第七章 脂类的测定

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第七章 脂类的测定,概述 巴布科克法和盖勃法,索氏提取法 氯仿,-,甲醇提取法,酸水解法 油脂理化特性的测定,罗紫,-,哥特里法,第一节 概述,1.,脂肪的重要性,重要的营养成分，热量的主要来源；,脂溶性维生素的溶剂，有助吸收；,脂蛋白对人体生理功能非常重要；,脂类含量直接影响产品的风味、品质等；,食品质量管理的重要指标；,2.,脂肪测定的意义,评价食品品质；衡量食品营养价值；改善食品风味；生产过程管理；储藏方式研究；,3.,脂肪存在形式：,游离态,+,结合态,游离态：,甘油三酯、蜡、甘油磷脂（甘油,+,脂肪酸,+,磷酸盐,+,其他含氮基团）等；,结合态：,如糖脂、脂蛋白等；,4.,溶解性：,不溶于水，易溶于有机溶剂,乙醚：,应用最多，溶解能力强；但沸点低,(,34.6,),，易燃，常含水分,(,要求样品干燥、乙醚无水,),；,石油醚：,溶解能力稍弱；比乙醚沸点高,(,沸程,35-45),，吸收水分少,(,允许样品含微量水分,),；,氯仿,-,甲醇：,对结合态脂肪提取效率高。,5.,样品的预处理,脂肪分析中常见的预处理步骤主要有：去除水分、降低粒子大小、将脂质从结合蛋白或结合糖类中分离。,（,1,）样品预干燥：,若样品含水，疏水溶剂就不易穿透含水的食品组织，因而不能有效提取脂类；此外，乙醚易饱和少量水，造成非脂成分溶出使结果偏高。,具体方法：烘干（低温真空干燥或冷冻干燥，因为常压干燥易造成干燥过程中脂类和蛋白质或糖类结合）、加无水硫酸钠等；,5.,样品的预处理,（,2,）减少样品颗粒大小：,能否从干燥食品中有效地萃取脂类同样也取决于样品的颗粒大小,因此，充分的粉碎非常重要。,（,3,）酸水解：,某些食品如面包、面粉和动物产品中的主要脂类与蛋白质或碳水化合物相结合。因此不能直接用非极性溶剂进行萃取。要经过酸水解后才能进行萃取。,第二节 索氏提取法,1.,原理,只能测游离态脂肪,将经过预处理得到的松散且干燥的样品用无水乙醚或石油醚等有机溶剂，在,索氏提取器,(,原理,？,),中回流提取，使样品中的脂肪溶入有机溶剂中，回收溶剂后的残留物即为,粗脂肪,。,2.,样品处理,固体样品：,称取干燥并研细的样品,25g,，拌以海砂和无水硫酸钠，使样品松散，再移入滤纸筒内；,液体或半固体样品：,称取,510g,于蒸发皿中，加海砂,20g,，于沸水浴上蒸干，经,95105,烘干，研细，再将装入滤纸筒，蒸发皿及粘附有样品的玻璃棒，用蘸有无水乙醚的脱脂棉擦干净，将棉花一同放入滤纸筒。,3.,提取,将滤纸筒放入索氏提取器内，连接好已称至恒重的接收瓶，从冷凝管上端加入无水乙醚，加入量为接收瓶的体积的,2/3,，在略高出乙醚沸点的水浴上进行回流提取，一般抽提时间为,612h,。,4.,干燥称重,取下接收瓶，回收乙醚，待瓶内乙醚剩,12mL,时，在水浴上蒸干，,95105,干燥至恒重。,5.,计算,脂肪含量,(,m,2,-,m,1,)/,m,100%,式中,m,2,-,接收瓶和脂肪的质量，,g,；,m,1,-,接收瓶的质量，,g,；,m,-,样品的质量，,g,；,6.,注意事项,样品需干燥并研细，水分会影响提取效果，并溶出水溶性成分；,乙醚需无水、无醇、无过氧化物等杂质,(,原因,?),；,滤纸筒及样品高度,？,；,抽提时水浴温度不能过高；,通风，防火；,检验抽提是否完全,(,滤纸或玻片,),。,第三节 酸水解法,1.,原理,游离态,+,结合态,将样品与盐酸溶液一同加热进行水解，使结合态或者包藏在组织中的脂肪游离出来，再用乙醚和石油醚提取，回收溶剂，干燥后称重。,2.,样品水解,固体样品：,准确称取,2.0g,，置于,50mL,大试管中，加,8mL,水混合均匀，再加,10mL,盐酸。,液体样品：,取,10.0g,放入试管中，直接加,10mL,盐酸。,将试管放入,7080,水浴中，每隔,510min,用玻璃棒搅拌一次，直至样品中脂肪完全游离为止，约,4050min,。,3.,提取,试管中加入,10mL,乙醇,(,作用,?),混合，冷却后将混合物移入,100mL,具塞量筒中，用,25mL,乙醚,分多次洗涤试管，合并入量筒中，加塞振摇,1min,，小心打开塞子放出气体，再塞好，静置,12min,。小心开塞，用,石油醚,-,乙醚,等量混合溶剂冲洗塞子及筒口附近。静置,1020min,待上部液体清澈，吸出上清液于已经称量至恒重的锥形瓶内，具塞量筒再加,5mL,乙醚洗涤，振摇静置后，乙醚合并入锥形瓶内。