G试验临床推广ppt课件

Click to edit Master title,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,Part III,临床评价,Part I,G,试验-深部真菌感染检测,内毒素检测革兰阴性菌检测,Part II,Part III临床评价Part IG试验-深部真菌感染检,侵袭性真菌感染（,IFI,）,的定义,定义,:,指致病性真菌侵犯皮 下组织、黏膜、肌肉和内脏器官等所引起的真菌感染性疾病，危害性较大。,条件致病性真菌,1.念珠菌属-念珠菌血症,2.曲霉菌属-侵袭性肺曲霉菌病（IPA),3.,其他,MB-80,系统简介,侵袭性真菌感染,G,试 验,侵袭性真菌感染（IFI）的定义定义:条件致病性真菌MB-8,侵袭性真菌感染的特点,1.,不产生内毒,素和外毒素,4.,早期症状无特异性，往往被原发病掩盖，病程长，发现较晚，死亡率高,2.,致病力一般,较弱，机体免,疫低下时发生,3.,感染菌种变化，,白色念珠菌感染下降，曲霉菌感染增长趋势上升明显,MB-80,系统简介,侵袭性真菌感染,G,试 验,侵袭性真菌感染的特点1.不产生内毒4.早期症状无特异性，,1.,长期使用广谱抗生素,2.,抗肿瘤药物和免疫抑制剂治疗,5,.,AIDS,感染、基础类疾病,侵袭性真菌病（IFD）的诱因,4.,骨髓和实体器官移植,3,.,插管等侵袭性治疗,MB-80,系统简介,侵袭性真菌感染,G,试 验,6,.,使用激素治疗的病人,1.长期使用广谱抗生素 2.抗,侵袭性真菌感染（IFI）现状,IFI,诊断困难及漏诊情况严重,IFI,发生率不断增加,IFI,感染病死率居高不下,1,2,3,MB-80,系统简介,侵袭性真菌感染,G,试 验,侵袭性真菌感染（IFI）现状IFI诊断困难及漏诊情况严重IF,严重真菌感染迅速上升势头,危重病人的存活期,延长,延长了真菌感染的 高 危 期,使此类患者业已增加的人数进一步扩大,医学和相关科学的进步,是日益严重的威胁！,严重真菌感染迅速上升势头 危重病人的存活期延长延长了真菌感染,国内深部真菌感染不容忽视,引自北京协和医院王爱霞主任课件,MB-80,系统简介,侵袭性真菌感染,G,试 验,20,年内院内149例真菌感染的变化,国内深部真菌感染不容忽视 引自北京协和医院王爱霞主任课件,侵袭性真菌感染（IFI）现状,MB-80,系统简介,侵袭性真菌感染,G,试 验,IFI,诊断困难及漏诊情况严重,IFI,发生率不断增加,IFI,感染病死率很高,1,2,3,侵袭性真菌感染（IFI）现状MB-80系统简介侵袭性真菌感染,美国四大医疗中心做的关于IFI的一项回顾性研究,Garey KW et al.Clin Infect Dis 2006,43:2531.,死亡率(%),延迟治疗时间（d）,美国四大医疗中心做的关于IFI的一项回顾性研究Garey K,侵袭性真菌感染（IFI）现状,MB-80,系统简介,侵袭性真菌感染,G,试 验,IFI,诊断困难及漏诊情况严重,IFI,发生率不断增加,IFI,感染病死率很高,1,2,3,侵袭性真菌感染（IFI）现状MB-80系统简介侵袭性真菌感染,尸检研究发现：,北京协和医院1953-1993年间3447例尸检，发现深部真菌感染85例，其中生前明确真菌感染诊断者仅5例，占5.9，,漏诊率高达94.1。,诊断困难的主要原因,：,-,临床表现不典型，易被基础疾病所掩盖,-确诊常需侵入性手段获得组织标本，侵入性操作常因患者,的病情所限难以实施,-真菌检测项目开展相对不足或滞后,IFI,诊断困难及漏诊情况严重,MB-80,系统简介,侵袭性真菌感染,G,试 验,尸检研究发现：诊断困难的主要原因：IFI,方 法,特 点,传 统,检 查,直接培养真菌法,耗时长,阳性率低，结果是定性的，有些标本采集困难。可以区分菌种。