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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,第六章 菌种保藏,第六章 菌种保藏,目的和管理规程,原理、方法、要点,菌种保藏机构,菌种保藏,主要内容,目的和管理规程原理、方法、要点菌种保藏机构菌种保藏主要内容,菌种衰退?,生产菌株性状的劣化或遗传标记的丢失:,1.,菌落形态的改变,2.,生长速度缓慢,3.,生产能力下降,4.,抗不良环境能力减弱(抗噬菌体、低温等),菌种衰退?生产菌株性状的劣化或遗传标记的丢失:,什么原因引起菌种退化?,1.,基因突变,2.,连续传代,3.,不良培养条件及不良保藏条件,什么原因引起菌种退化?1.基因突变,菌种退化的防止,1.,减少传代次数,2.,用单核细胞和单菌落移种传代,3.,菌种纯化,4.,采用良好培养基和培养条件,5.,科学保藏,菌种退化的防止1.减少传代次数,第一节 菌种保藏的目的和管理规程,1.,菌种保藏(,cuclture collection,),将微生物菌种用各种适宜的方法妥善保存,避免死亡、污染,保持其原有性状基本稳定。,目的:保持菌种的存活率、优良性能、生产能力,第一节 菌种保藏的目的和管理规程1.菌种保藏(cucltur,2.,菌种保藏的管理规程,符合国家相关法律法规,复核、鉴定、纯度检验、资源信息整理,菌种信息,2.菌种保藏的管理规程,菌种保藏方法课件,菌种保藏方法课件,菌种保藏方法、出入库、异地保藏备份、高致病性病原微生物和专利菌种、菌种保藏设施,定期检查纯度、生物学活性,菌种保藏方法、出入库、异地保藏备份、高致病性病原微生物和专利,3.,菌种的生物安全性分类,一类微生物(,对个体和群体危害程度,高,),二类微生物,(对个体危害程度,高,,对群体危害,较高,),三类微生物,(对个体危害程度,中度,,对群体危害较,低,),四类微生物,(对个体和群体危害程度,低,),3.菌种的生物安全性分类,3.,菌种的防护级别,一级生物防护,二级生物防护,三级生物防护,四级生物防护,3.菌种的防护级别,第二节 菌种保藏的原理、方法及要点,1.,低营养,2.,干燥,3.,隔氧,4.,低温,降低代谢速率,使细胞处于休眠状态,一、菌种保藏的原理,第二节 菌种保藏的原理、方法及要点1.低营养降低代谢速,二,菌种保藏的方法,1.,斜面保藏法,条件:,4,冰箱,相对湿度,50%,70%,保存期:,1,6,个月,适用:,细菌、放线菌或酵母菌,影响因素:,培养基和培养条件,优点:,简便、成本低,随时观察菌株性状、,缺点:,自发突变、染菌、菌种退化,二 菌种保藏的方法1.斜面保藏法条件:4冰箱,相对湿度5,2.,液体石蜡保藏法,适用范围:,广泛,保存期:,1,2,个月,方法:,灭菌、倾注、封口、直立放置,缺点:,占据空间、菌种生产能力下降,2.液体石蜡保藏法适用范围:广泛,二 菌种保藏的方法,3.,沙土管保藏法,过筛、灭菌、干燥沙土,保存期:,数年,适用:,产孢子或形成芽孢的微生物,缺点:,存活率低,制备菌种,接种,真空干燥、密封,二 菌种保藏的方法3.沙土管保藏法过筛、灭菌、干燥沙土保存,二,菌种保藏的方法,4.,麸皮保藏法(曲法保藏),方法:,灭菌、接种、干燥、低温保存,适用:,产孢子的霉菌和部分放线菌,保存期:,1,年以上,优点:,简单、经济,二 菌种保藏的方法4.麸皮保藏法(曲法保藏)方法:灭菌、接,二 菌种保藏的方法,5.,冷冻干燥保藏法,保存期:,4,冰箱,保存,5-10,年,适用:,广泛,优点:,繁琐、设备技术要求高,处理安瓿管,制备菌悬液,保护剂,冷冻干燥,真空封口,安瓿管的保藏,预冻,二 菌种保藏的方法5.冷冻干燥保藏法保存期:4冰箱,保存,6.,液氮超低温保藏法,二 菌种保藏的方法,保存期:,-150,-196,,保存,15,年,适用:,最为广泛,优点:,高效,缺点:,购置设备、费用高,分装入安瓿管,预冻,置液氮内,细胞,保护剂,封口,6.液氮超低温保藏法二 菌种保藏的方法 分装入安瓿管 预,二 菌种保藏的方法,7.,甘油保藏法,悬浮于灭菌的,10%-15%,甘油介质,保存期:,-20,冰箱,保存,0.5,1,年,超低温冰箱(,-70,)保存,10,年,优点:,简便,缺点,:需要设备超低温冰箱,二 菌种保藏的方法7.甘油保藏法悬浮于灭菌的10%-15%,三、菌种保藏的注意事项,菌种保藏前的培养,无菌操作,制备过程,菌种的存放与使用,三、菌种保藏的注意事项菌种保藏前的培养无菌操作制备过程菌种的,第三节 菌种保藏机构,中心名称,缩写,所在地,邮码,保藏范围,中国典型培养物保藏中心,普通微生物菌种保藏中心,农业微生物菌种保藏中心,工业微生物保藏中心,医学微生物菌种保藏管理中心,抗生素菌种保藏管理中心,兽医微生物菌种保藏中心,林业微生物菌种保藏中心,CCTCC,CCGMC,ACCC,CICC,CMCC,CACC,CVCC,CFCC,武汉大学,中国科学院微生物研究所,中国科学院病毒研究所,中国农业科学院,土壤肥料研究所,轻工部食品发酵工业研究所,中国医学科学院,皮肤病研究所,中国药品生物制品检定所,中国医学科学院,医药生物技术研究所,国家医药管理局,四川抗生素工业研究所,华北制药厂抗生素研究所,农业部兽医药品监察所,中国林业研究所,武汉,430072,北京,100080,武汉,430071,北京,100081,北京,100027,南京,210042,北京,100050,北京,100050,成都,610051,石家庄,050015,北京,100081,北京,100091,专利菌种,真菌,细菌,病毒,农业微生物,工业微生物,真菌,细菌,抗生素产生菌,新抗生素产生菌,抗生素工业生产菌种,兽医微生物,林业微生物,第三节 菌种保藏机构中心名称缩写所在地邮码保藏范围,小结,目的和管理规程,原理、方法、要点,菌种保藏机构,菌种保藏,小结目的和管理规程原理、方法、要点菌种保藏机构菌种保藏,
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