抗生素类药物分析课件

单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,Your company slogan,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,二级,三级,四级,五级,*,在低微浓度下即可对某些生物（病原微生物）的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称,内酰胺类,氨基糖苷类,四环素类,大环内酯类,多烯大环类,多肽类,1.抗生素（,antibiotics）,2.分 类,一、概 述,在低微浓度下即可对某些生物（病原微生物）的生命活,化学纯度较低,活性组分易发生变异,稳定性差,3.来 源,4.抗生素的特点,化学合成,半合成,生物合成（发酵）,生产工艺复杂,发酵过程不易控制，易受污染,原因,一、概 述,化学纯度较低 3.来 源4.抗生素的特,鉴别：物理化学方法、微生物法,检查：水分、异常毒性、热原、细菌内毒素、降压物质等,含量/效价测定：,微生物法：,与临床疗效吻合，灵敏度高，但操作复杂费时；,理化方法：,准确度与专属性较高，且操作简便，但与临床疗效有偏差,5.抗生素质量分析,一、概 述,5.抗生素质量分析一、概 述,1.,化学结构,包括青霉素类和头孢菌素类,青霉素类：6-,APA,为母核 头孢菌素类：7-,ACA,为母核,中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室,二、,内酰胺类,1.化学结构包括青霉素类和头孢菌素类青霉素类：6,酸性较强（,pKa 2.5-2.8）,临床常用其碱金属盐,（水溶性好）,酸性(羧基),有多个手性碳,旋光性,青霉素类：苯环取代基,头孢菌素类：母核有共轭结构,UV（,共轭）,干燥条件较稳定，溶液不稳定,稳定性(内酰胺),2、主要,理化性质,降解,失效,氧化剂、酸、碱,酶、金属离子、,青霉素,二、,内酰胺类,酸性较强（pKa 2.5-2.8）酸性(羧基)有多个手性碳旋,1）羟肟酸铁反应：,内酰胺类 羟肟酸 显色,2）茚三酮反应,-,氨基 蓝紫色,3）双缩脲反应,内酰胺类 紫红色,4）光谱法（,UV、NMR）,5）,色谱法（,HPLC、TLC）,NH,2,OHHCl,NaOH,Fe,3+,H,+,茚三酮,碱性酒石酸铜,呈色反应,3、,鉴 别,二、,内酰胺类,1）羟肟酸铁反应：NH2OHHClFe3+茚三酮碱性酒石酸,二、,内酰胺类,4,、检 查,聚合物,有关物质和异构体,吸光度,残留溶剂,结晶性,二、内酰胺类4、检 查聚合物,5、,含量测定,-,碘量法（,ChP2000）,二、,内酰胺类,原理：青霉素与头孢菌素本身不与碘反应，但其,碱性降解产物可消耗碘,青霉素族,头孢菌素族,NaOH,水解,4,I,2,H,+,8,I,-,I,2,+2Na,2,S,2,O,3,2NaI+Na,2,S,4,O,6,定量过量,剩 余,5、含量测定二、内酰胺类原理：青霉素与头孢菌素本,5、,含量测定,-,碘量法（,ChP2000）,反应分两步进行：,水解反应,(按化学计算量进行),氧化-还原反应,(无定量关系，受温度、,pH,值和时间等因素影响，,应严格控制反应条件并采用标准品平行对照测定),5、含量测定-碘量法（ChP2000）反,5、,含量测定,-,碘量法（,ChP2000）,因样品中杂质会消耗碘，故应作空白试验。,加入样品，不加碱,；,其余试剂（醋酸盐缓冲液，碘液，硫代硫酸钠）都要加碱。,空白试验:,空白试验与经典空白试验不同：,5、含量测定-碘量法（ChP2000）因,5、,含量测定,-,碘量法（,ChP2000）,含量,对照品,V,样空,-,V,样,W,对,V,对空,-,V,对,W,样,灵敏度高：样品:碘 =1:8,反应条件、实验操作要求高,1份含量,V,对,、,V,对空,V,样,、,V,样空,加试剂次序、反应时间、滴定速度相同,特 点：,5、含量测定-碘量法（ChP2000）含,5、,含量测定,-,电位配位滴定法（汞量法）,原理：青霉素不与汞盐反应，其碱性降解产物可与,Hg,2+,络和。