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刘 新,医学微生物学与寄生虫学,第八章,弧菌属与螺杆菌属,沈阳医学院 刘 新医学微生物学与寄生虫学第八章,重点难点,重点,霍乱肠毒素作用机制,难点,霍乱肠毒素作用机制,重点难点重点,第一节,霍乱弧菌,第一节,目录,一、生物学性状,二、致病性与免疫性,三、微生物学检查原则,四、防治原则,五、特殊护理措施,目录一、生物学性状,第七章-弧菌属与螺杆菌属课件,概述,我国将霍乱定为甲类法定传染病,。,霍乱弧菌,(,Vibrio cholerae,),引起烈性传染病霍乱,全球曾多次发生过大流行,:,津巴布韦霍乱,(,2008,),海地霍乱,(,2010,),:,感染者超过,50,万,近,7000,人死亡,概述,形态,弧形或逗点状,革兰染色阴性,单鞭毛,运动非常活泼,呈鱼群穿梭样或流星状,一、生物学性状,形态一、生物学性状,培养,耐碱不耐酸,在,pH 8.0,9.0,的碱性环境中生长迅速,常用,pH8.4,的碱性蛋白胨作为选择培养基。,在碱性琼脂平板上培养,24,小时后,形成圆形、无色、透明或半透明,S,型菌落。,培养,生化反应,霍乱弧菌能发酵葡萄糖、甘露醇及蔗糖,产酸不产气,不发酵阿拉伯胶糖,能还原硝酸盐为亚硝酸盐,吲哚试验阳性,氧化酶试验,阳性,生化反应,硝酸盐还原反应,(,1,)原理:霍乱弧菌能使硝酸盐还原为亚硝酸盐,当加入硫酸后生成亚硝酸吲哚,呈红色反应。,(,2,)方法:将待检菌接种于蛋白胨水中,置,35,孵育,24h,,加入浓硫酸数滴,观察。,(,3,)结果:呈红色者为阳性。,硝酸盐还原反应,根据,O,抗原不同,抗原构造与分型,现已有,155,个血清群,其中,O1,群、,O139,群引起霍乱,根据表型差异,O1,群霍乱弧菌可分为两个生物型,古典生物型,El Tor,生物型,根据O抗原不同抗原构造与分型现已有155个血清群其中O1群、,抵抗力,El Tor,生物型和其他非,O1,群霍乱弧菌在外环境中的生存力较古典型为强,本菌不耐酸,不耐热,抵抗力El Tor生物型和其他非O1群霍乱弧菌在外环境中的生,鞭毛运动:有助于细菌穿过肠黏膜表面黏液层而接近肠壁上皮细胞。,普通菌毛:是细菌定居于小肠所必须的因子。,1.,鞭毛、菌毛,致病物质,二、致病性与免疫性,鞭毛运动:有助于细菌穿过肠黏膜表面黏液层而接近肠壁上皮细胞。,2.,霍乱肠毒素(,choleratoxin,),:,活性亚单位,B,亚单位(,ctxB,),A,亚单位(,ctxA,),与受体介导,A,亚单位进入细胞,1A+5B,2.霍乱肠毒素(choleratoxin):活性亚单位B亚,B,亚单位与小肠黏膜上皮细胞,GM1,神经节苷脂受体结合,介导,A,亚单位进入细胞。,霍乱肠毒素作用机制,B亚单位与小肠黏膜上皮细胞GM1神经节苷脂受体结合,介导A亚,A,亚单位裂解为,A,1,和,A,2,两条多肽,,A,1,亚单位发挥毒性作用。,A亚单位裂解为A1和A2两条多肽,A1亚单位发挥毒性作用。,G,蛋白,Gs,活化腺苷酸环化酶,ATP cAMP,A,1,G蛋白 Gs 活化腺苷酸环化酶A,胞内,cAMP,,导致肠腺上皮细胞分泌功能亢进,分泌,Na,+,、,K,+,、,HCO,3,-,和水,大量水和电解质在肠腔堆积,引起剧烈腹泻与呕吐。