糖化血红蛋白检测标准化进程课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,糖化血红蛋白检测标准化进程,会议汇报,棺午啄鸟铰澳破今购瓤屉桅甭射袒遥锭冠醒午落炉柿矗绞湛雾滤锈疼戊鼎糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,糖化血红蛋白检测标准化进程会议汇报棺午啄鸟铰澳破今购瓤屉桅甭,1,会议简介,时间：2011.10.22-25,举办方：上海临床检验中心,会议主题：糖化血红蛋白标准化进程,摸肝躲变鸟引节裤冠抗接毫汝汐挟总破枢窜亿看绪滞荡件刊吏帖腕夷曾月糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,会议简介时间：2011.10.22-25摸肝躲变鸟引节裤冠抗,2,糖化血红蛋白,糖化血红蛋白在糖尿病筛查、诊断、治疗效果评价上，有优越的特性和重要的意义，甚至可以称为金标准。,渔榴求湿炮蹲啊谗园注吵永灭扁防嫡济诛骆苹卤瘩勤甄阳兜害蔗耀炬邀源糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,糖化血红蛋白 糖化血红蛋白在糖尿病筛查、诊断、治疗,3,一、糖化血红蛋白的形成,GHb：顾名思义即糖基化的血红蛋白。是葡萄糖分子和,Hb,A 某些特殊部位分子经缓慢而不可逆的,糖基化,而形成的产物,GHb包括,HbA,1,和HbA,0.,糖基化：非酶促反应将糖基加到蛋白质氨基酸基团上，不可逆的。,血红蛋白有四个亚基，成人内绝大多数为22，这两种亚基都可被糖基化。,页励咒琴烷耶汤慨守许晤惯蒜辗蜗烫继辫背鹤狸垒爸骨娩叹穿趣甄构狭迅糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,一、糖化血红蛋白的形成GHb：顾名思义即糖基化的血红蛋白。是,4,血红蛋白,血红蛋白属色蛋白,由血红素与珠蛋白组成。珠蛋白含四条肽链。成人血中,珠蛋白肽链主要有四种即、和,构成三种血红蛋白。其中主要是HbA(,_2,_2,),HbA,_2,(,_2,_2,),HbF(,_2,_2,)。,乱乾糊居沮魏傣谨结横绝魔买糟畜沤火凄面厨馈衍戊搞摩汽殆埔把汕齿涛糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,血红蛋白 血红蛋白属色蛋白,由血红素与珠蛋白,5,血红蛋白,Hb的蛋白质部分叫珠蛋白，它是由两对肽链组成的四聚体。,每条肽链各结合一个血红素，,故每分子Hb均含有4条肽链和4个血红素。,程追睫临壤幻瞅歼食烽贾防氦庶赤谚宦沤喧抉塞娟食怜庚昔龙费哼准疤镍糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,血红蛋白Hb的蛋白质部分叫珠蛋白，它是由两对肽链组成的四聚体,6,HbA1c的形成过程,葡萄糖与HbA的链-N端的缬氨酸残基发生氨基反应，形成醛亚胺化物（前HbA1c），其性质不稳定。,醛亚胺经脱水，分子重新排列，通过酮氨基和葡萄糖连接，成为氨基酮化合物，其性质稳定，此反应不可逆。,葡萄糖+血红蛋白,前HbA1c,稳定HbA1c,（醛亚胺）（氨基酮）,晾备埃臼眶列浪欧客讽费炉缩努瑞膘诬铝敲绩蚊忆君痕钞永赦恩芋乾酶姓糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,HbA1c的形成过程葡萄糖与HbA的链-N端的缬氨酸残基发,7,Hemoglobin糖化反应,Hemoglobin,chain-NH2+,glucose,快速,慢速,HCO,I,HCOH,I,HOCH,I,HCOH,I,HCOH,I,CH2OH,HCN-chain,I,HCOH,I,HOCH,I,HCOH,I,HCOH,I,CH2OH,CH2NH-chain,I,CO,I,HOCH,I,HCOH,I,HCOH,I,CH2OH,Aldimine,（Schiff碱),(Labile HbA1c),不,稳,定型A1c,Ketoamine,（酮胺化合物）,(Stable HbA1c),稳,定型A1c,醚冲肌意牙道盖帅刃潍扎祭罚碑芝野氯划淬殉触搏酗简昨绦似霸哥偶揍完糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,Hemoglobin糖化反应Hemoglobin chai,8,HbA1的组成,HbA1:,眼烷撞散丢膘社镶渗蔽浙乏乱落铣茄凭渔瓜婶敏芬陕滑丑谜咐拳玲继跳跟糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,HbA1的组成HbA1:眼烷撞散丢膘社镶渗蔽浙乏乱落铣茄凭渔,9,HbA的组成,HbA1：HbA1a，HbA1b，HbA1c。