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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,常见凝血项目的检测及临床意义解读,1,常见凝血项目的检测及临床意义解读1,凝血瀑布学说,激活,XII XIIa,XI XIa,IX IXa,PF3,VIIIa,Ca,+,内源性途径,VII-TF,VIIa-TF,外源性途径,共同途径,II IIa,X Xa,PF3,Va,Ca,+,VIII,V,Fibrinogen,Fibrin,Ca,+,Ca,+,2,凝血瀑布学说激活XII XIIaXI,D-Dimer,E,纤维蛋白凝块,纤维蛋白原,D,E,D,纤维蛋白单体,+,纤维蛋白肽,可溶性纤维蛋白,聚合体,XIIIa,凝血酶,纤溶酶,凝血和纤溶,纤维蛋白降解产物,纤维蛋白原 降解,产物,3,D-DimerE纤维蛋白凝块纤维蛋白原DED纤维蛋白单体+,凝血,我们实验室,凝血检测包括,PT,、,APTT,、,TT,、纤维蛋白原含量、,D-Dimer,、,AT-,和,FDP,的测定。现主要用于手术前患者、产前孕妇凝血功能筛查,某些凝血因子异常疾病的检测以及口服抗凝药物的监测等。,4,凝血 我们实验室凝血检测包括PT、APTT、T,凝血检测的方法学,目前可开展的血栓,/,止血成分检测主要包括三种方法:凝固法、底物显色法、免疫比浊法。,Stago,公司:,PT,、,APTT,、,FIB,、,TT,:凝固法。,D-,二聚体,/FDP,:免疫比浊法。,AT-,:发色底物速率法。,5,凝血检测的方法学目前可开展的血栓/止血成分检测主要包括三种方,摆动磁珠法,6,摆动磁珠法6,摆动磁珠法,7,摆动磁珠法7,检测原理,D-,二聚体,/FDP,检测原理,:免疫比浊法。,用光度计检测含有乳胶颗粒的悬浊液吸光度的变化。含有共价包被特异抗体的乳胶颗粒悬浊液与待检样本进行混合。抗原抗体发生反应,导致乳胶颗粒发生凝集,诱导反应介质浊度增加。浊度的增加反映在吸光度的增加上,用来测试样本中,D-,二聚体,/FDP,的水平。,AT-,检测原理,:,发色底物速率法。,AT,在肝素存在时是快速有力的凝血酶抑制物。待测血浆与肝素和过量凝血酶(试剂,1,)共同孵育;剩余凝血酶通过对合成产色底物(试剂,2,)的酶促反应来定量。由于凝血酶的数量在第一步中被血浆,AT,成比例地消耗,因此剩余的凝血酶在第二步反应中与血浆,AT,水平呈反比。此测定不受治疗剂量肝素影响。,8,检测原理 D-二聚体/FDP检测原理:免疫比浊法,PT,PT,是检查涉及外源性和共同凝血途径的过筛实验,如因子,VII,,,X,,,V,,,II,和,I。,PT,同时用于监测口服抗凝剂的用量,是监测口服抗凝剂的首选指标。,PT,试剂含肝素拮抗剂。,PT,TT,APTT,XII,XI,IX,VIII,VII,X,V,II,I,9,PT PT APTTXIIXIIXVIIIVII X V,PT,一、,PT,延长:,1,、先天性因子,、,、,、,缺乏症和低(无)纤 维蛋白原血症;,2,、获得性凝血因子缺乏:,DIC,、原发性纤溶亢进、肝病阻塞性黄疸和维生素,K,缺乏症;,3,、血循环中有抗凝物质:口服抗凝剂如肝素和抗凝血因子抗体,、,、,、,抗体。,二、,PT,缩短:先天性因子,增多症、口服避孕药、高凝状态和血栓性疾病。,三、口服抗凝剂的检测:据报道,在口服抗凝剂过程中,维持,PT,在正常对照的,1-2,倍最为适宜。,PT,TT,APTT,XII,XI,IX,VIII,VII,X,V,II,I,10,PT一、PT延长:PT APTTXIIXIIXVIII,APTT,APTT,是在体外模拟内源性凝血的全部条件,测定血浆凝固需要的时间,用以反应内源性和共同凝血途径凝血因子(因子,XII,,,XI,,,IX,,,VIII,,,X,,,V,,,II,和,I,)是否异常。,PT,TT,APTT,XII,XI,IX,VIII,VII,X,V,II,I,11,APTT APTT是在体外模拟内源性凝血的全部条件,APTT,一、,APTT,延长:,见于血友病、凝血因子,、,、,、,和纤维蛋白原缺乏;口服抗凝剂、血循环中有凝血因子抑制物、狼疮抗凝物等。,二、缩短:,见于,DIC,早期,血栓前状态及血栓性疾病。,三、监测肝素治疗:,肝素治疗期间,,APTT,维持在正常对照的,1.5-3.0,倍为宜。,肝素通过,AT-,发挥抗凝作用,,AT-,是抑制,XII,、,XI,、,IX,、,X,等,发挥作用,主要是和内源性凝血途径相关。