,辅助方法：临床表现，免疫学，病理学，影像学检查等,观察期不确定，费时费力，特征性不明显并对医师的专业水平要求高,非传统,检查,1.G,试验：,通过检测(1-3)-D-葡聚糖的含量，判断是否有真菌感染,耗时短，灵敏度高，特异性强，定量检测可判断感染严重程度,2.GM,试验：,曲霉属半乳甘露聚糖抗原检测。判断是否曲霉属真菌感染,3.PCR,技术：,真菌的抗原、抗体及代谢产物的血清学检查和真菌核酸检测,侵袭性真菌感染的临床检测方法对比,MB-80,系统简介,侵袭性真菌感染,G,试 验,方 法特 点传 统直接培养真菌法耗时长,阳性率低，结果,G,试 验,1-3-D,-葡聚糖,可特异性激活鲎（,Limulus,）变形细胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固，故称G试验。,MB-80,系统简介,侵袭性真菌感染,G,试 验,（,1-3,）,-D-Glucan,LAL-RM(,反应物,),G,因子,活化,G,因子,凝固酶原,凝固酶,凝固蛋白原,凝固蛋白（凝胶）,试验反应机理图：,G 试 验1-3-D-葡聚糖可特异性激活鲎（Limulu,b,1,6,葡聚糖,磷脂双分子层,几丁质,麦角固醇,b,1,3,葡聚糖,合成酶,甘露糖蛋白,MB-80,系统简介,侵袭性真菌感染,G,试 验,（1,3）-D-葡聚糖广泛存在于真菌细胞壁中，占真菌壁成分50%以上。,是真菌细胞壁上的特有成分,用于侵袭性真菌感染的早期诊断,1-3-D-,葡聚糖本质及特点,磷脂双分子层几丁质麦角固醇b1,3葡聚,(1-3)-D-,葡聚糖特性,1.,2.,3.,对热极为稳定，高压,121,并不能使其灭活。在念珠菌和曲霉菌细胞壁中含量较多，对,G,试验灵敏,。,当真菌进入人体血液或深部组织后，经吞噬细胞的吞噬、消化等处理后，,(1-3)-D-,葡聚糖可从胞壁中释放出来，从而使血液及其它体液中含量增高。当真菌在体内含量减少时，机体免疫系统可将其清除,。,在浅部真菌感染中，,(1-3)-D-,葡聚糖未被释放出来，故其在体液中的量不增高,。,MB-80,系统简介,侵袭性真菌感染,G,试 验,(1-3)-D-葡聚糖特性1.2.3.,G,试验检测的特点,可检测多种致病真菌感染：,念珠菌，曲霉，肺孢子菌，镰刀菌，地霉，毛孢子菌等,MB-80,系统简介,侵袭性真菌感染,G,试 验,G,试验检测一般先于临床症状平均四天,BG,值升高平均早于发热5 d，,早于呼吸道症状平均107 d，,早于HRCT检查平均93 d。,高 蕾，周 新,.(1,，3)一 D葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的诊断意义J.中国感染与化疗杂志,2008,3(2),123-125.,对于念珠菌血症,G,试验检测是首选检查,J.Clin.Microbiol.2008.46:10091013.,G试验检测的特点 可检测多种致病真菌感染：MB-80系统简介,侵袭性真菌感染的诊断标准,EORTC/MSG2008,修订版,宿主因素,临床特征,病原学,真菌镜检,真菌培养,组织病理学检查,血清学检查方法（间接证据）,G-test,临床诊断,Clinical Infectious Diseases 2008;46,侵袭性真菌感染的诊断标准EORTC/MSG2008修订版宿,微生物学标准:,（1）痰或支气管肺泡灌洗液培养呈霉菌,（2）鼻窦抽取液直接镜检或细胞学检查，或培养呈霉菌阳性；,（3）痰或支气管肺泡灌洗液经直接镜检或细胞学检查发现霉菌或隐球菌；,（4）支气管肺泡灌洗液、脑脊液或2份以上的血液样品呈曲霉菌抗原（半乳甘露聚糖检测、GM试验）阳性；,（5）血液中(1,3)-D葡聚糖检测（G试验）阳性；,（,6,）血中隐球菌抗原阳性；,（7）无菌体液中经直接镜检或细胞学检查发现真菌；,（8）未留置尿管的情况下，连续2份尿样培养均呈酵母菌阳性或尿检见念珠菌管型；,（9）血培养呈酵母菌阳性；,（10）肺部异常，与下呼吸道感染相关的标本中（血液、痰液和支气管肺泡灌洗液等）多次培养无任何致病细菌。