资源描述
单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,病毒感染的检查方法与防治原则,1,编辑版ppt,病毒感染的检查方法与防治原则1编辑版ppt,目的与要求,了解病毒的诊断,抗病毒治疗,病毒感染的预防。,2,编辑版ppt,目的与要求2编辑版ppt,第一节,病毒感染的检查方法,3,编辑版ppt,第一节 3编辑版ppt,病毒感染的检查,检测内容,查病毒,查特异性抗体,病毒颗粒,病毒抗原,病毒核酸,病毒酶类:如逆转录酶,电镜直接观察,光镜检查包涵体,分离培养,4,编辑版ppt,病毒感染的检查检测内容查病毒查特异性抗体 病毒颗粒 电镜,一、标本的采集与送检,原则基本与细菌相似,但应注意:,1.,标本用,“,双抗,”,或两性霉素,B,处理,2.,低温保存,尽快送检,3.,血清学诊断采双份血清,5,编辑版ppt,一、标本的采集与送检原则基本与细菌相似,但应注意:5编辑版p,二、病毒的分离与鉴定,(一)病毒的分离培养,细胞培养(,cell,culture,),鸡胚接种(,egg inoculation,),动物接种(,animal inoculation,),6,编辑版ppt,二、病毒的分离与鉴定(一)病毒的分离培养6编辑版ppt,1,.鸡胚培养,采用孵化,914,天的鸡胚,绒毛尿囊膜,痘苗病毒、人类疱疹病毒,尿囊腔,接种部位 流感病毒、腮腺炎病毒,羊膜腔,流感病毒的初次分离,卵黄囊,嗜神经病毒,7,编辑版ppt,1.鸡胚培养 7编辑版ppt,8,编辑版ppt,8编辑版ppt,1,、鸡胚培养,优点:,易管理,不带微生物,成本较低,缺点:,操作程序复杂,9,编辑版ppt,1、鸡胚培养优点:易管理,不带微生物,成本较低9编辑版ppt,10,编辑版ppt,10编辑版ppt,2,.,动物接种,应用:,尚无敏感细胞的病毒培养,动物:,兔、鼠、黑猩猩、猴等,优点:,结果易观察,可建立动物模型,缺点:,有饲养条件要求,费用高,动物,体内常带有潜伏病毒,11,编辑版ppt,2.动物接种11编辑版ppt,病毒的分离培养,3.,细胞培养,单层细胞培养,(,monolayer cell culture,),分类,悬浮细胞培养,(,suspended cell culture,),原代细胞(,primary cell,),细胞种类,二倍体细胞(,diploid cell,),传代细胞系(,continuous cell line,),12,编辑版ppt,病毒的分离培养12编辑版ppt,病毒的细胞培养,细胞培养瓶,单层细胞,13,编辑版ppt,病毒的细胞培养细胞培养瓶单层细胞13编辑版ppt,1,病毒增殖鉴定,(1),细胞病变效应,(,cytopath,ic,effect,CPE,),细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等(多数病毒);,形成多核巨细胞或称融合细胞(麻疹病毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等);,在培养细胞中形成包涵体(狂犬病病毒、麻疹病毒等)。,(二)病毒的鉴定,14,编辑版ppt,1病毒增殖鉴定(二)病毒的鉴定 14编辑版ppt,细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落,15,编辑版ppt,细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落15编辑版ppt,麻疹病毒感染细胞,呼吸道合胞病毒感染细胞,形成多核巨细胞或称融合细胞,(,1,)细胞病变效应(,cytopathic effect,CPE,),16,编辑版ppt,麻疹病毒感染细胞呼吸道合胞病毒感染细胞形成多核巨细胞或称融,形成包涵体,(,inclusion body,),(,1,)细胞病变效应(,cytopathic effect,CPE,),17,编辑版ppt,形成包涵体(inclusion body)(1)细胞病变效,腮腺炎病毒感染细胞,(,2,),红细胞吸附(,hemadsorption,),病毒囊膜表面血凝素,(,HA,),红细胞表面,HA,受体,18,编辑版ppt,腮腺炎病毒感染细胞(2)红细胞吸附(hemadsorptio,(,3,),干扰现象(,interference,),风疹病毒,人胚肾细胞 病毒增殖,,CPE,(),埃可病毒,人胚肾细胞 病毒增殖,,CPE,(),人胚肾细胞,风疹病毒,?,埃可病毒,CPE(-),风疹病毒,(,+),埃可病毒(-),CPE(+),风疹病毒,(-),埃可病毒(+),19,编辑版ppt,(3)干扰现象(interference)风疹病毒人胚肾细,2.