,12,APTT一、APTT延长:12,TT,TT,是一评估纤维蛋白形成过程的检测项目,,TT,同样也是一用于补充,PT,和,APTT,的筛选实验。,原理:在预定量凝血酶作用下,正常血浆会在有限的和稳定的时间内发生凝固。,13,TTTT是一评估纤维蛋白形成过程的检测项目,TT同样也是一用,TT,TT,延长表示,F,IB,异常,质量(异常纤维蛋白原血症),数量:,先天性低或无纤维蛋白原血症;,获得性低纤维蛋白原血症(肝病,,DIC,);,存在肝素、水蛭素;,存在,FDP,。,14,TTTT延长表示14,FIB,纤维蛋白原在肝脏和巨核细胞内合成,半衰期为,3-5d,,含量,成人:,2-4g/L,;新生儿:,1.25-3g/L,。,在过量凝血酶的作用下,稀释血浆的凝固时间与血浆中的纤维蛋白原水平有直接关系。,15,FIB纤维蛋白原在肝脏和巨核细胞内合成,半衰期为3-5d,含,F,IB,临床应用,手术前的筛选试验,诊断,质量缺陷(异常纤维蛋白原血症),数量缺陷(先天性或获得性),FIB,水平升高,炎性综合征,糖尿病,肥胖,血栓性相关性疾病。,16,FIB临床应用16,D-Dimer,交联纤维蛋白的特异性降解产物,(FnDPs),继发性纤溶特有代谢产物,反映凝血与纤溶激活的标志物。,生理性:抗血栓;,降解纤维蛋白,/,原;,降解凝血因子(,FV,、,FVIII,、,FX,、,FVII,、,FXI,、,FXIII,);,病理性:纤溶亢进出血。,17,D-Dimer交联纤维蛋白的特异性降解产物(FnDPs),FDP,FgDPs,和,FnDPs,(,D-Dimer,)统称纤维蛋白(原)降解产物(,FDPs,),具有抗血小板聚集和抗凝作用。,FgDPs,:,Fg,降解产物。,18,FDPFgDPs和FnDPs(D-Dimer)统称纤维蛋白,AT-,检测的临床应用,AT-,是一种由肝脏合成的分子量约为,58000,道尔顿的糖蛋白,是一种凝血酶的抑制剂。,一、诊断遗传或获得性,AT-,缺乏症;,二、疑难,DIC,诊断标准;,三、监测肝素是否有效:,肝素抗凝作用依赖,AT,;,四、肝病(,AT,合成不足),:,与肝功能受损程度或病情严重程度相关。,19,AT-检测的临床应用 AT-是一种由肝脏合成的,影响凝血指标的相关因素,1.,放置时间对检测结果的影响与性别和年龄无统计学意义。,2.,样本量过少,2ml,样本存放时间过长,,采血部位为输液同侧,,标本含有凝块。,20,影响凝血指标的相关因素1.放置时间对检测结果的影响与性别和年,样本量,结论:血量减少使凝固时间延长,血量增加使凝固时间缩短。,21,样本量结论:血量减少使凝固时间延,放置时间长短(,4,),结论:,PT,在,0-8h,呈现下降趋势,可能与因子,活化有关,,PT,在,24h,略有升高;,APTT,(,4h,),随时间有逐渐上升的趋势,各时间点的均值均高于基线水平,,可能与,因子活性逐渐降低有关,;,TT,随时间呈逐渐上升的趋势。,FIB,值随时间的增加呈现逐渐下降的趋势,但差异并无统计学意义,,PT,、,APTT,与,TT,在多次测量的时间点上差异均由统计学意义。,22,放置时间长短(4)结论:PT在0-8h呈现下降趋势,可能与,输液同侧采血,23,输液同侧采血23,凝块,24,凝块24,凝固反应曲线,整个反应过程包括基线期、加速器、减速期和平台期(终点)。基线期代表凝血因子被激活,生成凝血酶的过程,也就是凝血的启动阶段,时间相对较长;加速和减速期代表凝血酶发挥作用,纤维蛋白凝块形成的过程;平台期凝固反应完成。,研究表明:在正常情况下,,20%-50%,的凝原物质就能满足凝血要求。所以体外实验时,一部分凝血因子消耗在一定范围对凝血影响相对较小。,血液有凝块,反应基线期几乎是没有的,反应开始前,凝血因子大部分已经处于活化状态,缩短的基线期时间可能远远大于因为凝血因子减少而延长的时间。,25,凝固反应曲线 整个反应过程包括基线期、加速器、减速,样本采集,另外,样本采集时,长时间扎止血带,静脉穿刺不能一次成功,会造成血管损伤,或组织因子进入血液,使凝血酶形成,加速血液凝固,影响检测结果。,血液有凝块,条件允许就会启动继发性纤溶系统,,D-Dimer,就会形成,必然会有,D-Dimer,升高。,26,样本采集 另外,样本采集时,长时间扎止血带,,谢谢大家!,欢迎指教!,27,谢谢大家!27,
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