,微生物学标准:（1）痰或支气管肺泡灌洗液培养呈霉菌,宿主,因素,临床,表现,+,组织,病理,+,微生,物学,+,Ascioglu,et al,2002,Clin Infect Dis,34 7-14,拟诊,临床诊断,确诊,侵袭性真菌感染的诊断标准,：,宿主临床+组织+微生+Ascioglu et al 2002,0,36,37,38,39,40,41,体温(C),实验室检查指导临床诊断与治疗,组织培养,+,组织学检查,+,G,、GM试验,+,PCR,+,治疗策略,疾病疑似,程度,-7,0,7,14,21,28,35,42,49,56,63,-14,0.1,1,10,粒细胞(log,10,x10,9,/L,),经验性治疗,拟诊,预防,低,特异治疗,确诊,抢先治疗,临床诊断,宿主因素,-,常平 南方医科大学珠江医院 重症医学科,0363738394041体温(C)实验室检查指导临床诊,Part III,临床评价,Part I,G,试验-真菌检测,内毒素检测,Part II,Part III 临床评价Part IG试验-真菌检,内毒素定量检测,在临床治疗中的重要意义,项目介绍：,内毒素定量检测项目介绍：,定义,细菌内毒素,（,Endotoxin,）,是,G,-,菌细胞壁上的特有结构，为外源性致热原，它可激活中性粒细胞等，使之释放出一种内源性热原质，作用于体温调节中枢引起发热。内毒素的主要化学成分为,脂多糖,（LPS）中的类脂,A,。,定义细菌内毒素（Endotoxin）是G-菌细胞壁上的特,内毒素的代谢,目前实验研究认为：一般细菌内毒素在体内1-1.5小时达到最高峰值，5-6小时逐渐衰减下来。,内毒素的代谢,体内内毒素的,来源,菌体死亡或人工裂解,革兰氏阴性菌的释放,肠道内毒素的吸收,败血症时血中细菌的释放,外源性输入,体内内,毒素的,来源,体内内毒素的来源菌体死亡或人工裂解革兰氏阴性菌的释放肠道内毒,检测物质:脂多糖(内毒素主要成分),脂多糖可特异性激活鲎（,Limulus）,变形细胞裂解物中的,C,因子，再激活B因子，经过一系列反应，最终引起裂解物凝固的过程。,实验原理:,检测物质:脂多糖(内毒素主要成分)实验原理:,实验原理图,：,细菌内毒素,因子C 活化因子C,因子B 活化因子B,凝固酶原 凝固酶,凝固蛋白原 凝固蛋白（凝胶）,实验原理图：,传统热原检测方法与MB-80方法比较,传统方法,MB-80方法,实验方法,凝胶法,动态比浊法,性质,定性,定量,结果判读,肉眼观察,准确数值，打印检测报告,使用试剂,鲎试剂,革兰氏阴性菌脂多糖检测试剂盒,（具有SFDA颁发的注册证),传统热原检测方法与MB-80方法比较 传统方法 MB-8,内毒素检测的临床应用,内毒素检测,的临床应用,革兰阴性菌败血症的诊断,呼吸道感染,肝脏感染及肝硬化,胆道疾病,急性胰腺炎,溃疡性结肠炎,细菌性感染的辅助性诊,断、治疗和预后判断,原因不明的发热,外源性输注的内毒素血症的诊断,内毒素检测的临床应用内毒素检测革兰阴性菌败血症的诊断,体液内毒素水平是严重细菌性炎症的一个重要的特异性指标，而且也是脓毒症和多脏器衰竭的可靠指标。不仅可用于感染类别的鉴别诊断，也可用于感染控制和病情转归的判定。,内毒素检测的临床意义,体液内毒素水平是严重细菌性炎症的一个重要的特异,1.系统组成：,1）仪器 MB-80主机,（,MB-80(E)、MB-80(D)、MB-80(S)、MB-80(V)、MB-80(M),）,2）MB-80软件系统,3）试剂(配套真菌、内毒素试剂盒）,4）配套无热原耗材,2.系统功能：,快速定量检测,深部真菌和内毒素,，帮助临床医生早期诊断目前常规方法难以确诊的侵袭性真菌感染、革兰氏阴性菌感染，便于临床医生的早期诊断、,早期治疗及对治疗的疗效进行判定。,3.可检测标本,：,血液,、尿液、脑脊液、胸腔积液、腹水等,。,血液透析液，透析用水-（内毒素检测）,MB-80,系统,MB-80,系统简介,侵袭性真菌感染,G,试 验,1.系统组成：MB-80系统M