血栓与止血检验的质量控制温临检

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,血栓与止血检验的质量控制,温州医学院附属第一医院,王明山,一、检测系统的要求,二、室内质量控制的方法及要求,三、血凝仪之间的比对试验,四、参考范围的确定,五、标本采集说明,六、凝血结果复查规则,七、凝血常见异常结果分析,一、检测系统的要求,血凝仪的试剂、校准品、消耗品配套使用：,使用非配套分析系统的实验室应按照NCCLS-EP9的要求与配套分析系统的结果进行比对，以验证分析系统的有效性。,仪器使用前的评价：,验证其性能是否能达到制造商的性能要求（制造商规定的性能要求必须满足临床需要）。如：精密度、准确度、携带污染、可报告范围等。,批内精密度：,实验方案：,取正常、异常新鲜血浆或质控，,连续重复测定20次，计算CV，SD。,要求：,CV 在1/4CLIA88 范围内。,批间精密度：,实验方案：,连续20天测定同一批号室内质控正常、,异常两个水平，分别计算CV、SD。,要求：,CV 在1/3CLIA88范围内。,携带污染率,高值样本对低值样本的污染,实验方案：,取新鲜样本或定值质控，将低值样本置样本架1和3位置，高值样本置于2位置，每个样本分别测定3次，记录结果：N1、N2、N3、A1、A2、A3、N4、N5、N6。,计算：,k1=N4-Mean（N1，N2，N3）/Mean（N1，N2，3）100%,要求：,k1在1/4CLIA88的范围内。,低值样本对高值样本的污染,将1、3位置放高值，2位置放低值，方法和要求同上,准确度：,实验方案：,根据本室参加的最近一年卫生部临床检验中心室间质评回报结果，以本室上报测定值(X轴)和本次质评回报的靶值(Y轴)求回归曲线，用医学决定水平代入回归曲线求得相应的预测值，计算医学决定水平和预测值的相对偏差来验证准确度。,医学决定水平：,INR:3.6,APTT:40s,FIB1.5g/L,要求:,在 1/2CLIA88的范围内。,质控品的选择：,制定程序和方法，以评价质,控品的质量和适用性。,二、室内质量控制的方法及要求,质控品的浓度水平：,应至少使用2个浓度水平,（含正常和异常水平）,质控项目：,所有检测项目均应开展,质控频度：,检测当天至少1次,室内质量控制,质控品均值的确定：,20个测定值，至少10天获得,（每天上下午各测一次，与上批号交叉）,试剂更换新批号或仪器进行重要调整时，,应重新确定均值。,标准差：,采用前一个月或前3个月的平均标准差,制造商提供的数据仅供参考,室内质量控制,失控的判断规则：,至少使用13s规则，多种质控,规则的使用可提高误差捡出概率。,失控报告：,描述失控的情况、核查方法、原因分,析、纠正措施及纠正效果的评价,质控数据的管理：,原则上每月统计1次，,至少应保存2年。,三、血凝仪之间的比对试验,条件：,同一个系统（仪器、试剂）,凝血实验不同系统为什么不能比对？,不同仪器的检测原理不同,凝血反应为瀑布式，对不同试剂敏感性不一,无调节系数（凝血反应没规律性）,解决方法：建立各自的参考区间、验证等。,血凝仪,之,之间的,比,比对试,验,验,实验方,案,案：,准备10份新,鲜,鲜血浆,样,样本，,浓,浓度覆,盖,盖生物,参,参考区,间,间，整,个,个实验,应,应在2h内完,成,成。在,基,基准仪,器,器和比,对,对仪器,上,上检测,这,这10,份,份样本,，,，计算,比,比对仪,器,器和基,准,准仪器,之,之间的,结,结果偏,差,差百分,比,比。