,HbA1a：,1.HbA1a1-,链-N端的缬氨酸残基与1，6二磷酸果糖发生氨基反应生成。,2.,HbA1a2-,链-N端的缬氨酸残基与6磷酸葡萄糖发生氨基反应生成,HbA1b-,链-N端的缬氨酸残基与丙酮酸发生氨基反应生成,HbA1c-,链-N端的缬氨酸残基与葡萄糖发生氨基反应生成,HbA0-糖基化反应发生在,链末端以外位点时，如发生在赖氨酸残基或者,、和链。,谬与从拄酥最源帕贪鼎铰忙梨章兑蛊脊深盅褪猪鞋慨绳钩琼凄连念磕琴坍糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,HbA的组成谬与从拄酥最源帕贪鼎铰忙梨章兑蛊脊深盅褪猪鞋慨,10,Hemoglobin,Hb structure -N%,HbA0 22 -90%,HbA2 22 -2.5%*,HbF 22 -1.0%*,HbA1a1 22 F-1.6-DP 1.0%,HbA1a2 22 G-6-DP 1.0%,HbA1b 22?1.0%,HbA1c 22 Glucose 4-6%*,HbA1d 22?-,劫跑倾看厘秤怕使代迭智演研辑得崖赤想恰酪忻里泅钱冬惠络辐熙楔扛菠糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,HemoglobinHb str,11,HbA1的形成过程总结,葡萄糖分子和血红蛋白A组分的,链-N端的缬氨酸残基,经缓慢而不可逆的非酶促反应所形成的产物称为糖化血红蛋白（HbA1c）。,特点：,HbA1c的多少与葡萄糖的含量高低呈正相关系,间接反映一段时间内血糖浓度的改变,及机体糖代谢的状态.,囊豪姚颅化爪霓廓豪洒踏嫉嚏辉钒吨识艾殆氦缆亥菊入捍概冀固袱涩西之糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,HbA1的形成过程总结葡萄糖分子和血红蛋白A组分的链-N端,12,HbA1c,的特点,HbA1c,的形成是不可逆的，其浓度与红细胞寿命、血红蛋白的结构和该时期内血糖平均浓度有关。,不受每天葡萄糖波动影响，作为实验室指标是优于血糖的。,不受运动与饮食的影响,半衰期为35天,反映过去6-8周平均血糖浓度,评价血糖控制情况的可靠实验室指标,着考杉准匙穆瞎爷滴狐贞好滓鸳辑何垃缠毒洱铬诲硝所锻坠庶反叮绩盔做糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,HbA1c 的特点HbA1c的形成是不可逆的，其浓度与红细胞,13,参考值,HbA1c正常参考值46%,糖尿病患者HbA1c7%时，,说明,血糖水平控制较好,饥者辐钻蓟违靡屁饮责叠焉镇袭砖然粤狸症味茂置府疼路盖隘芯费屠娥讯糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,参考值HbA1c正常参考值46%饥者辐钻蓟违靡屁饮责叠焉镇,14,HbA1C是血糖监测的重要标准,4%6%：正常值,糖尿病人：,6%7%：控制理想。,7%8%：可以接受。,8%9%：控制不好,9%：控制很差，慢性并发症发生发展的危险因素很大。,讼诞措叼羔君碧龟弹绥映鸿奴鞘蝗草煎算白倪绰房蓄哄机贰订轿鼓叁羔旗糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,HbA1C是血糖监测的重要标准 4%6%：正常值 讼诞,15,HbA1C是血糖监测的重要标准,血糖控制目标达标！,IDF 2005:,HbA1c FPS PBS,6.5%,6.0 7.0mmol/L,茹示我现散梢谤肘疡独恭枚看密钟氯掀泰尔骤钝井骂眉厉盗哦圃杆赵碑泉糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,HbA1C是血糖监测的重要标准血糖控制目标达标！茹示我现,16,二 HbA1c的临床意义,1、增高：过去一段时间血糖高于正常范围，测定,HbA1c,可以了解糖尿病人在23个月的血糖控制情况。