,4.,烘干称重,锥形瓶在水浴上蒸干，置,100105,烘箱中干燥至恒重。,5.,结果计算,同索氏提取法,6.,适用范围,(p142),、注意事项,(p143),乙醇、石油醚作用,?,第四节 罗紫,哥特里法,1.,原理,碱性乙醚提取法,牛乳中的脂类以脂肪球呈乳浊液状态存在。,用氨,-,乙醇溶液破坏乳的胶体性状和脂肪球膜，非脂成分溶于氨,-,乙醇溶液，脂肪则游离出来。再用乙醚,-,石油醚提取脂肪，挥干称量，即得脂肪含量。,2.,操作,(P144),样品,加氨水水浴加乙醇冷却加乙醚,-,石油醚萃取蒸馏回收溶剂挥干烘干称重。,3.,说明,氨水、乙醇、石油醚的作用？,氨水,改变溶液体系的电荷性质，阻止胶体形成；,酪蛋白酸钙盐成为可溶性的酪蛋白酸铵。,乙醇,沉淀蛋白质；,溶解醇溶性杂质。,石油醚,降低乙醚极性，减少水溶性组分溶出。,4.,适用范围与特点,适用于各种液状乳,(,生乳、加工乳、部分脱脂乳、脱脂乳等,),，各种炼乳、奶粉、奶油及冰淇淋等能在碱性溶液中溶解的乳制品，也适用于豆乳或加水呈乳状的食品。,乳及乳制品脂类定量的国际标准法，国际标准化组织,(ISO),，,(FAO/WHO),等采用。,第五节,巴布科克法和盖勃法,1.,原理,P145,用浓硫酸溶解乳中的乳糖和蛋白质等非脂成分，将牛奶中的酪蛋白钙盐转变成可溶性的重硫酸酪蛋白，使脂肪球膜被破坏，脂肪游离出来，再利用加热离心，使脂肪完全迅速分离，直接读取脂肪层的数值，便可知被测乳的含脂率。,2.,仪器、操作,(P145-146),3.,说明,浓硫酸的浓度、作用；盖勃法中异戊醇的作用。,4.,适用范围与特点,适用于鲜乳及乳制品脂肪的测定。对含糖多的乳品,(,如甜炼乳、加糖乳粉等,),，采用此方法时糖易焦化，使结果误差较大，故不适用。此法操作简便，迅速。对大多数样品来说测定精度可满足要求，但不如重量法准确。,1.,原理,游离态,+,结合态,将试样溶于氯仿,-,甲醇溶液，水浴中回流提取，过滤除去非脂类成分，水浴蒸发溶剂，再用石油醚溶解，蒸馏除去石油醚，干燥后称重。,2.,适用范围,(p148),适用于含结合态脂类，特别是含磷脂多的样品。,第六节 氯仿,甲醇提取法,过氧化值的测定,氧化值测定,酸价的测定,皂化价的测定,碘价的测定,第七节 食用油脂理化特性测定,过氧化值的测定,过氧化物是油脂氧化过程的中间产物。,过氧化值,滴定,1g,油脂所需,(0.002 mol/L)Na,2,S,2,O,3,标准溶液的体积,(mL),。反映油脂,是否新鲜及酸败程度,。,测定方法,(,碘量法,),GB/T 5538-95,油脂样品加,(,氯仿,-,冰醋酸,),混合液溶解加饱和,KI,加盖避光反应,(,析出,I,2,),淀粉作指示剂，用,Na,2,S,2,O,3,标准溶滴定计算。,注意事项,淀粉指示剂接近滴定终点时再加，避免淀粉过早加入对,I,2,产生吸附，影响测定结果。,氧化值测定,氧化值,酸败的油脂分解物氧化时所需氧的毫克数。,反映油脂,是否新鲜及酸败程度。,原理,酸性介质中，用过量高锰酸钾标准溶液氧化酸败产物，过量的高锰酸钾用草酸还原，再用高锰酸钾滴定过量的草酸。,测定方法,油脂样品加热蒸馏馏出液加硫酸及高锰酸钾加热，加入草酸标准溶液用高锰酸钾标准溶液滴定至紫红色,30s,不褪色计算。,酸价的测定,酸价,中和,1g,油脂中的,游离,脂肪酸所需氢氧化钾的质量,(mg),。,反映油脂酸败的主要指标,。,测定方法,中性,(,乙醇,-,乙醚,),混合溶剂溶解样品用标准,KOH,溶液滴定脂肪酸计算酸价,皂化价的测定,皂化价,中和,1 g,油脂中的全部脂肪酸,(,游离,+,结合,),所需氢氧化钾的质量,(mg),。,可对油脂的种类和纯度进行鉴定,。,测定方法,GB/T 5534-95,样品加,(,氢氧化钾,-,乙醇,),溶液水浴回流加热,(,皂化,),加酚酞指示剂趁热用标准盐酸溶液滴定,(,中和过量的碱,),至红色消失同时做空白计算。,碘价的测定,碘价,(,碘值,),100 g,油脂所吸收的氯化碘或溴化碘换算成的碘的质量,(g),。,反映油脂的不饱和程度,。,测定方法,(,韦氏法,),GB/T 5532-95,油脂样品加,(,环己烷,+,冰醋酸,),混合溶剂溶解加韦氏碘液,(ICl),加盖避光反应加,KI(,与过量,ICl,反应，析出,I,2,),用,Na,2,S,2,O,3,滴定,I,2,(,同时做空白,),记录消耗标准,Na,2,S,2,O,3,量计算碘价。,