2012年11月6日线性范围100mM新PBSpH=459

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,Colorimetric detection of cys using gold nanoparitlces aggregation,组会报告,2023年11月9日 李世滋,1,手性相关文献,2,近期,GNPs,检测,cys,的工作进展,具有磁核的纳米粒子在其外表同时有手性配体同时具有磁性和手性识别的力气，以此，建立一种通用的手性磁性材料。,纤维素-2,3-二3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯CBDMPC，作为HPLC最有效的手性固定相，选择性固定在包硅磁球外表，形成手性磁微球Fe3O4SiO2CBDMPC(CMM)。之后，成功将CBDMPC固定在包硅微球的外表，用IR和CD谱表征。,最终，将磁性纳米材料直接手性分别领域中。分别结果证明CMM对不同消旋物聚有手性识别力气，证明白它作为手性分别的一种有潜力的材料的可行性。此外，外加磁场使得CMM的回收特殊便利。,优势,三步合成过程：,首先，纤维素之后参与过量的三苯甲基氯，使仅与6位的初级羟基反响形成三苯甲基醚。24h后，参与过量的3,5-二甲基苯异氰酸，形成在2-和3-位有羟基的氨基甲酸酯。该反响在100连续反响24h。,中间物，纤维素-2,3-二3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯-6-O-三苯甲基由于在甲醇中不溶解而游离出来，在含有少量的盐酸的过量甲醇中再分散室温24h，除去三苯甲基氯，得到终产物CBDMPC。,在无水吡啶中溶胀,100,，,5h,，活化羟基。,70nm,1,，,6-,己二异氰酸,为间隔臂：连接羟基和异氰酸氨基甲酰基,CBDMPC,将磁球在含有60mL苯的烧瓶中超声分散。,为了在磁球外表固化CBDMPC，将合成的CBDMPC溶解于20mL无水吡啶中，之后机械搅拌90参与上述MNPs分散液。搅拌1h后，参与100L的1,6-己二异氰酸酯，反响在90进展12h。得到的溶液室温条件下冷却，通过磁性倾析手性手性磁性纳米粒子，用甲醇洗涤三次。最终产物70真空枯燥12h。,消旋样品制备：在25mL乙醇中分别，溶解5种不同的消旋物。之后再以上5种消旋溶液中分别参与150mgMNPs。室温涡旋震荡5min，加磁场60s内得到上清液，用自动数字旋光计分析，其他消旋样品同上。,为了争论分别过程，择5种消旋的安眠香甲酯的一种，分别结果用HPLC分析。简洁说，通过在乙醇中稀释得到浓度为10g/ml的消旋样品。用HPLC分析，在试管中参与1mL的消旋样品10g/ml，随后参与100mg合成的手性磁性微球。混合液在室温条件下涡旋震荡5min。之后在磁场的帮助下，溶液与CMM在60s内得到分别，收集上清液进展HPLC分析。之后剩余溶液与CMM保持多余15min，上清液用HPLC分析。,回收：,用CMM分别5种消旋物后总用量为750mg，收集全部的CMM在磁场帮助下乙醇洗涤以除去吸附的消旋物。洗脱清液也用HPLC在一样条件下分析。觉察洗脱CMM 5次后，消旋物完全释放。得到的回收CMM在70真空枯燥12h，得到738 mg CMM。,表征：,热重分析评估了,Fe3O4SiO2CBDMP,微球的有机层含量。,如,fig4,，与,Fe3O4SiO2,相比,Fe3O4SiO2CBDMPC,微球在,230,有明显失重。可以推出,Fe3O4SiO2CBDMPC,微球在,230,和,500,表现高有机质量释放大约,40%,。有机物在,500,完全分解。,磁球磁性用振动样品磁强计VSM争论。,结果fig5，磁饱和值Ms的下降是由于TGA中高有机物含量造成的。即，厚的非磁性有机CBDMPC层包覆在硅球外表，导致磁化强度降低。尽管Fe3O 4SiO2CBDMPC的Ms降低，但是在外加磁场下仍有强的磁响应，在60s内能完全分别。