,要求：,以CLIA88允,许,许范围,的,的1/2作为,合,合格,（以相,对,对稳定,的,的仪器,作,作为基,准,准机）,（PT,、,、APTT:15%,，,，FIB:20%),四、参,考,考范围,的,的确定,参考范,围,围不是,操,操作规,程,程或教,科,科书上,订,订出的,简,简单的,固,固定的,范,范围，,而,而是随,着,着仪器,、,、试剂,、,、年龄,、,、性别,以,以及环,境,境等因,素,素而变,化,化的,制定建,立,立参考,范,范围的,程,程序，,以,以确定,不,不同检,测,测系统,的,的参考,范,范围,如：PT的INR参,考,考范围,为,为0.851.15,其秒数,的,的范围,，,，不同,批,批号试,剂,剂应根,据,据以下,公,公式计,算,算：,INR=,实验秒,数,数,对照秒,数,数,ISI,正常对,照,照,采集20份以,上,上，年,龄,龄在1855岁，,男,男女各,半,半，,剔除服,药,药者、,肝,肝肾功,能,能异常,及,及脂浊,溶,溶血标,本,本，,平静状,态,态下采,血,血。,检测各,管,管，结,果,果取均,值,值作为,正,正常对,照,照值,试剂更,换,换批号,，,，正常,对,对照均,应,应重新,获,获取,厂家提,供,供的参,考,考值或,参,参考范,围,围,不能作,为,为正常,对,对照,参考范,围,围的验,证,证：,试验方,案,案：,测定40份（,男,男女各,半,半）健,康,康,人员新,鲜,鲜血样,本,本。,要求：,判断检,测,测结果,是,是否落,在,在本室,设,设定,的参考,区,区间内,（,（95,以上,）,）。,确认病,人,人的身,份,份及容,器,器（硅,化,化或塑,料,料）。,多次反,复,复采血,的,的病人,在,在同一,条,条件下,采,采血。,止血,带,带不,要,要超,过,过5,分,分钟,，,，强,调,调采,血,血顺,利,利。,迅速,将,将血,液,液和,抗,抗凝,剂,剂轻,轻,轻的,颠,颠倒,混,混匀,。,。,五、,标,标本,采,采集,说,说明,各管,采,采血,顺,顺序,血培,养,养,凝,凝血,管,管,血,血清,管,管,肝,肝素,抗,抗凝,管,管,血,血常,规,规管,血糖,管,管,美国BD,公,公司,推,推荐,多,多管,采,采集,顺,顺序,凝血,管,管总,是,是放,第,第二,，,，当,只,只有,一,一只,凝,凝血,管,管时,建,建议,先,先采,集,集一,只,只空,管,管丢,掉,掉再,采,采集,凝,凝血,管,管。,因为,，,，当,针,针头,进,进入,血,血管,前,前要,经,经过,组,组织,，,，此,时,时组,织,织液,易,易进,入,入针,管,管。,血,血液,混,混入,组,组织,液,液后,即,即刻,启,启动,外,外源,凝,凝血,途,途径,。,。,真空,管,管“,死,死腔,”,”所,致,致APTT偏,差,差探,讨,讨,死腔,：,：是,指,指标,本,本采,集,集后,管,管内,尚,尚留,有,有的,空,空间,血小,板,板激,活,活途,径,径：,与,与异,物,物表,面,面接,触,触或,死,死腔,中,中气,体,体,尽管,管,管壁,被,被硅,化,化，,仍,仍有,激,激活,血,血小,板,板的,可,可能,血小,板,板激,活,活后,释,释放,：,：血,小,小板,第,第四,因,因子,（,（PF4),PF4功,能,能：,中,中和,肝,肝素,使监,测,测肝,素,素指,标,标的APTT,缩,缩短,死腔,在,在实,际,际工,作,作中,存,存在,的,的常,见,见问,题,题：,抗凝,比,比例,标本,的,的贮,存,存,全血,需,需在,实,实验,室,室规,定,定的,时,时间,内,内离,心,心并,分,分离,血,血浆,；,；,若标,本,本不,能,能在4小,时,时内,检,检测,，,，需,分,分离,出,出血,浆,浆并,转,转移,至,至洁,净,净干,燥,燥的,符,符合,要,要求,的,的试,管,管中,加,加盖,保,保存,于,于2,8,。,。,当天,不,不能,检,检测,的,的样,本,本需,在,在-20,条,件,件下,保,保存,，,，两,周,周内,完,完成,检,检测,；,；,-70,条,条件,下,下的,保,保存,期,期限,可,可达6个,月,月。,抗凝,剂,剂,枸橼,酸,酸钠,，,，0.109mol/L,抗凝,剂,剂与,血,血液,比,比例严格,按,按1,：,：9,当Hct,增,增高55%,或,或120,”,”,APTT180”,TT17.1,”,”/17.0,”,”,FIB3.12g/L,PLT204x10,9,/L,分析,：,：,肝素,？