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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,土壤中分解尿素的细菌分离与应用课件,1,CO(NH,2,),2,脲酶,+CO,2,2NH,3,+H,2,O,能被植物利用,不能被植物利用,CO(NH2)2脲酶+CO22NH3+H2O能被植物利用,2,课题,2,:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数,选修一:专题,2,微生物的培养与应用,课题2:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数选修一:专题2,3,1.,研究培养基对微生物的选择作用,;,2.,分析研究思路的形成过程,;,3.,进行微生物数量的测定,.,1.研究培养基对微生物的选择作用;,4,1996,年,美国微生物学家,布鲁克,于在美国黄石国家公园的一个热泉中发现,耐高温的,Taq,细菌,,并,分离到,耐高温的,Taq DNA,聚合酶,的。,实例:耐高温,DNA,聚合酶的寻找,为什么,Tap,细菌能从,高温的热泉中被筛选出来呢?这对我们寻找目的菌株有何启示?,1996年,美国微生物学家布鲁克于在美国黄石,5,实验室中如何筛选我们想要的微生物呢?,加入青霉素的培养基,细菌不生长,,酵母菌、霉菌等真菌能生长,不加含碳有机物的无碳培养基,分离,自养型微生物,(,一,),筛选菌株,实验室中如何筛选我们想要的微生物呢?加入青霉素的培养基(一),6,请你根据这一思路,分析旁栏中本课题将用到的培养基配方,回答问题:,KH,2,PO,4,1.4g,Na,2,HPO,4,2.1g,MgSO,4,7H,2,O,0.2g,葡萄糖,10.0g,尿素,1.0g,琼脂,15.0g,将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至,1000mL,请你根据这一思路,分析旁栏中本课题将用到的培养基配方,7,允许,特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,叫做选择培养基。,以尿素为唯一氮源的培养基,允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他,8,1,、显微镜直接计数:,利用血球计数板,(,血细胞计数板,),,在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。,(不能区分死菌和活菌),(,二,),统计菌落数目,1、显微镜直接计数:利用血球计数板(血细胞计数板),,9,2,、稀释涂布平板法(活菌计数法),一个菌落,一个活菌,选,30300,个菌落的平板统计。,在稀释度足够高时,两位同学用稀释涂布平板法,测定同一土壤样品中的细菌数。请对两位同学的操作及结果进行评价!,每个稀释度取,3,个平板取其平均值。,2、稀释涂布平板法(活菌计数法)一个菌落 一个活菌 选,10,例,、,某同学在稀释倍数为,10,6,的培养基上测得,平板上的菌落数的平均值是,234,,那么,那么每毫,升样品中菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体,积为,0.1 mL,)(),A.2.3410,8,B.2.3410,9,C.234,D.23.4,这个数据和真实值完全一样吗?,统计的菌落往往比活菌的实际数目低。,每克样品中的菌株数,(CV)M,例、某同学在稀释倍数为106的培养基上测得这个数据和,11,(,三,),设置对照实验,阅读课本,分析,A,同学出现此结果的可能原因?,培养基被杂菌污染了,选择的土样不同,操作有误,原因,如何通过,设置对照,实验找出原因?,(三)设置对照实验阅读课本,分析 A同学出现此结果的可能原因,12,如何设置对照实验证明是,培养基污染,影响实验结果?,1.,A,同学的培养基不加土样培养,(空白对照组),结果,无菌落,有菌落,培养基没有污染,培养基污染,说明,如何设置对照实验证明是培养基污染影响实验结果?1.A同学的培,13,如何设置对照实验证明,土样不同,还是,操作有误,影响实验结果?,2,、其他同学取与,A,同学相同的土样进行实验,结果,土样不同,A,的操作有问题,说明,与,A,同学,一致,与,A,同学,不一致,如何设置对照实验证明土样不同还是操作有误影响实验结果?2、其,14,谢谢大家!,谢谢大家!,15,
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