵母。硒含量为2100ppm，铬含量为1880ppm，按每天摄入硒量100g/d、铬量100g/d计，折算富硒酵母约为0.05g/d，按成人60kg计算，人体推荐量折算为0.84mg/kg.bw,试验动物：清洁级BALB/c小鼠，雄性，250只，1822g，购自湖北省实验动物研究中心，合格证号为医动字第19-006号。,剂量选择：试验设三个剂量组：5倍人体摄入量4.20mg/kg.bw组、10倍人体摄入量8.40mg/kg.bw组、20倍人体摄入量16.80mg/kg.bw组、对照组和富硒酵母组2000mg/kg，剂量和富硒铬酵母20倍剂量一样。小鼠灌胃体积为0.2ml/10g.bw。,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力受试物：富硒铬酵母。硒,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力,主要评价内容：,脏器/体重比值测定,小鼠细胞免疫功能(小鼠脾淋巴细胞转化实验以及小鼠迟发型变态反响(DTH),小鼠体液免疫功能(抗体生成细胞测定以及小鼠半数溶血值测定)的影响，,小鼠单核-巨噬细胞功能(小鼠碳廓清实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力),小鼠NK细胞活性测定,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力主要评价内容：,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力,组别与剂量,(g/kg.bw),动物数(只),脾脏/体重比值,(mg/g),胸腺/体重比值,(mg/g),对照组,10,3.000.54,1.440.30,硒酵母组,10,4.000.65*,1.800.28*,5倍,10,4.090.46*,1.480.32,10倍,10,4.010.69*,1.800.23*,20倍,10,3.860.27*,1.830.15*,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力组别与剂量动物数(只)脾脏,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力,硒酵母组、10、20剂量组的胸腺体重比与对照组比较，有很显著差异，脾脏/体重比显著差异。,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力硒酵母组、10、20剂量组,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力,组别与剂量,(g/kg.bw),动物数,(只),ConA诱导脾淋巴细胞增殖,DNFB诱导DTH,耳肿程度（mg）,OD差值,对照组,10,0.0410.011,8.561.31,硒酵母组,10,0.0580.010*,11.581.11*,5倍,10,0.0510.009,10.411.16*,10倍,10,0.0580.011*,11.571.17*,20倍,10,0.0610.014*,9.351.04,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力组别与剂量动物数ConA诱,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力,小鼠细胞免疫功能说明，在脾淋巴细胞转化试验中，硒酵母组和10倍剂量组与对照有显著差异，而20倍剂量组有很显著差异。硒酵母和10倍剂量组相当。,耳肿试验中硒酵母组、5、10倍剂量组与对照组比较有很显著差异。硒酵母组和10倍剂量组水平相当。,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力小鼠细胞免疫功能说明，在脾,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力,组别与剂量,(g/kg.bw),动物数(只),抗体生成细胞检测,半数溶血值(HC,50,),溶血空斑数(/10,6,脾细胞),对照组,10,284.725.8,73.866.55,硒酵母组,20,333.227.6*,82.337.12*,5倍,10,314.044.3,81.786.12*,10倍,10,332.934.5*,82.205.16*,20倍,10,340.933.3*,84.818.31*,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力组别与剂量动物数(只)抗体,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力,小鼠体液免疫功能说明，在抗体生产细胞试验中，硒酵母组、10倍剂量组与对照组相比较，有显著性差异，20倍剂量组与对照组相比较，有很显著性差异。