铜绿假单胞菌课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,铜绿假单胞菌,蒋月婷,铜绿假单胞菌,非发酵菌(,Nonfermentative Bacilli),定义,-一群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利,用葡萄糖的需氧或兼性厌氧的革兰阴,性无芽胞杆菌,非发酵菌(Nonfermentative Bacilli),发酵型 氧化型 产碱型,发酵型 氧化型,概述,非发酵菌：,G-b,葡萄糖,O/,需,O,2,或兼性厌,O,2,动力,+/,氧化酶,+/,分类：假单胞菌属 产碱杆菌属,不动杆菌属 黄杆菌属,莫拉杆菌属 窄食单胞菌属,金氏杆菌属 艾肯菌属,土壤杆菌属 丛毛单胞菌属 等,概述非发酵菌：G-b 葡萄糖O/,非发酵菌分离率,非发酵菌分离率,假单胞菌科：根据,rRNA-DNA,同源性分为,5,个,rRNA,群,rRNA,群,/,假单胞菌属,rRNA,群,/,伯克菌属,rRNA,群,/,丛毛单胞菌属、食酸菌属,rRNA,群,/,短波毛单胞菌属,rRNA,群,/,窄食单胞菌属,其它：鞘氨醇单胞菌属、希瓦菌属等,假单胞菌科：根据rRNA-DNA同源性分为5个rRNA群,假单胞菌属,Pseudomonas,种类：,铜绿假单胞菌,(,P.aeruginosa,),荧光假单胞菌,(,P.fluorescence,),恶臭假单胞菌,(,P.putica,),斯氏假单胞菌,(,P.stutizeri,),曼多辛假单胞菌,(,P.mendocina,),产碱假单胞菌,(,P.alcaligenes,),假产碱假单胞菌,(,P.pseudoalcaligenes,),假单胞菌属Pseudomonas种类：,假单胞菌属,Pseudomonas,共同特点：,G-b,菌体细长,单端,鞭毛,无芽胞,专性需,O,2,营养要求不高,35,生长，少数,4,、,42,生长,葡萄糖,O/,动力,+,氧化酶,+,可产多种色素：绿脓素 荧光素 脓玉红素,假单胞菌属Pseudomonas共同特点：,各种菌产生的色素,菌名 色素 颜色,铜绿假单胞菌 绿脓素、红脓素、青脓素、荧光素 蓝、红、黑、黄色,荧光假单胞菌 荧光素 黄绿色,恶臭假单胞菌 荧光素 黄绿色,斯氏假单胞菌 未定名黄色素 黄色,洋葱伯克霍尔德菌 未定名黄色素、紫色素 黄色、紫色,腐败希瓦讷拉菌 未定名色素 淡红褐色,各种菌产生的色素,抵抗力：,较强，对多种抗生素耐药,临床意义：,分布广泛，条件致病菌，,主要引起皮肤粘膜受损部位感染和各种医院内感染,假单胞菌属,Pseudomonas,抵抗力：较强，对多种抗生素耐药假单胞菌属Pseudomona,各种标本,血平板和,Mac,平板,可疑菌落,涂片革兰染色,革兰阴性杆菌 氧化酶,(+),、,OF,：,O,非发酵菌鉴定系统鉴定到种,微生物检验程序,各种标本,药敏试验,假单胞菌属和不动杆菌属可做,K-B,法药敏试验，嗜麦芽窄食单胞菌只有,3,种药物的,K-B,法药敏标准，其余需用稀释法或,E test,法,药敏试验,抗生素敏感试验：,A,组：,头孢他啶、美洛西林或替卡西林、哌拉西,林、庆大霉素,B,组：,头孢吡肟、头孢哌酮、氨曲南、亚胺培,南、阿米卡星、妥布霉素、环丙沙星,C,组：,头孢噻肟或头孢曲松、氯霉素、奈替米星,U,组：,羧苄西林、头孢唑肟、四环素、诺氟沙星,或氧氟沙星、磺胺甲基异恶唑,抗生素敏感试验：,铜绿假单胞菌,P.aeruginosa,铜绿假单胞菌,形态,：,G-b,菌体长短不一,球杆状或长丝状,单端单鞭毛,动力,+,无芽胞,特性,：专性需氧,营养要求不高,35+,4,42+,可形成多种不同形态的菌落,产多种色素(主要为绿脓素、荧光素),铜绿假单胞菌,形态：G-b 菌体长短不一 球杆状或长丝状 铜绿假单胞菌,生化反应：,氧化酶,+OF,：,O,硝还,+N,2,+,液化明胶+枸橼酸盐+精双水解+,乙酰胺酶+吲哚-,生化反应：,革兰染色,铜绿假单胞菌,革兰染色铜绿假单胞菌,电镜图,铜绿假单胞菌,电镜图铜绿假单胞菌,抗原：,O,抗原,(,外膜蛋白,-,保护性抗原,脂多糖,-,型特异性,),H,抗原,血清学分型,抵抗力：抵抗力强 