血涂片制备染色及白细胞形态(ZCG)课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,血涂片制备、染色及白细胞形态观察,医学检验系,血涂片制备、染色及白细胞形态观察医学检验系,实验内容,1.,血涂片制备,2.,血涂片染色,3.,正常白细胞形态观察,实验内容,目的,：,掌握血涂片的制备方法、瑞吉氏染色方,法，观察正常白细胞形态。,染色原理,：,根据,不同种类细胞,及细胞的,不同成分,，对,酸性及碱性染料,结合能力不同，,而使各种细胞呈现,各自的特点,。,器材,：,载玻片、推片、染架、吸耳球、显微镜、,微量吸管、拭镜纸。,试剂,：,瑞吉氏染液、磷酸盐缓冲液、香柏油、,乙醇,-,乙醚溶液。,标本,：,抗凝血。,目的：掌握血涂片的制备方法、瑞吉氏染色方,左手持载玻片，右手持推片，将推片置血滴前方，向后移动到接触血滴，使血滴沿推片边缘展开成线状。,1.,血 涂 片 制 备,血液充分抗凝。,微量吸管虹吸取血,7-8,l,，置血滴于载玻片一端。,左手持载玻片，右手持推片，将推片置血滴前方，向后移动到接触血,血 涂 片 制 备,推片,载玻片,血液,将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度。,一张满意的血涂片应厚薄均匀,头 体 尾,涂片干燥后用,铅笔,在血涂片的头,部写上姓名和编号,李四,B,1 2 3,血 涂 片 制 备推片载玻片血液将推片匀速向前，勿停顿。涂片,2.,血 涂 片 染 色,再加,瑞氏染色,液,5-8,滴，,液和,液充分混匀静置,5,分钟,直接在,无血膜处,流水冲洗,3-5,分钟,血涂片干燥后用油镜分类计数,200,个白细胞,李四,123,涂片干燥后加瑞氏染色,液,5-8,滴覆盖整个血膜,1,分钟,2.血 涂 片 染 色再加瑞氏染色液5-8滴，液和,3.,血涂片的观察,低倍镜观察,1.,染色情况,(,满意、偏酸、偏碱）,2.,细胞分布情况,油镜下分类计数：体尾交界处。,油镜分类时应按一定走向，不要重复计数。,李四,123,3.血涂片的观察低倍镜观察李四123,中性杆状核粒细胞,中性分叶核粒细胞,单核细胞,嗜酸性粒细胞,嗜碱性粒细胞,淋巴细胞,中性杆状核粒细胞中性分叶核粒细胞单核细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒,中性杆状核粒细胞,正 常 细 胞 形 态,胞体：,圆形，直径,10-15m,。,胞浆：,胞质量丰富，充满浅红色中性颗粒。,胞核：,核形不一，呈,S,形、,U,形等，核色质粗糙成块。,中性杆状核粒细胞正 常 细 胞 形 态胞体：圆形，直径,中性分叶核粒细胞,细胞核被染成紫色分叶状，可分,3-5,叶。,中性分叶核粒细胞细胞核被染成紫色分叶状，可分3-5叶。,嗜酸性粒细胞,略大于嗜中性粒细胞，细胞核染成紫色，通常为,2,叶，胞质充满嗜酸性大圆颗粒，被染成桔红色。,嗜酸性粒细胞略大于嗜中性粒细胞，细胞核染成紫色，通常为2,嗜碱性粒细胞,体积略小于嗜酸性粒细胞，细胞中有大小不等被染成紫色的颗粒，颗粒数目较嗜酸性粒细胞的颗粒少，核,1-2,叶，染成淡蓝色。,嗜碱性粒细胞体积略小于嗜酸性粒细胞，细胞中有大,单核细胞,体积最大，细胞圆形。胞浆中有灰蓝色粉尘样颗粒。核呈肾形或马蹄形，染色略浅于淋巴细胞的核。,单核细胞体积最大，细胞圆形。胞浆中有灰蓝色粉尘样颗粒。核,淋巴细胞,小淋巴细胞：,与红细胞大小相似，圆形，核致密，染成,深紫色。周围细胞质嗜碱性，染成淡蓝。,大淋巴细胞：,较大，核圆形。直径,11-15,m,。,淋巴细胞小淋巴细胞：与红细胞大小相似，圆形，核致密，染成,红细胞,淡红色，无核的圆形细胞，因红细胞为双凹形，故边缘部分染色较深，中心较浅，直径,6-9,m,。,红细胞淡红色，无核的圆形细胞，因红细胞为双凹形，故边缘部分染,血小板,形状不规则，一般呈圆形，比红细胞和白细胞小得多，无细胞核，有质膜。,血小板在长期内被看作是血液中无功能的细胞碎片。,血小板形状不规则，一般呈圆形，比红细胞和白细胞小得多，无细胞,血涂片制备染色及白细胞形态(ZCG)课件,血涂片制备染色及白细胞形态(ZCG)课件,1.,玻片清洗：新玻片,常有游离碱质,因此应用,清洗液或10%盐酸浸泡24h,然后再彻底清洗。,用过的玻片,可放入适量肥皂水煮沸20min,再用热水将肥皂和血膜洗去,自来水反复冲洗,必要时再置95%乙醇中浸泡1h,然后,擦干或烤干,备用。,2,.,使用玻片,：,只能手持玻片边缘,切勿触及玻片表面,以保持玻片清洁,、,干燥,、,中性、无油腻。,注 意 事 项,玻片,1.玻片清洗：新玻片常有游离碱质,因此应用 清洗液或1,3.,良好的血,涂,片,厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,边缘整齐,两侧留有空隙。,血滴越大，角度越大，速度越大，血膜越厚。,4.,血涂片,干透,后方可染色，否则染色过程中血膜容易脱落。,血,涂,片制好后最好,立即固定染色,以免细胞溶解和发生退行性变。,注 意 事 项,推,片,3.良好的血涂片,厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,边缘整齐,5.PH,值影响细胞染色,配制染液必须用,优质甲醇,稀释染液必须用,缓冲液,近中性水,冲洗,否则各种细胞染色反应异常,致使细胞的识别困难,甚至造成错误。,6.,染色时间与染液浓度、室温高低、细胞多少有关。,染液越淡、室温越低、细胞越多,染色时间越长或适当增加染液量。,7.,染液不可过少,以防蒸发干燥染料沉着于血涂片上难冲洗干净。,流水冲去染液,不能先倒掉染液,以免染料沉着于血涂片上。,冲洗时间,不宜过久，以防脱色。,注 意 事 项,染色,5.PH值影响细胞染色,配制染液必须用优质甲醇,稀释染液必须,1.6,种白细胞形态绘图。,2.,本次实验的关键环节是什么？,作业,作业,