五日生化需氧量的测定稀释接种法

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,五日生化需氧量的测定,一、目的和要求,了解BOD5测定的意义及稀释与接种法测BOD5的根本原理。,把握本方法操作技能，如稀释水的制备、稀释倍数选择、稀释水的校核和溶解氧的测定等。,二、原理,生化需氧量是指在好氧条件下，微生物分解存在水中的有机物质的生物化学过程中所需的溶解氧量。,依据参与反响的物质和最终生成的物质，可用以下的反响式来概括生物化学反响过程：,酶,6C6H12O6+16O2+4NH3 4C5H7O2N+16CO2+28H2O,微生物,有机污染物 CO2+H2O+NH3,O2,微生物分解有机物是一个缓慢的过程，要把可分解的有机物全局部解掉常需要20d以上的时间，微生物的活动与温度有关，所以测定生化需氧量时，常以20作为测定的标准温度。一般来说，在第5天消耗的氧量大约是总需氧量的70%，为便于测定，目前国内外普遍承受20培育5d所需溶解氧含量作为指标，单位以的mg/L表示，简称BOD5。,水体发生生物化学过程必需具备：,水体中存在能降解有机物的好氧微生物。对易降解的有机物，如碳水化合物、脂肪酸、油脂等，一般微生物均能将其降解，如硝基或硫酸取代芳烃等，则必需进展生物菌种驯化。,有足够的溶解氧。为此，试验用的稀释水要充分曝气以到达氧的饱和或接近饱和。稀释还可以降低水中有机污染物的浓度，使整个分解过程在有足够的溶解氧的条件下进展。,有微生物生长所需的养分物质。本试验参加了肯定量的无机养分物物质，如磷盐酸、钙盐、镁盐和铁盐等。,稀释法测定BOD5是将水样经过适当稀释后，使其中含有足够的溶解氧供微生物5d生化需氧的要求，将此水样分成两份。一份测定培育前的溶解氧；另一份放入20恒温箱内培育5d后测定溶解氧，两者的差值即为BOD5。,水中有机污染物的含量越高，水中溶解氧消耗愈多，BOD5值也愈高，水质愈差。BOD5是一种量度水中可被生物降解局部有机物包括某些无机物的综合指标，常用来评价水体有机物的污染程度，并已成为污水处理过程中的一项根本指标。,三、仪器与试剂,恒温培育箱20+1。,20L细口玻璃瓶。,10002023mL量筒。,特制搅拌棒，在玻璃下端安装一个2mm厚，大小和量筒相匹配的有孔橡皮片。,250300mL碘量瓶，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。,虹吸管，供分取水样和添加稀释水用。,氯化钙溶液。称取27.5g无水氯化钙，溶于水中，稀释至1000mL。,三氯化铁溶液。称取0.25g三氯化铁FeCl36H2O，溶于水中，稀释至1000mL。,硫酸镁溶液。称取22.5g硫酸镁MgSO47H2O,溶于水中，稀释至1000mL。,磷酸盐溶液。称取8.5g磷酸二氢钾KH2PO4、21.75g磷酸氢二钾K2HPO4、33.4g磷酸氢二钠,NaHPO47H2O和1.7g氯化氨NH4Cl，溶于约500mL水中，稀释至1000mL并混合均匀，此缓冲溶液的pH应为7.2。,葡萄糖-谷氨酸溶液。分别称取150mg葡萄糖和谷氨酸均于130烘过1h，溶于水中，稀释至1000mL。,盐酸溶液，0.5mol/L。,氢氧化钠溶液，0.5mol/L。,稀释水。在20L玻璃瓶内参加18L水，掌握水温在20左右，用抽气或无油压缩机通入清洁空气28h，使水中溶解氧饱和或接近饱和20时溶解氧大于8mg/L。使用前，每升水中参加氯化钙溶液、三氯化铁溶液、硫酸镁溶液和磷酸盐溶液各1mL，混合均匀。稀释水pH值应为7.2，其BOD5值应小于0.2mg/L。,接种稀释水。取适量生活污水于20放置2436h，上层清液即为接种液，每升稀释水中参加13mL 接种液即为接种稀释水。