耐干燥 不耐热,多重耐药,在室温水中长期生存 4不生长,铜绿假单胞菌,抗原：O抗原(外膜蛋白-保护性抗原铜绿假单胞菌,致病性,广泛存在环境中的,条件致病菌，,是院内感染,主要病原菌,可引起皮肤感染、呼吸道感染、泌尿道感染、,烧伤感染、囊性纤维变性等,有多种毒力因子：包括菌毛、,荚膜多糖、,内,毒素、外毒素、,绿脓菌素、,蛋白酶、磷脂酶等,铜绿假单胞菌,致病性铜绿假单胞菌,粘附素：,菌毛的神经氨酸酶分解上皮细胞表面的神经氨酸促进细菌侵入,荚膜：,多糖类物质抗吞噬细胞的吞噬作用；使细菌锚泊在细胞表面，与呼吸道感染有关,内毒素、外毒素,绿脓菌素：,绿色色素，由铜绿假单胞菌的,RpoS,基因编码产生的代谢产物，具有氧化还原活性的化合物，能催化超氧化物和过氧化氢产生有毒氧基团，引起组织损伤。在致病中起重要作用,弹性蛋白酶：,降解弹性蛋白，引起肺实质损伤和出血；降解补体和白细胞蛋白酶抑制物；可与相应抗体形成复合物，沉积于感染组织中,磷脂酶,C,粘附素：菌毛的神经氨酸酶分解上皮细胞表面的神经氨酸促进细菌侵,微生物检验,采集标本：各种临床标本,医疗器械,环境用品,检验方法：直接镜检,分离培养,(血平、,MAC,平板),鉴定,分型：血清学分型、质粒指纹图谱分型、,脉冲场凝胶电泳分型等,微生物检验采集标本：各种临床标本,脓液 痰 尿液等,血液 环境用品,分离培养 直接涂片染色,肉汤增菌 血平板,37 18-24h,可疑菌落（金属光泽、,-,溶血、产绿色素、特殊气味）,初步鉴定 最后鉴定,菌落 色素 非发酵菌鉴定系统鉴定,革兰阴性杆菌 氧化酶,(+),血清分型,检验程序,分离培养,普平：,18-24h,圆形 大小不一 边缘不整 扁平,湿润 常呈融合态 琼脂被染成绿或黄绿,血平：扁平 湿润 有,金属光泽,琼脂被染成蓝,绿或灰绿 有溶血环,MAC,平：微小无光泽,半透明,48h,后菌落呈棕色,分离培养普平：18-24h圆形 大小不一 边缘不整,鉴定,初步鉴定,菌体形态 菌落特征 产色素 气味 氧化酶,最终鉴定,非发酵菌生化鉴定系统,API-NE,试条,鉴定初步鉴定,细菌耐药机制,外膜通透性降低,产生灭活酶或钝化酶,主动外排系统将抗生素泵出胞外,抗菌药物作用靶位改变,膜孔蛋白突变,生物膜屏障作用,各种抗生素治疗铜绿假单胞菌所致感染过程中都可能发生耐药。初代敏感菌株在治疗,3,4,天后可能发生耐药，有必要重复分离菌株,本菌对多种抗生素天然耐药，常用三代头孢和氨基糖苷类联合治疗,细菌耐药机制,鉴定结果分析,从临床标本中分离出来的铜绿假单胞菌，需要排除污染因素,铜绿假单胞菌下呼吸道感染需连续三次痰培养阳性才能确立。,鉴定结果分析,典型型,大肠菌样型,粘液型,侏儒型,粗糙型,铜绿的菌落分型,典型型铜绿的菌落分型,粘液型（麦康凯平板）,粘液型（血平板）,菌落光滑凸起,成粘液状,粘液型（麦康凯平板）粘液型（血平板）菌落光滑凸起,侏儒型（麦康凯平板）,细小，无光泽半透明菌落,侏儒型（麦康凯平板）细小，无光泽半透明菌落,典型型（麦康凯平板）,菌落呈灰绿色 大小不一扁平湿润 边缘不规则呈伞状伸展 表面常可见金属光泽,典型型（麦康凯平板）菌落呈灰绿色 大小不一扁平湿润,典型型（普通平板上）,产绿脓素,琼脂染成黄绿色,典型型（普通平板上）产绿脓素,粗糙型（麦康凯平板）,菌落中央凸起,边缘扁平,表面粗糙,粗糙型（麦康凯平板）菌落中央凸起,大肠型（麦康凯平板）,菌落圆形凸起,似大肠埃希菌菌落,大肠型（麦康凯平板）菌落圆形凸起,常见非发酵菌初步分群鉴定,试验 假单胞 不动杆 产碱杆 黄杆 莫拉,菌属 菌 属 菌 属 菌属 菌属,氧化酶,+-,+,葡萄糖,O/F O/-O/-O/F -,动力,+-+-,MAC,平板生长,+/-,常见非发酵菌初步分群鉴定试验 假,知识回顾,Knowledge Review,祝您成功！,知识回顾Knowledge Review祝您成功！,