细菌的染色技术及大小的测定课件

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三,细菌的染色技术及微生物大小的测定,第一部分,细菌的染色技术,目的要求,染色剂和染色的原理,实验材料,实验程序,目的要求,掌握微生物的染色原理,掌握染色的基本操作技术,掌握微生物的一般染色法和革兰氏染色法,豫章故郡,洪都新府。星分翼轸,地接衡庐。襟三江而带五湖,控蛮荆而引瓯越。物华天宝,龙光射牛斗之墟;人杰地灵,徐孺下陈蕃之榻。雄州雾列,俊采星驰。台隍枕夷夏之交,宾主尽东南之美。都督阎公之雅望,棨戟遥临;宇文新州之懿范,襜帷暂驻。十旬休假,胜友如云;千里逢迎,高朋满座。腾蛟起凤,孟学士之词宗;紫电青霜,王将军之武库。家君作宰,路出名区;童子何知,躬逢胜饯。,时维九月,序属三秋。潦水尽而寒潭清,烟光凝而暮山紫。俨骖騑于上路,访风景于崇阿;临帝子之长洲,得天人之旧馆。层峦耸翠,上出重霄;飞阁流丹,下临无地。鹤汀凫渚,穷岛屿之萦回;桂殿兰宫,即冈峦之体势。,披绣闼,俯雕甍,山原旷其盈视,川泽纡其骇瞩。闾阎扑地,钟鸣鼎食之家;舸舰迷津,青雀黄龙之舳。云销雨霁,彩彻区明。落霞与孤鹜齐飞,秋水共长天一色。渔舟唱晚,响穷彭蠡之滨;雁阵惊寒,声断衡阳之浦。,遥襟甫畅,逸兴遄飞。爽籁发而清风生,纤歌凝而白云遏。睢园绿竹,气凌彭泽之樽;邺水朱华,光照临川之笔。四美具,二难并。穷睇眄于中天,极娱游于暇日。天高地迥,觉宇宙之无穷;兴尽悲来,识盈虚之有数。望长安于日下,目吴会于云间。地势极而南溟深,天柱高而北辰远。关山难越,谁悲失路之人?萍水相逢,尽是他乡之客。怀帝阍而不见,奉宣室以何年?,嗟乎!时运不齐,命途多舛。冯唐易老,李广难封。屈贾谊于长沙,非无圣主;窜梁鸿于海曲,岂乏明时?所赖君子见机,达人知命。老当益壮,宁移白首之心?穷且益坚,不坠青云之志。酌贪泉而觉爽,处涸辙以犹欢。北海虽赊,扶摇可接;东隅已逝,桑榆非晚。孟尝高洁,空余报国之情;阮籍猖狂,岂效穷途之哭!,勃,三尺微命,一介书生。无路请缨,等终军之弱冠;有怀投笔,慕宗悫之长风。舍簪笏于百龄,奉晨昏于万里。非谢家之宝树,接孟氏之芳邻。他日趋庭,叨陪鲤对;今兹捧袂,喜托龙门。杨意不逢,抚凌云而自惜;钟期既遇,奏流水以何惭?,呜乎!胜地不常,盛筵难再;兰亭已矣,梓泽丘墟。临别赠言,幸承恩于伟饯;登高作赋,是所望于群公。敢竭鄙怀,恭疏短引;一言均赋,四韵俱成。请洒潘江,各倾陆海云尔:,滕王高阁临江渚,佩玉鸣鸾罢歌舞。,画栋朝飞南浦云,珠帘暮卷西山雨。,闲云潭影日悠悠,物换星移几度秋。,阁中帝子今何在?槛外长江空自流。,路漫漫其修远兮,吾将上下而求索!,染色剂和染色原理,微生物染色的基本原理:细菌机体无色透明,与背景反差小,可将细菌染色,增加其反差;细菌在通常培养状态下总带负电荷,故可用带正电荷的碱性染料染色。,染色剂 染料按其电离后所带电荷的性质可分为以下类型:,1.,酸性染料:,如酸性复红、刚果红、伊红、藻红、苯胺黑等。,2.,碱性染料:,一般有碱性复红、中性红、孔雀绿、番红、结晶紫、美兰、甲基紫等,细菌易被碱性染料染色。,3.,中性(复合)染料:,如伊红、美兰等,,Wright,染料和,Gimsa,染料等(常用于细胞核染色)。,4.,单纯染料:,这类染料的化学亲和力低,大多是偶氮化合物,不溶于水,但溶于脂肪溶剂中,如苏丹类,的染料。,百度文库,VIP,特权福利,特权说明,服务特权,VIP,专享文档下载特权,VIP,用户有效期内可使用,VIP,专享文档下载特权下载或阅读完成,VIP,专享文档(部分,VIP,专享文档由于上传者设置不可下载只能阅读全文),每下载,/,读完一篇,VIP,专享文档消耗一个,VIP,专享文档下载特权。,年,VIP,月,VIP,连续包月,VIP,享受,60,次,VIP,专享文档下载特权,一次发放,全年内有效。,VIP,专享文档下载特权自,VIP,生效起每月发放一次,每次发放的特权有效期为,1,个月,发放数量由您购买的,VIP,类型决定。