,直接分别5种不同的消旋物争论CMM的手性识别力气，分别结果用自动数字旋光计分析。图table1.五种消旋物没有任何光学旋转，由于+-异构体产生等量相反光学旋光，导致消旋物的消退效应。当与CMM作用5min后，全部的5种消旋物表现正光学旋光。,可能缘由是：纤维素衍生物具有三重螺旋的构型，由于其高度规律的螺旋构造导致其对消旋物的手性区分，还有氨基酸酯残基被认为是最重要的吸附位点。具有极性基团的消旋物可能主要通过氢键与氨基甲酸酯残基相互作用。消旋物和纤维素衍生物间的-相互作用在手性分别中也有重要作用。依据table1，当CMM在乙醇中用于直接手性分别时，主要通过其螺旋凹槽，氢键或-相互作用。,用NVM-GNPs检测cys的试验：之前的工作状况,检测的,cys,的浓度范围,210 mg/L,这里，UV-vis图中没有给出不加cys的吸取谱,近来工作进展：,由于NVM-GNPs稳定性的问题，假设GNPs稳定性特殊好，在PBS中将对cys检测响应变差；而假设GNPs自身稳定性特殊差，则在PBS中GNPs本身的酒红色就会因发生自团聚而渐渐变成蓝紫色。,这时已经发生团聚了的GNPs不能用于cys的检测,依据上次组会提出的问题，做了cys与GNPs反响随着时间变化的趋势：,检测参与0.4 mg/L cys后1h内A/A对时间的变化状况。,由图可以看出在低浓度的cys检测时，变色反响比较缓慢。,在参与cys之后，GNPs的溶液稍有颜色变化，从UV-vis谱上可以看出有些变宽，因此说明在此条件下，GNPs自身的稳定性照旧不太好。,线性范围：,0.4 10 mg/L,线性范围：,0.4 10 mg/L,20231016,之前合成的NVM-GNPs贮存液稀释备用,有时候NVM-GNPs稳定性特殊好，如下状况：,20231018 线性,使用同一批的GNPs比较稳定，所以想试试把GNPs的浓度略微降低些，看看对于cys的检测，使用的新配置的 50 mM pH=4.30 PBS，在这种状况下由于稀释了纳米粒子的浓度，NVM-GNPs自身的稳定性表现稍差，觉察GNPs自身有团聚现象，反响放置1.5h马上测定UV-vis。平行做了两组试验。,20231019 线性,干扰氨基酸试验：,20231025 干扰氨基酸,由于GNPs自身稳定性问题，有意留意合成条件。,2023年10月31日,水浴和室温条件下在低浓度的,cys,的检测线性都不好，,NVM-GNPs,稳定性较好的，可能需要更改,PBS,的离子强度和,PH,。,2023年11月1日线性范围,2023年11月5日 转变反响体系PBS做线性,由于之前使用的都是3mL 反响体系：2 mL 50 mM pH=4.45 PBS+1 mL NVM-GNPs+30 L各级浓度的cys，室温条件下放置2h后测定UV-vis。但是，由于NVM-GNPs自身稳定性不好，或者是在50mM PBS中过于稳定，因而对于cys的检测效果都不好。,因此，考虑在使用稳定的NVM-GNPs的条件下，转变反响体系PBS的pH和浓度，以得到cys的线性范围。尝试了稳定的NVM-GNPs在100mM PBS中稳定性较好。如以以以下图所示，在室温条件下与试验随行的空白NVM-GNPs在PBS中稳定性很好。,问题是最近做cys检测，在长波特长原来应当消逝其次个吸取峰，现在变成了GNPs的吸取峰整体向长波长方向移动，而在做线性的图的时候，仍选择之前的几处波长的比值。,2023年11月6日 线性范围 100 mM 新PBS pH=4.59,合成的,NVM-GNPs,条件：,16.3 mg NVM+200L NaOH+1mL 1%HAuCl4 75,油浴,2h,。合成后,GNPs,在,4,保存老化一夜，然后离心浓缩保存，在,100mM PBS,中稳定性良好。,可能是反响时间不够2h，GNPs在较低浓度的cys的响应不成线性。,选择线性范围比较好的一段：,范围 0.064 mg/L 相关系数：0.9985,线性范围：,0.06,10 mg/L,相关系数,0.9939,针对实际样品检测问题,线性范围，不太稳定。,工作预备,