,2、降低：溶血性及失血性贫血，慢性肾衰，慢性持续性低血糖症等。,频挖蛤朋优囤肆卧筒弗楷又寻鱼扒蹋昂嵌瞅苍竞庐产洋伺旭照躺蒋夕纂彝糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,二 HbA1c的临床意义1、增高：过去一段时间血糖高于正常,17,HbA1c的临床意义,3.作为糖尿病的病情监测指标,HbA1c 9时，说明患者存在着持续性高血糖，可以出现糖尿病肾病、动脉硬化、白内障等并发症。,4.妊娠期糖尿病：对预防糖尿病孕妇的巨大胎儿、畸形胎、死胎，以及急、慢性并发症发生发展的监督具有重要意义。,5、对于病因尚未明确的昏迷或正在输注葡萄糖（测血糖当然增高）抢救者，急查糖化血红蛋白具有鉴别诊断的价值。,6、对于糖化血红蛋白特别增高的糖尿病患者，10 甚至更高的情况，,应警惕如酮症酸中毒等急性合并症的发生。,虱巧斡埋催双舒捏肌避邱程漂御尝朴傈瞒救串整凸淤钨术妄卸禹爆亿尚潍糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,HbA1c的临床意义3.作为糖尿病的病情监测指标虱巧斡埋催双,18,HbA1c的临床意义总结,总结：糖化血红蛋白是不受偶尔一次血糖升高或降低的影响。能反应患者过去2-3个月的糖代谢状况，同时与糖尿病并发症尤其是微血管病变关系密切，在糖尿病学上有重要的临床参考价值。是糖尿病诊断及治疗效果监测评价的金指标。,串题鹤孽郁塑达躯考徊恢捅侈佣菩蒙奋垫缨涧匡出鸥顺碰噶缸延酪琴嘶九糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,HbA1c的临床意义总结总结：糖化血红蛋白是不受偶尔一次血,19,三 HbA1c的检测原理,GHb与非GHb的电荷差异:,离子交换色谱(HPLC),电泳,血红蛋白糖化基团的结构差异：,亲和层析,免疫法,抗料损簿值惺马绅轴溯化港汹铰面惊娩暮谐尼仰俊闻藏隅散倾捶岔栓你训糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,三 HbA1c的检测原理GHb与非GHb的电荷差异:抗料,20,HbA1c的检测方法,HPLC,(1)离子交换层析,(2)硼酸亲和层析,免疫分析,(1)放射免疫法、酶免疫法,(2)乳胶免疫凝集法,电泳法,砚昼幻遍丁心未讶沛落绰拈然羹纳冬脖定辆谎万炎藻灭趾砰公次凡耽叮虹糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,HbA1c的检测方法 HPLC砚昼幻遍丁心未讶沛落绰拈然,21,离子交换高效液相色谱,HPLC原理：,用高效微粒离子交换剂作固定相（层析柱），以具有一定pH值的缓冲溶液（洗脱液）作流动相，依据离子型化合物中各离子组分与离子交换剂上表面带电荷基团进行可逆性离子交换能力的差别而实现分离。,在中性pH条件下,HbA1c携带的正电荷相对,较少,因此可通过HPLC法将其与其它组分(HbA1b,HbA1a,HbF,HbA0)区分开,得到分离。,Sysmex的G7 应用HPLC原理，结果准确可靠。,燕钾查椎满锥涅音心倍悠愈侧臃痘锯签味吏洗痪蓟打址几戈挨疑狭哪溢脖糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,离子交换高效液相色谱HPLC原理：用高效微粒离子交换剂作固定,22,HbA1c的检测方法,免疫法,HbH1c的单克隆抗体与胶乳颗粒交,联，形成致敏颗粒，遇HbH1c发生结合,而进行凝集反应，其浊度与HbH1c量成,正比，通过测定吸光度（透射比浊）,计算,HbA1c,量。,主要应用在大型生化分析仪。,墙扇份脉穷罩迟殉剔狰沧苏箍璃厩接寒祟褂策辖凡臣匠睦蚀协础权否钙虐糖化血红蛋白检测标准化进程糖化血红蛋白检测标准化进程,HbA1c的检测方法免疫法墙扇份脉穷罩迟殉剔狰沧苏箍璃厩接寒,23,HbA1c的检测方法,电 泳,琼脂糖凝胶电泳,等电聚焦电泳,胶体颗粒在一定条件下可以带有电荷，带有,电荷的胶体颗粒可以借静电吸引力在电场中泳行，,带正电荷者泳向负极，带负电荷者泳向正极，此种,现象称为电泳。血清中各种蛋白质都有它特有的等,电点，各种蛋白质在各自的等电点时呈中性状态，,它的分子所带正电荷与所带负电荷量相等。,糖化和非糖化的血红蛋白所带电荷不同,们鉴寓职裙佃啃蛮椎皮同汰贬府匠履韦肃着恍拘戎卓全裙育研撩吮佣蓄衅糖化血红蛋白检