接种稀释水pH值应为7.2，其BOD5值以在0.31.0mg/L之间为宜，接种稀释水配制后应马上使用。对某些特殊工业废水最好参加特地培育驯化过的菌种。,其他溶液。与碘量法测定溶解氧试验一样的硫酸锰溶液、碱性碘化钾溶液、1+5硫酸、0.025mol硫代硫酸钠标准溶液和1%的淀粉溶液详见试验四“水中溶解氧的测定”。,四、,操作步骤,1、水样的采集、存储和预处理,采集水样于适当大小的玻璃瓶中依据水质状况而定，用玻璃塞塞紧，且不留气泡。采样后，需在2h内测定；否则，应在4或4以下保存，且应在采集后10h内测定。,用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调整pH值接近7。,游离氯大于0.10mg/L的水样，加亚硫酸钠或硫代硫酸钠除去。,确定稀释倍数。,2、水样的稀释,依据确定的稀释倍数，用虹吸法把肯定量的污水引入1000mL量筒中，再沿壁渐渐参加所需稀释水接种稀释水，用特制搅拌棒在水面以下渐渐搅匀不应产生气泡，然后沿瓶壁渐渐倾入两个预先编号、体积一样的(250mL)的碘量瓶中，直到布满后溢出少许为止。盖严并水封，留意瓶内不有气泡。,用同样方法配置另两份稀释比水样。,3、比照样的配置,另取两个有编号的碘量瓶参加稀释水或接种稀释水作为空白。,4、培育,将各稀释比的水样，稀释水或接种稀释水空白各取一瓶放入20+1的培育箱内培育5d，培育过程中需每天添加封口水。,5、溶解氧的测定,参考“水中溶解氧的测定”。,用碘量法测定未经培育的各份稀释比的水样和空白水样中的剩余溶解氧。,用同样方法测定经培育5d后，各份稀释水样和溶解水样中的剩余溶解氧。,五、数据处理,依据公式计算BOD5，并以表格形式表示测定数据和结果。,BOD5以O2计mg/L=(D1-D2)-(B1-B2),式中：,D1稀释水样培育前的溶解氧量，mg/L；,D2稀释水样培育5d后剩余溶解氧量，mg/L；,B1稀释水或接种稀释水培育前的溶解氧量，mg/L；,B2稀释水或接种稀释水经培育5d后剩余溶解氧量，mg/L；,f 1稀释水或接种稀释水在培育溶液中所占的比例；,f 2水样在培育液中所占的比例。,六、留意事项,稀释比可参考下表来确定。,预期BOD5值，mg/L,稀释比,适用的水样,26,12之间,R,412,2,R，E,1030,5,R，E,2060,10,E,40120,20,S,100300,50,S，C,200600,100,S，C,4001200,200,I，C,10003000,500,I,20006000,1000,I,表中：R代表河水；E代表生物净化过的污水；S代表澄清过的污水或轻度污染的工业废水；C代表原污水；I代表严峻污染的工业废水。,性质不了解的水样，稀释倍数从COD值估算，取大于酸性高锰酸盐指数值的1/4，小于CODcr值的1/5。,恰当的稀释比应使培育后剩余溶解氧至少有1mg/L和消耗的溶解氧至少2mg/L。,为除去水样中游离氯而参加亚硫酸钠的量可用试验方法得到。取100.0mL待测水样于碘量瓶中，参加1mL 1%硫酸溶液，1mL 10%碘化钾溶液，摇匀，以淀粉为指示剂，用标准硫代硫酸钠或亚硫酸钠溶液滴定，计算100mL水样所需硫代硫酸钠的量，推算所用水样应参加的量。,本操作最好在20左右室温下进展，试验用稀释水和水样应保持在20左右。,所用试剂和稀释水如觉察浑浊有细菌生长时，应弃去重新配制，或用葡萄糖谷氨酸标准溶液校核。当测定2%稀释度的葡萄糖谷氨酸标准溶液时，假设BOD5超过20037mg/L范围，则说明试剂或稀释水有问题或操作技术有问题。,测定一般水样的BOD5时，硝化作用很不明显或根本不发生，但对于生物处理池出水，则含有大量的硝化细菌。因此，在测定BOD5时也包括了局部含氮化合物的需氧量。对于这种水样，假设只需测定有机物的需氧量，应参加硝化抑制剂，如丙稀基硫脲ATU，C4H8N2S等。,