,？,标本,稀,稀释,？,？,采集,原,原因,？,？,II,、,、VII,、,、IX、X,处理,：,：,联系,临,临床,询,询问,病,病史,检测,凝,凝血,因,因子,活,活性,常见,于,于误,食,食老,鼠,鼠药,七、,凝,凝血,常,常见,异,异常,结,结果,分,分析,依赖,维,维生,素,素K,凝,凝血,因,因子,包括,FII、VII、IX,、,、X,，,其共,同,同特,点,点-,氨,氨基,末,末端,含,含有,数,数量,不,不等,的,的,-,羧,羧基,谷,谷氨,酸,酸,在肝,合,合成,必,必须,依赖VK,，否,则,则无,凝,凝血,活,活性,VK,缺,缺乏,可,可导,致,致新,生,生儿,出,出血,或,或获,得,得性,成,成人,出,出血,性,性疾,病,病,具有,结,结合Ca,+,的能,力,力，,并,并借,助,助于Ca,+,与磷,脂,脂膜,结,结合,，,，Ca,+,起“,搭桥,”作,用,用。,-,羧,羧基,谷,谷氨,酸,酸,Ca,+,磷脂,膜,膜,II,、,、VII,IX,、,、X,VK,凝血,常,常见,异,异常,结,结果,分,分析,结果2,PT16.9”/12.5”,APTT180”,TT180,”,”,FIB2.17g/L,分析,：,：,标本,被,被肝,素,素污,染,染,静脉,留,留置,管,管,血透,时,时所,采,采集,处理,：,：,联系,临,临床,确认,标,标本,的,的正,确,确采,集,集,建议,重,重新,采,采血,复,复查,肝素,的,的抗,凝,凝原,理,理：,肝素+AT（,构,构型,改,改变,暴,暴露,活,活性,中,中心,）,）精氨,酸,酸,+IIa,、,、Xa、XIIa,、,、XIa,、,、IXa,(丝,氨,氨酸,蛋,蛋白,酶,酶),（1,：,：1,形,形成,复,复合,物,物）,从而,使,使这,些,些酶,失,失去,活,活性,VIIa,不,不,被,被AT抑,制,制,PT,为,为外,源,源凝,血,血系,统,统的,筛,筛选,试,试验,，,，其,启,启动,因,因子,VIIa,APTT,为内,源,源凝,血,血系,统,统的,筛,筛选,试,试验,，,，其,启,启动,因,因子,XIIa,TT,所,所用,的,的试,剂,剂成,份,份是IIa,凝血,常,常见,异,异常,结,结果,分,分析,结果3,PT11.2”/12.5”,APTT20.3,”,”/36.0”,TT19.0”/17.0”,FIB2.33g/L,分析,：,：,采血,不,不顺,利,利,部分,凝,凝固,抗凝,剂,剂不,足,足,处理,：,：,检查,标,标本,（抗,凝,凝比,例,例、,凝,凝块,）,）,重新,采,采血,常见,于,于：,肾,肾病,、,、产,科,科、,多,多发,伤,伤,因子X的,激,激活,：,：,FXFXa,VFVa,FIXa-VIIIa-Ca,+,-PF,3,TF-VIIa-Ca,+,Ca,+,+PF,3,此复,合,合物,有,有,FVa参,与,与,活性,增,增加30,万,万倍,凝血,酶,酶的,生,生成,因子V的,激,激活,：,：,Ca,+,+PF,3,+FXa+FVa,IIaII,凝血,常,常见,异,异常,结,结果,分,分析,结果4,PT13.4”/12.5”,APTT57.2,”,”/36.0,”,”,TT16.8”/17.0”,FIB3.32g/L,FVIII46%,FIX52%,FXI48%,FXII39%,分析:,抗磷,脂,脂抗,体,体综,合,合征,抗磷,脂,脂抗,体,体干,扰,扰凝,血,血因,子,子测,定,定，,而,而不,是,是凝,血,血因,子,子活,性,性真,的,的降,低,低。,LAC1.73,以上,凝,凝血,因,因子,检,检测,是,是在APTT,基,基础,上,上进,行,行,表面,接,接触,FXII,FXIIa,FXI,FXIa,HMWK,FIX,FIXa,FVIIIa,Ca,+,PF,3,Ca,+,FXa,FVa,Ca,+,PF,3,FX,FII,FIIa,