碱性磷酸酶km值的

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,碱性磷酸酶Km值的测定,底物浓度,酶浓度,pH,温度,激活剂,抑制剂,研究一种因素的影响时，其余各因素均恒定。,影响 酶促反响的因素,底物浓度对反响速率影响,在其他因素不变的情况下，底物浓度对反响速率的影响呈矩形双曲线关系。,S,V,S：底物浓度,V：不同S时的反响初速度,Vmax：最大反响速度(maximum velocity),m：米氏常数(Michaelis constant),V,max,S,K,m,+S,Km值,Km等于酶促反响速度为最大反响速度一半时的底物浓度。,意义：,a)Km是酶的特征性常数之一；,b)Km可近似表示酶对底物的亲和力；,c)同一酶对于不同底物有不同的Km值。,K,m,K,m,S,2,K,m,+S,V,max,V,max,S,V,max,V,S,K,m,V,max,/2,双倒数作图法,V,max,S,K,m,+S,V=,（林贝氏方程）,+,1/V=,K,m,V,max,1/V,max,1/S,两边同取倒数,m,值与,max,值的测定,本卷须知,1 底物和酶取样准确,2 保温时间准确,1,2,3,4,5,6,7,加入酶的时间,加入碱性溶液,终止反应的,时间,9:00:00,9:00:30,9:01:30,9:02:00,9:02:30,9:03:00,9:01:00,9:15:00,9:15:30,9:16:00,9:16:30,9:17:00,9:17:30,9:18:00,保证每个试管的反响时间为15分钟,实验报告,1 绘制矩形双曲线图,2 绘制双倒数图，并通过双倒数图读出碱性磷酸酶对磷酸本二钠的Km值,本卷须知,1 做如下表格,2 可电脑作图,3 假设人工作图，在坐标轴上禁止出现分数(1/2,1/16),4 实验的最终目的是测得Km值，因此实验报告最终必须得出结论：Km值等于多少,1,2,3,4,5,6,7,Abs,S,1/ABS,1/S,