鸡胚接种技术医学课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,鸡胚接种技术,鸡胚接种技术,1,鸡胚接种技术,概况,鸡胚接种的优点：,是个有机体，有神经和血管分布及脏器构造，为病毒生长提供丰富营养物质和合适的环境。,组织分化程度较低，对大多数病毒较敏感，病毒繁殖量高。,很少携带病毒或细菌，对接种的病毒不产生抗体。,来源充足、经济，操作简便。,鸡胚接种技术,2,鸡胚接种技术,概况,鸡胚接种的缺点：,病毒通常不使鸡胚产生特异性的感染指征，必须利用另外的实验来证明病毒的存在。,被母鸡食入的抗生素会传递给鸡胚，使接种病毒繁殖受到抑制。,鸡胚本身可能携带病毒，影响病毒接种及实验结果,操作不当污染，导致鸡胚死亡,鸡胚接种技术 概况鸡胚接,3,鸡胚接种技术,鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：,Day,0,鸡胚接种技术 鸡胚的结构,4,鸡胚接种技术,鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：,Day,1,鸡胚外观无明显变化,在卵黄上可见到椭圆形的胎盾，是未来的胚区,心脏、血管、消化道、脊柱、神经系统、头、眼开始形成。,鸡胚接种技术 鸡胚的结构,5,鸡胚接种技术,鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：,Day,2,卵黄囊、羊膜、绒毛膜开始形成。,胚盘被红色血管围成樱桃形或椭圆形。,胚胎中可见一搏动的原始心脏。,鸡胚接种技术 鸡胚的结构,6,鸡胚接种技术,鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：,Day,3,鼻、腿、翅开始形成，器官出现。,尿囊开始长出，胚胎的位置与蛋的长轴垂直。,胚胎与延伸的卵黄囊血管形似蚊子。,鸡胚接种技术 鸡胚的结构,7,鸡胚接种技术,鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：,Day,4,尿囊和羊膜腔形成。,卵黄体积继续增大，卵黄囊血管包围卵黄近,1/3,。,胚胎与卵黄囊血管形似蜘蛛。,鸡胚接种技术 鸡胚的结构,8,鸡胚接种技术,鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：,Day,5,生殖腺已性分化，胚胎出现了两性的区别。,面部和鼻部开始有了雏形。,胚胎弯曲成“,C,”形。,眼的黑色素大量沉积，照蛋可明显看到黑色的眼睛,鸡胚接种技术 鸡胚的结构,9,鸡胚接种技术,鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：,Day,6,胚体已初具翼和腿的外形，眼睛黑色素更多。,尿囊增长迅速，尿囊血管系统迅速发育，已经覆盖羊膜与部分卵黄。,卵黄囊血管分布在卵黄面积达,2/3,以上。,可见头部和躯干部两个小圆团。,鸡胚接种技术 鸡胚的结构,10,鸡胚接种技术,鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：,Day,7,卵黄体积达到最大程度，胎儿的外形已具备禽类的特点。,头和眼所占的比例相当大，前后肢分化明显。,照蛋时胚胎在羊水中不容易看清楚。