资源描述
Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,Click to Add Title,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,Click to Add Title,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,Click to Add Title,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,食品中细菌总数(zngsh)的测定,第一页，共12页。,三、实验方法,1、检验程序,菌落总数检验程序：,检样做成几个适当倍数(bish)的稀释液选择2-3个适宜稀释度各以1ml之量分别入灭菌平皿内每皿内加入460C适量营养琼脂菌落数报告,第二页，共12页。,2、检样稀释及培养,（1）以无菌操作，将检样25g（或25ml）剪碎以后，放于含有225ml灭菌(mi jn)生理盐水或其他稀释液的灭菌(mi jn)玻璃瓶内（瓶内预先置适当数量的玻璃珠）或灭菌(mi jn)乳钵内，经充分振摇或研磨做成1：10的均匀稀释液。,固体检样在加入稀释液后，最好置灭菌(mi jn)均质器中以8000r/min100000r/min的速度处理1min，做成1：10的均匀稀释液。,（2）用1ml灭菌(mi jn)吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌(mi jn)生理盐水或其他稀释的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液，下同），振摇试管混合均匀，做成1：100的稀释液。,（3）另取1ml的灭菌(mi jn)吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1ml灭菌(mi jn)吸管。,第三页，共12页。,（6）等琼脂凝固后，翻转平板(pngbn)，置（361）0C恒温箱内培养（482）h取出，计算平板(pngbn)内菌落数目乘以倍数，即得1g（1mL）样品所含菌落总数。,（2）用1ml灭菌(mi jn)吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌(mi jn)生理盐水或其他稀释的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液，下同），振摇试管混合均匀，做成1：100的稀释液。,（2）用1ml灭菌(mi jn)吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌(mi jn)生理盐水或其他稀释的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液，下同），振摇试管混合均匀，做成1：100的稀释液。,（6）等琼脂凝固后，翻转平板(pngbn)，置（361）0C恒温箱内培养（482）h取出，计算平板(pngbn)内菌落数目乘以倍数，即得1g（1mL）样品所含菌落总数。,在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。,（5）稀释液移入平皿后，应及时将凉至460C营养琼脂培养基可放置在（461）0C）水浴锅内保温注入平皿15ml20mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。,若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之。,为了缩短数字后面的零数，也可用10的指数来表示。,如果有不同来源的几条链，则应将每条链作为一个菌落计。,（6）等琼脂凝固后，翻转平板(pngbn)，置（361）0C恒温箱内培养（482）h取出，计算平板(pngbn)内菌落数目乘以倍数，即得1g（1mL）样品所含菌落总数。,在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。,若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之。,（3）另取1ml的灭菌(mi jn)吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1ml灭菌(mi jn)吸管。,若有两上稀释度，其生长的菌落数均在30300之间，则视两者之比如何来决定。,（5）稀释液移入平皿后，应及时将凉至460C营养琼脂培养基可放置在（461）0C）水浴锅内保温注入平皿15ml20mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。,（4）根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择23个适宜稀释度，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。,（5）稀释液移入平皿后，应及时将凉至460C营养琼脂培养基可放置在（461）0C）水浴锅内保温注入平皿15ml20mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。,（6）等琼脂凝固后，翻转平板(pngbn)，置（361）0C恒温箱内培养（482）h取出，计算平板(pngbn)内菌落数目乘以倍数，即得1g（1mL）样品所含菌落总数。,第四页，共12页。,3、菌落计算方法,（1）菌落计数方法,做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。,（2）菌落计数的报告,平板菌落数的选择,选取菌落数在30300之间的平板作为菌落总数测定(cdng)标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余的一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时（菌落之间无明显界线），若仅有一条链，可视为一个菌落数；如果有不同来源的几条链，则应将每条链作为一个菌落计。,第五页，共12页。,稀释度的选择,应选择平均(pngjn)菌落数在30300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之。若有两上稀释度，其生长的菌落数均在30300之间，则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等于2，应报告其平均(pngjn)数；若大于2则报告其中较小的数字。,若所有稀释度平均(pngjn)菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均(pngjn)菌落数乘以稀释倍数报告之。,若所有稀释度的平均(pngjn)菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均(pngjn)菌落数乘以稀释倍数报告之。,若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之。,第六页，共12页。,若所有稀释度的平均菌落数均不在30300之间，其中一部分大于300或小于30时，则以最接近(jijn)30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。,菌落数的报告,菌落数在100以内时，按其实有数报告，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的零数，也可用10的指数来表示。,思考题及实验作业,第七页，共12页。,第八页，共12页。,第九页，共12页。,第十页，共12页。,第十一页，共12页。,谢谢(xi xie)观看,第十二页，共12页。,
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