中药栀子中环烯醚萜苷类有效成分的综合色谱分析课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,色谱实验综合分析报告,中药栀子中环烯醚萜苷类有效成分的色谱综合解析,熔点：163164,溶解性：易溶于水，溶于乙醇，不溶于石油醚。,性状：环烯醚萜苷类化合物，对-萘酚、羟肟酸、三氯化铁呈正反响。白色结晶。,药理作用：栀子苷具有缓泻、镇痛、利胆、抗炎、治疗软组织损伤以及抑制胃液分泌和降低胰淀粉酶等作用。,色泽：白色、类白色或浅黄色。,口感与气味：无味,栀子苷简介,实验1 有效成分的提取及别离纯化,实验1 有效成分的提取及别离纯化,实验结果说明,大孔树脂吸附法具有吸附范围广，吸附容量大，洗脱容易，反复使用等特点，对栀子苷吸附能力较高，其纯化产物栀子苷含量高。方法简单、可靠。,1.,薄层板的铺制,：硅胶,-CMC,板的铺制,2.,溶液的配制,：,实验,2,有效成分的薄层色谱法鉴别,供试品：,要求：以,50%,甲醇为溶剂，配制为相当于原药材,0.2g/mL,的浓度。,方法,：,(1),量取粗提液,2.4mL,(100g,药材浓缩为,120mL,溶液,),于,10mL,容量瓶定容。,(2),称取有效部位粉末,0.1056g,(,有效部位,5.3014g),于,10mL,容量瓶定容。,对照品：,要求：以乙醇为溶剂，配制成约,4mg/mL,的浓度。,以羧甲基纤维素,Na,为黏合剂,3.,薄层色谱法鉴别,：,实验,2,有效成分的薄层色谱法鉴别,1.,色谱条件,：,实验,3 HPLC,测定栀子药材及提取,物中栀子苷含量,项目,条件,色谱柱,ODS,(150mm4.6mm,，,5m),流动相,乙腈,-1%,醋酸水溶液,(15:58,，,V/V),流动相流速,1mL/min,检测波长,238nm,柱温,室温,进样量,20L,实验,3 HPLC,测定栀子药材及提取,物中栀子苷含量,2.,实验步骤,实验,3 HPLC,测定栀子药材及提取,物中栀子苷含量,(1),溶液配制：,实验,3 HPLC,测定栀子药材及提取,物中栀子苷含量,供试品：,要求：以流动相为溶剂，配制为相当于原药材,2mg/mL,的浓度。,方法：,(1),量取粗提液,0.24mL,(100g,药材浓缩为,120mL,溶液,),于,10mL,容量瓶定容，取,1mL,于,10mL,容量瓶定容。,(2),称取有效部位粉,0.1069g,(,有效部位,5.3014g),于,100mL,容量瓶定容，取,1mL,于,10mL,容量瓶定容。,对照品：,要求：以流动相为溶剂，精密配制成约,10g/mL,、,20g/mL,、,40g/mL,、,60g/mL,、,80g/mL,的浓度。,(2),线性关系考察,实验,3 HPLC,测定栀子药材及提取,物中栀子苷含量,3.,结果,栀子药材中栀子苷含量为,39.086mg/g,，,栀子有效部位中栀子苷含量为,591.733mg/g,。,栀子苷得率,为,80.396%,。,实验,3 HPLC,测定栀子药材及提取,物中栀子苷含量,实验,4 GC,检查环烯醚萜类有效部位,中的残留溶剂,1.,色谱条件,：,实验,4 GC,检查环烯醚萜类有效部位,中的残留溶剂,项目,条件,色谱柱,SPB-1(30m0.25mm0.25m),毛细管柱,载气,高纯氮,(,柱前压,7Pa,，分流比,30,：,1),进样量,0.5L,柱温,进样口温度：,230,；,程序升温,(,初始为,50,，恒温,3min,，变为,40,升温至,230,后，恒温,5min),检测器,FID,检测,氢焰离子化检测器,选择性检测器,质量型检测器,2.,实验步骤,实验,4 GC,检查环烯醚萜类有效部位,中的残留溶剂,(1),溶液配制,：,实验,4 GC,检查环烯醚萜类有效部位,中的残留溶剂,内标法：,由于进样量很小,(0.5L),，导致相对误差会很大。所以以内标物为基准以比值的方式进行数据处理，可以提高准确度。,方法：量取无水乙醇,0.633mL,、正丁醇,0.618mL,，以,10mL,容量瓶按照,1,：,10,的比例稀释,2,次，再以,10mL,容量瓶定容。,方法：量取0.618mL正丁醇于10mL容量瓶定容，再以10mL容量瓶，以1：10的比例稀释1次，取1mL于10mL容量瓶，称取0.9846g有效部位粉末参加同一容量瓶，参加适量溶剂(不超过刻度线)，振荡使固体溶解后，定容。,(2),样品鉴定：,按照上述色谱条件进行检测，得到供试品溶液和对照品溶液的气相色谱图。,实验,4 GC,检查环烯醚萜类有效部位,中的残留溶剂,3.,结果计算,实验,4 GC,检查环烯醚萜类有效部位,中的残留溶剂,思考与讨论,哪些因素有可能影响到栀子苷的得率？,思考与讨论,谢谢聆听，,恳请指正！,以,10mL,容量瓶配制，即理论上需量取,2.4mL,粗提液。,以,10mL,容量瓶配制，即理论上需称取,0.1062g,有效部位粉末。,以,10mL,容量瓶配制，即理论上需量取,0.024mL,粗提液。,思路：量取,0.24mL(1mL,的移液吸管,),，以,1,：,10,的比例稀释一次,以,10mL,容量瓶配制，即理论上需量取,1.062mg,有效部位粉末。,思路：称取,0.1062g,，以,1,：,100,的比例稀释一次,