,在小鼠半溶血值试验中，硒酵母组、5、10倍剂量组与对照组相比较，有显著性差异，20倍剂量组与对照组相比较，有很显著性差异。呈阳性结果。硒酵母组和10倍剂量组相当。,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力小鼠体液免疫功能说明，在抗,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力,组别与剂量,(g/kg.bw),动物数,(只),小鼠碳廓清实验,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力,吞噬指数,吞噬率 (%),吞噬指数,对照组,10,4.2860.505,20.44.3,0.320.05,硒酵母组,10,5.2350.618*,24.54.3*,0.400.07*,5倍,10,5.0540.628*,20.94.0,0.380.06,10倍,10,5.2320.612*,24.04.6*,0.410.07*,20倍,10,5.6120.655*,26.34.7*,0.400.06*,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力组别与剂量动物数小鼠碳廓清,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力,小鼠单核巨噬细胞功能试验结果说明，在小鼠碳廓清试验中，硒酵母组、三个剂量组与对照组相比较，有很显著性差异，呈阳性结果。,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率经方差分析，硒酵母组、10、20倍剂量组吞噬率与对照组相比较，有显著性差异，呈阳性结果。吞噬指数经方差分析，硒酵母组、10、20倍剂量组对照组相比较，有显著性差异，呈阳性结果。硒酵母组和10倍剂量组相当。,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力小鼠单核巨噬细胞功能试验,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力,组别与剂量,(g/kg.bw),动物数(只),NK细胞活性%,对照组,10,23.466.70,硒酵母组,10,28.572.36*,5倍,10,26.145.39,10倍,10,23.761.99,20倍,10,30.652.82*,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力组别与剂量动物数(只)NK,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力,NK细胞活性测定试验说明，硒酵母组、20倍剂量组与对照组比较，有显著性差异，呈阳性结果。,富硒铬酵母功能学评价提高免疫力NK细胞活性测定试验说明，,富硒铬酵母功能学评价抗氧化,受试物：富硒铬酵母粉，硒含量为2100ppm，铬含量为1880ppm，按每天摄入硒量100g/d、铬量100g/d计，折算富硒酵母约为0.05g/d，按成人60kg计算，人体推荐量折算为0.84mg/kg.bw,实验动物：昆明种小鼠，清洁级，共计60只，其中老龄鼠10月龄40只，体重433g；青年鼠2月龄10只，体重202g华中科技大学同济医学院实验动物中心提供，医动字19052号。,富硒铬酵母功能学评价抗氧化受试物：富硒铬酵母粉，硒含量为,富硒铬酵母功能学评价抗氧化,试验分组：50只老龄小鼠按体重随机分成5组，即低、中、高三个剂量组盒一个老年对照组和硒酵母对照组，10只青年小鼠作为青年对照组。硒酵母对照组的硒含量和高剂量组一致，三个剂量组分别按人体推荐量的5、10、20(4.20、8.40、16.80mg/kg.bw)倍经口灌胃给予受试物。两个对照组那么以蒸馏水灌胃，各组动物灌胃容量均为0.20ml/10g.bw。