病毒数量与感染性测定,1,.,蚀斑形成试验,(,plaque formation test,),2.,50,组织细胞感染量,(,50,tissue culture,infectious dose,TCID,50,),感染性病毒量,20,编辑版ppt,2.病毒数量与感染性测定1.蚀斑形成试验感染性病毒量20编,2,.,病毒形态学鉴定,电子显微镜:设备、操作复杂,应用受限,光学显微镜:可见大病毒(痘类病毒),,对一般病毒检测意义不大,21,编辑版ppt,2.病毒形态学鉴定电子显微镜:设备、操作复杂,应用受限21编,3,.,病毒血清学鉴定,用已知的抗体,鉴定病毒种、型、亚型,(,1,),血凝抑制试验,-,正粘病毒型与亚型鉴定,病毒,鸡红细胞,凝集,(血凝试验),病毒,特异性抗体,鸡红细胞,不凝集,(,血凝抑制试验,),(2),免疫标记法(,FIA,、,EIA,、,RIA,),多种病毒鉴定,22,编辑版ppt,3.病毒血清学鉴定 用已知的抗体,鉴定病毒种、型、亚型(2,三、病毒分子生物学鉴定,抗原变异病毒基因的鉴定,核酸扩增,核酸杂交,基因芯片,基因测序,23,编辑版ppt,三、病毒分子生物学鉴定抗原变异病毒基因的鉴定23编辑版ppt,四、病毒感染的血清学诊断,应用:,采取标本分离病毒为时已晚,目前尚无分离此病毒的方法或难以分离的病毒,为证实所分离的病毒的临床意义,进行血清流行病学调查等,24,编辑版ppt,四、病毒感染的血清学诊断应用:24编辑版ppt,1,.,中和试验(,neutralizing test,),病毒,中和抗体,病毒失去感染性,特点:,特异性高,抗体维持时间长,应用:,人群免疫情况的调查,临床诊断少用,25,编辑版ppt,1.中和试验(neutralizing test)病毒中和,五、病毒感染的快速诊断,数小时内出结果,病毒颗粒,病毒成分(抗原或核酸),早期抗体检测,(,I,gM,),26,编辑版ppt,五、病毒感染的快速诊断数小时内出结果26编辑版ppt,病毒的快速诊断,光镜,-,-,包涵体,电镜,免疫荧光,ELISA,分子生物学技术,杂交,Southern blot,PCR,Northern blot,27,编辑版ppt,病毒的快速诊断光镜-包涵体电镜免疫荧光ELISA分子,第二节 病毒感染的防治原则,28,编辑版ppt,第二节 病毒感染的防治原则28编辑版ppt,灭活疫苗(,inactivated vaccine,),活疫苗(,living vaccine,),重组载体疫苗(,recombinant carrier vaccine,),亚单位疫苗(,subunit vaccine,),化学提取或人工合成疫苗,重组疫苗(,recombinant vaccine,),核酸疫苗(,nucleic acid vaccine,),一、人工主动免疫常用生物制品,29,编辑版ppt,灭活疫苗(inactivated vaccine)一、人工主,二、人工被动免疫常用生物制品,免疫球蛋白,血清丙种球蛋白,细胞免疫制剂,IFN-、,细胞因子 IL-2、IL-6、IL-12,TNF、CSF,淋巴因子激活的杀伤细胞,LAK,细胞,30,编辑版ppt,二、人工被动免疫常用生物制品 免疫球蛋白30编辑版ppt,三、病毒感染的治疗,核苷类药物,非核苷类反转录酶抑制剂,蛋白酶抑制剂,2.,干扰素和干扰素诱生剂,3.,中草药,4.,基因治疗剂,5.,治疗性疫苗,1.,抗病毒化学制剂,反义寡核苷酸,干扰,RNA,核酶(,ribozyme,),31,编辑版ppt,三、病毒感染的治疗,核苷类药物,作用机制,HSV/VZV,无环鸟苷,(,NA),病毒胸苷激酶,NA,一,磷酸,宿主细胞激酶,NA,三磷酸,(缺乏糖环,3-OH,基),病毒DNA聚合酶,核酸链延伸被迫终止,32,编辑版ppt,核苷类药物作用机制 HSV/VZV 无环,
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