,Hg,+,+2R-SH (RS),2,Hg+2H,+,方法说明：,a、,空白试验与碘量法类似，加样品，不加,NaOH,b、,与碘量法相比，汞量法不需对照试验,5、含量测定-电位配位滴定法（汞量法）原,5、,含量测定,-,其他常用方法,酸碱滴定法：应用广泛,硫醇汞盐法,HPLC,法：应用广泛,咪唑,HgCl,2,（,max,324345nm）,青霉素 青霉烯酸硫醇汞盐,5、含量测定-其他常用方法酸碱滴定法：应,1.,化学结构,三、,氨基糖苷类,都是以,氨基环醇,与,氨基糖,缩合而成的,苷,；,分子结构中都含有多羟基；,均为碱性抗生素；,链霉素,1.化学结构三、氨基糖苷类都是以氨基环醇与氨基糖,临床应用其硫酸盐,碱性(氨基),（糖）：有多个手性碳,旋光性(糖),水 溶 性,溶解度(氨基、羟基),强酸、碱条件均可水解,稳定性(苷),2、主要,理化性质,三、,氨基糖苷类,临床应用其硫酸盐碱性(氨基)（糖）：有多个手性碳旋光性(糖),3、,鉴 别,三、,氨基糖苷类,茚三酮反应：具羟基胺类，,-,氨基酸性质,链霉素+,水和茚三酮 蓝紫色,链霉素,N-,甲基葡萄糖胺,N-,甲基葡萄糖胺（,Elson-Morgan）,反应：,红 色,水解,对二甲氨基苯甲醛,乙酰丙酮,OH,-,3、鉴 别三、氨基糖苷类茚三酮反应：具羟基胺类，-氨基酸,OH,-,重排,Fe,3+,8-羟基喹啉,NaOBr,OH,-,水解,坂口（,Sakaguchi）,反应：(链霉胍特有）,麦芽酚（,Maltol),反应：(链霉糖特有）,三、,氨基糖苷类,-鉴别,链霉素 麦芽酚 紫红色,链霉素 链霉胍,橙红,硫酸盐反应,或,-,萘酚,OH-Fe3+8-羟基喹啉 NaOBrOH-坂口（Sak,4、,检 查,-,来 源：,发酵中产生,BP:,薄层色谱法（杂质对照品法）,要求：,NC2 2000，C2a,峰和,C2,峰的分离度应符合要求，重复进样,RSD2.0%,三、,氨基糖苷类,链霉素中链霉素,B,的检查,庆大霉素,C,组分测定（系统适用性试验）,色谱柱：,ODS,流动相：,H,2,O-HAc-MeOH,配制的庚烷磺酸钠溶液(0.2,M)，,必要时调节甲醇的含量。,检测波长：,330,nm（,邻苯二甲醛柱前衍生）,4、检 查-来 源：发酵中产生B,4、,含 量 检 测,三、,氨基糖苷类,氨基糖苷类 含量检测,微生物法、,HPLC,法等,4、含 量 检 测三、氨基糖苷类氨基糖苷类 含量检测微生物法,四、,四环素类,1.,化学结构,四、四环素类 1.化学结构,四、,四环素类,-,OH：,酸性,N(CH,3,),2,：,碱性,与酸、碱均可成盐,临床多用盐酸盐,两 性,旋光性,易发生异构化，降解等反应，性质不稳定,稳定性,酚羟基、烯醇基与,Ca,2+,、Mg,2+,络合显色,与金属离子络合,2、主要,理化性质,UV,和荧光,四、四环素类-OH：酸性两 性旋光性易发生异构化，降解等反应,四、,四环素类,2,.,主要理化性质,碱 性,C,环开环，形成内酯 异四环素,弱酸性（,pH2-6）A,环,C-4,异构化 差向四环素,酸性（,pH 2）C,环脱水 脱水四环素,四、四环素类 2.主要理化性质碱 性,四、,四环素类,A,A,pH2.06.0,差向异构体,D,D,D,C,B,B,C,B,C,脱水四环素类,四、四环素类AApH2.06.0差向异构体DDDCBBCB,异四环素,OH,-,四、,四环素类,异四环素OH-四、四环素类,四、,四环素类,3,.,鉴 别,1）浓硫酸反应,2）,FeCl,3,反应：（酚羟基）显红色褐色,3）,TLC、HPLC,4）,荧光：（含共轭双键）紫外灯照射下产生不同颜色荧光,HPLC法,4,.,检 查,TLC、HPLC法,杂质吸收度（降解产物颜色较深）,残留溶剂,5,.,含 量,四、四环素类 3.鉴 别1）浓硫酸反应HPLC法,五、高分子杂质的检查,内源性：药物自身聚合物,来源于生产过程、贮存过程、使用不当,外源性：蛋白、多肽、多糖及其与药物的结合物,来源于发酵过程,临床应用其硫酸盐,高分子杂质,凝胶色谱法：葡聚糖凝胶,Sephadex G-10,杂质控制方法,五、高分子杂质的检查内源性：药物自身聚合物 高分子杂质凝胶,感谢亲观看此幻灯片，此课件部分内容来源于网络，,如有侵权请及时联系我们删除，谢谢配合！,感谢亲观看此幻灯片，此课件部分内容来源于网络，,