,富硒铬酵母功能学评价抗氧化 试验分组：50只老龄小,富硒铬酵母功能学评价抗氧化,检测指标,血清MDA含量,红细胞SOD活性,血清GSH-Px活性,富硒铬酵母功能学评价抗氧化检测指标,富硒铬酵母功能学评价抗氧化,剂量,（g/kg.bw）,动物数,（n）,血清MDA,(nmol/mL),血清GSH-Px,(U),红细胞SOD,(,Nu/mgHb,),青年对照,10,5.910.74,90.98.5,21.101.57,老年对照,10,9.461.22,63.56.8,17.441.53,硒酵母组,10,8.201.03,*,73.17.8,*,19.191.52,*,5倍,10,8.691.10,69.37.4,18.421.76,10倍,10,8.150.98,*,72.37.2,*,19.201.45,*,20倍,10,7.961.08,*,74.89.3,*,19.431.66,*,富硒铬酵母功能学评价抗氧化剂量动物数血清MDA血清GSH,富硒铬酵母功能学评价抗氧化,硒酵母组、10倍、20倍剂量组血清,MDA,含量明显低于老龄对照组、,差异有显著性,；硒酵母组和三剂量组血清MDA水平明显高于青年对照组，有,很显著差异,。硒酵母组和10倍剂量组水平相当。,硒酵母组、10、20倍剂量组红细胞,SOD,活性明显高于老龄对照组，差异有显著形，硒酵母组、三剂量组SOD活性明显低于青年对照组，其中5倍剂量组与青年对照组间有,很显著差异,，硒酵母组和10，20倍剂量组与青年对照组间差异有,显著性,。硒酵母组水平和10倍剂量组相当。,硒酵母组，10、20倍剂量组血清,GSH-Px,活性明显高于老龄对照组，差异有,显著性,；三剂量组GSH-Px活性明显低于青年对照组，有,很显著差异,。硒酵母组和10倍剂量组相当,。,富硒铬酵母功能学评价抗氧化硒酵母组、10倍、20倍剂量组,富硒铬酵母功能学评价抗氧化,富硒铬酵母具有升高老龄模型小鼠,抗氧化酶活性和降低脂质过氧化的水平,，其中富硒铬酵母优于富硒酵母。,富硒铬酵母功能学评价抗氧化,小结和展望,利用富硒酵母和富铬酵母菌株，通过单倍体筛选、遗传标志的选择和原生质体融合等步骤，选育出一株富硒铬能力较强，且生长比较快的菌株SC018，它同时拥有了双亲细胞株的优势。,小结和展望 利用富,小结和展望,在SC018菌株的生产工艺的研究中，我们通过对发酵时间、温度、pH值、不同碳源、硒离子浓度、铬离子浓度以及钾、钠、钙、镁离子的浓度等方面进展研究，总结一套比较适合SC018的发酵工艺，生产出来的富硒铬酵母的生物量可以到达185g/L作用，硒的含量到达2100mg/kg，铬的含量到达1880mg/kg。而且生产工艺比较稳定。我们检测富硒铬酵母的硒和铬的有机化率，可以到达98.8%以上，到达国内外富硒酵母和富铬酵母的有机化率的水平。,小结和展望 在SC,小结和展望,在富硒铬酵母的毒性试验中，进展了小鼠的急性毒性试验、Ames试验，小鼠微核试验与精子畸形试验和大鼠30天喂养试验。富硒铬酵母急性毒性试验结果说明其LD5010.0g/kg.bw，属实际无毒物质，Ames试验，小鼠微核试验与精子畸形试验结果均为阴性。大鼠30天喂养试验中测定结果显示各项生理、生化指标均在正常值范围内波动，病理切片中也没有发现有与富硒铬酵母有关的毒性问题，因此可以判定富硒铬酵母通过食品平安性毒理学第一、二阶段的检验。,小结和展望 在富硒,小结和展望,在对富硒铬酵母的功能试验中，做了富硒铬酵母提高免疫力和抗氧化两个功能试验。通过免疫器官、细胞免疫功能、体液免疫功能、单核巨噬细胞功能、NK细胞活性等几个方面，进展免疫力方面的评价，结果说明富硒铬酵母能显著提高细胞免疫、体液免疫功能。能提高单核巨噬细胞的吞噬能力和NK细胞的活性，具有增强免疫力的功能，并且比富硒酵母的功能要强。,通过观察富硒铬酵母对小鼠的氧化抗氧化系统的影响，测定血清中的MDA、GSH-Px、以及红细胞的SOD指标。初步结果说明富硒铬酵母具有升高老龄模型小鼠抗氧化酶活性和降低脂质过氧化的水平，其中富硒铬酵母优于富硒酵母。,小结和展望 在对富,小结和展望,富硒铬酵母综合富硒酵母和富铬酵母的双重优势，我们已经通过菌株选育，生产工艺的优化，在大生产上生产出合格的富硒铬酵母，并进展了毒理和功能试验，试验证明该产品是平安的，并且成效要比单独的富硒酵母更好，可以作为食品、保健食品和药品的原料，我们将对硒和铬在富硒铬酵母中的存在形式和构造，以及其它的一些功能进展更深一步的研究。,小结和展望 富硒铬酵母,谢 谢！,富硒铬酵母的研究幻灯片课件,