,胞内cAMP,导致肠腺上皮细胞分泌功能亢进,分泌Na+、K,第七章-弧菌属与螺杆菌属课件,所致疾病,霍乱,传染源:病人及无症状感染者,传播途径:主要是通过污染的水源或食物经口摄入,二、致病性与免疫性,所致疾病霍乱传染源:病人及无症状感染者二、致病性与免疫,临床表现,上吐下泻:剧烈腹泻和呕吐(米泔水样腹泻物),大量水分和电解质丧失,低容量性休克和肾衰竭(死亡率高达,60%,),O139,型更严重,临床表现,第七章-弧菌属与螺杆菌属课件,感染霍乱弧菌后,机体可获得牢固免疫力,免疫性,感染霍乱弧菌后,机体可获得牢固免疫力免疫性,标本,直接镜检,分离培养,涂片见,G,-,性弧菌,鱼群状排列,悬滴法观察细菌呈穿梭样运动,碱性蛋白胨水增菌,选择培养基为,TCBS,玻片凝集反应,病人粪便,肛拭(流行病学调查包括水样),三、微生物学检查,标本直接镜检分离培养涂片见G-性弧菌,鱼群状排列碱性蛋白胨水,严密隔离、观察病情、及时发现并纠正休克。,最可靠、有效的预防措施是改善卫生条件,特别是供水卫生。,应用,O1,群霍乱弧菌死疫苗皮下注射为主要特异性预防措施,但保护力不强,(,50%,左右,),,且持续时间短,。,治疗应选择使用四环素或环丙沙星抗菌药物,。,补液,预防失水导致的休克和酸中毒是关键。,四、防治原则,严密隔离、观察病情、及时发现并纠正休克。四、防治原则,患者需按消化道传染病严密隔离,严格遵守消毒隔离制度,消毒患者用物及排泄物,以防交叉感染。,重症患者要绝对卧床,针对剧烈泻吐应暂停饮食,呕吐停止及腹泻缓解可行流质饮食。,补液为霍乱的基础治疗,补液原则:早期、迅速、适量,先盐后糖,先快后慢。,注意纠正酸中毒、补钙,必要时补钾。,五、霍乱特殊护理措施,患者需按消化道传染病严密隔离,严格遵守消毒隔离制度,消毒患者,第二节,副溶血弧菌,第二节,概述,副溶血性弧菌,(,V,parahemolyticus,),沿海地区流行,根据菌体,O,抗原不同,现已有,13,个血清群,主要引起食物中毒,概述,第二节 副溶血弧菌,某家庭周末,食海鲜后,,餐后约,6,小时一家三口相继出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻。腹泻次数不等,大便多为,水便,,白细胞数均为正常,经常规治疗,3d,后均恢复正常。,思考题:,1,根据上述情况,你认为属哪种细菌性食物中毒?,2,引起食物中毒的细菌有哪些?主要鉴别要点是什么?,案例,第二节 副溶血弧菌某家庭周末食海鲜后,餐后约6小时一家三口,第二节 副溶血弧菌,雷同于其他引起人类感染的弧菌,特征:嗜盐(,halophilic,),培养以含,3.5%,8%NaCl,为宜,抵抗力:不耐热,,90,C1,分钟即被杀死,不耐酸,,50%,食醋中,1,分钟死亡,神奈川现象(,Kanagawa phenomenon,,,KP,),生物学特性,第二节 副溶血弧菌雷同于其他引起人类感染的弧菌生物学特性,第二节 副溶血弧菌,副溶血性弧菌在普通血平板上不溶血或只产生,溶血,在特定条件下,某些菌株在含高盐(,70g/L,)的人,O,型血或兔血及以,D-,甘露醇作为碳源的,wagatsuma,琼脂平板上可产生,溶血。,来自患者的菌株中,96.5%,为,KP,+,,而来自海产品及海水的菌株仅,1,为,KP,+,阳性。,神奈川现象(,Kanagawa phenomenon,KP,),第二节 副溶血弧菌副溶血性弧菌在普通血平板上不溶血或只产生,第二节 副溶血弧菌,副溶血性弧菌引起的食物中毒,烹饪不当的海产品:常见的为海蜇、海鱼、海虾及各种贝类。,盐腌制品,因食物容器或砧板生熟不分污染后,发生食物中毒。,潜伏期,572,小时,可从自限性腹泻至中度霍乱样病症。,免疫力不强。,第二节 副溶血弧菌副溶血性弧菌引起的食物中毒烹饪不当的海产,第二节 副溶血弧菌,标本采集:患者粪便、肛拭或剩余食物,分离培养:,SS,琼脂平板或嗜盐菌选择平板,嗜盐性试验与生化反应,诊断血清进行鉴定,诊断,第二节 副溶血弧菌标本采集:患者粪便、肛
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