,每月专享,9,次,VIP,专享文档下载特权,自,VIP,生效起每月发放一次,持续有效不清零。自动续费,前往我的账号,-,我的设置随时取消。,共享文档下载特权,VIP,用户有效期内可使用共享文档下载特权下载任意下载券标价的文档(不含付费文档和,VIP,专享文档),每下载一篇共享文档消耗一个共享文档下载特权。,年,VIP,月,VIP,连续包月,VIP,享受,100,次共享文档下载特权,一次发放,全年内有效,赠送的共享文档下载特权自,VIP,生效起每月发放一次,每次发放的特权有效期为,1,个月,发放数量由您购买的,VIP,类型决定。,赠送每月,15,次共享文档下载特权,自,VIP,生效起每月发放一次,持续有效不清零。自动续费,前往我的账号,-,我的设置随时取消。,累积特权,在购买的,VIP,时长期间,下载特权不清零。,100W,优质文档免费下载,VIP,有效期内的用户可以免费下载,VIP,免费文档,不消耗下载特权,非会员用户需要消耗下载券,/,积分获取。,部分付费文档八折起,VIP,用户在购买精选付费文档时可享受,8,折优惠,省上加省;参与折扣的付费文档均会在阅读页标识出折扣价格。,内容特权,0,下载券文档一键搜索,VIP,用户可在搜索时使用专有高级功能:一键搜索,0,下载券文档,下载券不够用不再有压力!,无限次复制特权,VIP,有效期内可以无限次复制文档内容,不用下载即可获取文档内容,文档格式转换,VIP,有效期内可以将,PDF,文档转换成,word,或,ppt,格式,一键转换,轻松编辑!,阅读页去广告,VIP,有效期内享有搜索结果页以及文档阅读页免广告特权,清爽阅读没有阻碍。,多端互通,VIP,有效期内可以无限制将选中的文档内容一键发送到手机,轻松实现多端同步。,其他特权,抽奖特权,开通,VIP,后可以在,VIP,福利专区不定期抽奖,千万奖池送不停!,福利特权,开通,VIP,后可在,VIP,福利专区定期领取多种福利礼券。,VIP,专享精彩活动,开通,VIP,后可以享受不定期的,VIP,优惠活动,活动多多,优惠多多。,VIP,专属身份标识,当您成为百度文库,VIP,后,您的专有身份标识将被点亮,随时随地彰显尊贵身份。,专属客服,VIP,专属客服,第一时间解决你的问题。专属客服,QQ,:,800049878,VIP,礼包,百度阅读,VIP,精品版特权,享受阅读,VIP,精品版全部权益:,1.,海量精选书免费读,2.,热门好书抢先看,3.,独家精品资源,4.VIP,专属身份标识,5.,全站去广告,6.,名人书友圈,7.,三端同步,知识影响格局,格局决定命运!,染色剂和染色原理,微生物染色常用染料如下表:,实验材料,显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、接种环、载玻片、酒精灯。,石炭酸复红染液、草酸铵结晶紫染液、,革氏碘液、,95,乙醇、蕃红染液,菌种:枯草杆菌、大肠杆菌,实验程序,(细菌染色的方法和步骤),细菌染色的方法,:,1.,简单染色法:,用一种染色液染菌体后,就可以观察微生物的大小、形状和细胞排列状况,但不能鉴别微生物以及它的特殊构造等。,2.,复染色法:,用两种或两种以上染色液进行染色,有协助鉴别微生物的作用,故也称鉴别染色法。常用的有:革兰氏染色法、抗酸染色法、芽孢染色法、鞭毛染色法、细胞染色法等。,染色技术的一般过程,涂片干燥固定染色媒染脱色复染水洗干燥镜检,实验程序,(简单染色的方法和步骤),简单染色法,(,一般染色法,),1.,涂片,2.,干燥:,自然晾干或酒精灯高处微微加热。,3.,固定,4.,染色:,在整个涂面上滴加染色液,染色,min,。,5.,水洗:,倾去染液,用自来水细流冲洗至流下的水中无染料颜色为止。,6.,吸干,7.,镜检,实验程序,(革兰氏染色的方法和步骤),革兰氏(,Gram,)染色法,1.,涂片、干燥、固定,2.,初染:,在做好的涂面上滴加草酸铵结晶紫染液染,1min,,倾去染液,流水冲洗至无紫色。