,鸡胚接种技术 鸡胚的结构,11,鸡胚接种技术,鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：,Day,811,8,9,10,11,鸡胚接种技术 鸡胚的结构,12,鸡胚接种技术,鸡胚的结构与生理,约,10,日龄鸡胚的结构示意图,鸡胚接种技术 鸡胚的结构,13,鸡胚接种技术,鸡胚的结构与生理,卵壳与壳膜,卵壳位于最外层的石灰质硬壳，上有细孔，进行气体交换。,壳膜位于卵壳的下层，能使气体和液体分子交换。,培养鸡胚时需要控制一定的湿度和气流。,气室,呼吸和调节压力,绒毛尿囊膜,位于壳膜之下，起胚胎呼吸器官的功能，氧气的交换是在绒毛尿囊膜的血管内通过卵壳孔进行。,鸡胚接种技术 鸡胚的结构,14,鸡胚接种技术,鸡胚的孵育和检查,羊膜与羊膜腔,羊膜为胚胎最内层包被；羊膜腔内有羊水，胚胎浸泡于其中。,尿囊腔,位于绒毛尿囊膜与羊膜之间，为胚胎的排泄器官。,卵黄囊,主要营养的存储场所，在胚胎发育早期供给鸡胚营养,卵白,在胚胎发育晚期供给鸡胚营养,鸡胚接种技术 鸡胚的孵育,15,鸡胚接种技术,鸡胚的孵育和检查,受精鸡卵的选择,接种病毒的受精鸡卵应未感染已知病毒或其它微生物，最好来自无特定病原体,(Specified,Pathogen,Free,SPF),鸡群。,受精卵的壳最好是白色的，利于检卵灯观察鸡胚的发育情况。,受精卵必须新鲜，保存在,520,不超过,10,天。,鸡胚接种技术 鸡胚的孵育,16,鸡胚接种技术,鸡胚的孵育和检查,鸡胚的孵育,孵育温度为,3839,孵育湿度为,4070%,翻卵：防止蛋白与壳膜粘连，促进羊膜运动和空气流通。每天,180,转动鸡胚,12,次。,通风：为了排出,CO,2,和吸入,O,2,。,鸡胚接种技术 鸡胚的孵育,17,鸡胚接种技术,鸡胚的孵育和检查,检卵：在胚胎发育的早期，不易辨认。孵育,45,日后即可于检卵灯上检测鸡胚受精与否及发育情况,未受精卵：,只见模糊的卵黄阴影，不见血管和鸡胚痕迹。,活胚胎：,具有清晰的血管和鸡胚暗影，较大的鸡胚还可见到胎动。但孵育,1415,天以后胎动不明显或无胎动。,死胎：血管昏暗模糊，没有胎动。,鸡胚接种技术 鸡胚的孵育,18,鸡胚接种技术,鸡胚的接种途径和方法,鸡胚的接种途径：,羊膜囊接种,绒毛尿嚢膜接种,尿嚢腔接种,卵黄嚢接种,鸡胚接种技术 鸡胚的接种,19,鸡胚接种技术,鸡胚的接种途径和方法,根据病毒种类选择适宜的接种部位：,羊膜囊和尿囊腔同时接种法：流感病毒,绒毛尿囊膜接种法：牛痘、天花、单纯疱疹病毒,卵黄囊接种法：虫媒病毒（如登革热病毒、黄热病病毒）,鸡胚接种技术 鸡胚的接种,20,鸡胚接种技术,鸡胚的接种途径和方法,羊膜囊接种：,主要应用于临床材料中分离流感病毒。,接种到羊膜囊中的病毒可遍及胚胎各种组织和细胞，使具有特定细胞亲嗜性的病毒被充分利用，从而提高病毒繁殖的可能性。,病毒也可被排泄到尿囊腔，使尿囊液中含有大量病毒。,分离病毒时，可同时收获羊水和尿囊液,鸡胚接种技术 鸡胚的接种,21,鸡胚接种技术,鸡胚的接种途径和方法,绒毛尿囊膜接种：,主要用于分离和繁殖在绒毛尿囊膜上产生斑点状和痘疱状的病毒，如牛痘、天花、单纯疱疹和鸟痘病毒。,可在绒毛尿囊膜上滴定这些病毒，通过产生斑和痘的数目来计算感染性病毒颗粒的数目。,还可用于抗体滴定，因为斑和痘数目减少的程度与抗体浓度有关。,鸡胚接种技术 鸡胚的接种,22,鸡胚接种技术,鸡胚的接种途径和方法,尿囊腔接种：,用于流感病毒、流行性腮腺炎病毒和新城疫病毒的适应和传代培养。,这些病毒被接种到尿囊腔后，可在内皮细胞中复制，复制的病毒被释放到尿囊液中，因此，在尿囊液中喊与大量的病毒。,鸡胚接种技术 鸡胚的接种,23,鸡胚接种技术,鸡胚的接种途径和方法,卵黄囊接种：,用于虫媒病毒、衣原体及立克次体等的分离和繁殖，这些大的病原体能在卵黄囊的内皮细胞中快速生长。,鸡胚接种技术 鸡胚的接种,24,