,3.,媒染:,加革氏碘液媒染,1min,,水洗。,4.,脱色:,除去残水后,滴加,95%,酒精进行脱色约,30s,45s,,接着立即用流水冲洗。,5.,复染:,滴加番红染色液染1,min,,水洗后用吸水纸吸干。,6.,镜检:,观察染色结果并绘图。,第二部分,细菌大小的测定,目的要求,学习使用目测微尺和物测微尺在显微镜下测定微生物大小的方法。,测定的工具:,目测微尺,和,物测微尺,目测微尺,是一圆形玻片,其中央刻有,5mm,长、等分为,50,格的标尺,每格的长度随使用目镜和物镜的放大倍数及镜筒长度而定。,使用前用物镜测微尺标定,,用时放在目镜内。,物测微尺,是一厚玻片,中央有一圆形盖玻片,中央刻有,1mm,长的标尺,等分为,100,格,每格为,10,m,用以标定目测微尺在不同放大倍数下每格的实际长度。,目测微尺的标定:,将目测微尺装入目镜的隔板上,刻度朝下;把物测微尺放在载物台上,刻度朝上。,用低倍镜找到物测微尺的刻度,移动物测微尺和目测微尺使两者的,第一条刻度线重合,,顺着刻度找出,第二条,完全重合,的刻度线,。,计算两刻度间目测微尺的格数和物测,微尺的格数。,由于物测微尺的刻度每格长,10m,,得,菌体大小的测定,取下物测微尺,将细菌染色标本置于载物台上,然后在油镜下用目镜测微尺测量菌体的长和宽。,注意:,校正目测微尺必须针对特定的显微镜和附件(特定的物镜、目镜、镜筒长度等)进行,而且只能在这特定的情况下才可重复使用。,实 验 三,结 束,实验安排,文库,VIP,特权福利,特权说明,服务特权,VIP,专享文档下载特权,VIP,用户有效期内可使用,VIP,专享文档下载特权下载或阅读完成,VIP,专享文档(部分,VIP,专享文档由于上传者设置不可下载只能阅读全文),每下载,/,读完一篇,VIP,专享文档消耗一个,VIP,专享文档下载特权。,年,VIP,月,VIP,连续包月,VIP,享受,60,次,VIP,专享文档下载特权,一次发放,全年内有效。,VIP,专享文档下载特权自,VIP,生效起每月发放一次,每次发放的特权有效期为,1,个月,发放数量由您购买的,VIP,类型决定。,每月专享,9,次,VIP,专享文档下载特权,自,VIP,生效起每月发放一次,持续有效不清零。自动续费,前往我的账号,-,我的设置随时取消。,共享文档下载特权,VIP,用户有效期内可使用共享文档下载特权下载任意下载券标价的文档(不含付费文档和,VIP,专享文档),每下载一篇共享文档消耗一个共享文档下载特权。,年,VIP,月,VIP,连续包月,VIP,享受,100,次共享文档下载特权,一次发放,全年内有效,赠送的共享文档下载特权自,VIP,生效起每月发放一次,每次发放的特权有效期为,1,个月,发放数量由您购买的,VIP,类型决定。,赠送每月,15,次共享文档下载特权,自,VIP,生效起每月发放一次,持续有效不清零。自动续费,前往我的账号,-,我的设置随时取消。,累积特权,在购买的,VIP,时长期间,下载特权不清零。,100W,优质文档免费下载,VIP,有效期内的用户可以免费下载,VIP,免费文档,不消耗下载特权,非会员用户需要消耗下载券,/,积分获取。,部分付费文档八折起,VIP,用户在购买精选付费文档时可享受,8,折优惠,省上加省;参与折扣的付费文档均会在阅读页标识出折扣价格。,内容特权,0,下载券文档一键搜索,VIP,用户可在搜索时使用专有高级功能:一键搜索,0,下载券文档,下载券不够用不再有压力!,无限次复制特权,VIP,有效期内可以无限次复制文档内容,不用下载即可获取文档内容,文档格式转换,VIP,有效期内可以将,PDF,文档转换成,word,或,ppt,格式,一键转换,轻松编辑!,阅读页去广告,VIP,有效期内享有搜索结果页以及文档阅读页免广告特权,清爽阅读没有
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